ADCC和ADCP报告基因T细胞系

ADCC和ADCP报告基因T细胞系

抗体依赖的细胞毒性作用(ADCC)和抗体依赖的细胞介导吞噬作用(ADCP)是在单克隆抗体治疗中最主要的两种模式。InvivoGen提供一系列经过专门设计可用于评估特定免疫球蛋白对于ADCC和ADCP效力的Jurkat-LuciaTM NFAT 细胞系,这些细胞来自于人源T淋巴细胞Jurkat细胞系改造所得,可以稳定地表达CD16或CD32,即免疫球蛋白恒定区的两个Fc-γ受体(FcγR)。

Jurkat细胞自身可表达一种具有功能性的NFAT(活化T细胞的核因子)转录因子,该转录因子参与了ADCC和ADCP的早期信号传导事件。ADCC/ADCP的诱导水平是通过NFAT依赖的Lucia荧光素酶报告蛋白产生的生物发光信号来测量。

细胞系 产品名称 概述 报告系统 货号
ADCC AND ADCP EFFECTOR CELLS
Jurkat (human) Jurkat-Lucia™ NFAT-CD16 NFAT, human CD16A (FcγRIIIA, V158 allotype) transfected Lucia jktl-nfat-cd16
Junkat-Lucia™ NFAT-CD16-Low NFAT, human CD-16A(FcγRIIIA) transfected Lucia jktl-nfat-cd16lo
Jurkat-Lucia™ NFAT-CD32 NFAT, human CD32A(FcgRIIA; H131 allotype) transfected Lucia jktl-nfat-cd32

Jurkat-LuciaTM NFAT-CD16 and Jurkat-LuciaTM NFAT-CD32细胞分别对应是InvivoGen所生产的ADCC和ADCP分析的效应报告基因细胞。它们可以和InvivoGen所生产的Raji衍生的靶细胞一起结合使用(产品如下)。

细胞系 产品名称 概述 报告系统 货号
IMMUNECHECKPOINTTARGETCELLS
Raji (human) Raji-Null HumanlymphoblastCD19/CD20/ControlTargetCells None raji-null
Raji-h4-1BB Humanlymphoblasth4-1BBexpressingCells None raji-h41bb
Raji-hCTLA4 HumanlymphoblasthCTLA4expressingCells None raji-hctla4
Raji-HER2 HumanlymphoblastHER2expressingCells None raji-her2
Raji-hEGFR HumanlymphoblasthEGFRexpressingCells None raji-hegfr
Raji-hICOS HumanlymphoblasthICOSexpressingCells None raji-hicos
Raji-hLAG3 HumanlymphoblasthLAG3expressingCells None raji-hlag3
Raji-hOX40 HumanlymphoblasthOX40expressingCells None raji-hox40
Raji-hPD-1 HumanlymphoblasthPD-1expressingCells None raji-hpd1
Raji-hPD-L1 HumanlymphoblasthPD-L1expressingCells None raji-hpdl1
Raji-hTIGIT HumanlymphoblasthTIGITexpressingCells None raji-htigit
Raji-hVISTA HumanlymphoblasthVISTAexpressingCells None raji-hvista

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Invivogen — ADCC细胞和内毒素、支原体检测

Invivogen — ADCC细胞和内毒素、支原体检测

抗体依赖性细胞毒性(ADCC)报告细胞

抗体依赖性细胞毒性(ADCC)是治疗性单克隆抗体(mAbs)的一种主要作用方式。这种免疫反应依赖于单克隆抗体的双重活性:可变区确保特异性识别靶细胞表达的抗原,恒定区的“可结晶片段”Fc结合效应细胞表面的Fc受体(FcRs)。根据抗体同种型,Fc区对激活性FcRs显示不同的结合亲和力。

ADCC由表达FcγRIIIA (CD16A)的自然杀伤(NK)细胞介导,FcγRIIIA是IgG的活化受体。NK细胞表面的FcγRIIIA交联导致下游信号传导,包括细胞内钙浓度的增加,calcneurin/钙调素介导的NFAT去磷酸化(活化T细胞的核因子),允许其核转位并与ADCC相关基因的启动子区结合。最终,效应细胞释放杀死靶细胞的细胞毒性颗粒。

为了评估单克隆抗体的功能,invivogen为主要依赖NK细胞或外周血单核细胞的费力的经典ADCC检测提供了替代细胞。

产品货号 产品名称 描述
jktl-nfat-cd16 Jurkat-Lucia™ NFAT-CD16 Cells Human T Lymphocytes – ADCC Reporter Cells
raji-null Raji-Null Cells Human lymphoblast cells – ADCC CD19/CD20/Control Target Cells
raji-hctla4 Raji-hCTLA4 Cells Human lymphoblast cells – ADCC CTLA-4 Target Cells
raji-hpd1 Raji-hPD-1 Cells Human lymphoblast cells – ADCC PD-1 Target Cells
raji-hpdl1 Raji-hPD-L1 Cells Human lymphoblast cells – ADCC PD-L1 Target Cells

内毒素和⽀原体检测

PlasmoTest™提供一种快速、简便、可靠的可视化方法检测细胞培养中的支原体污染,该方法首次使用细胞检测支原体。PlasmoTest™试剂盒中的支原体感受器细胞是通过病原体受体——Toll样受体2(TLR2)来检测支原体。在支原体存在的情况下,TLR2启动下游信号通路,活化NF-kB和一些其他的转录因子,这些转录因子诱导SEAP(分泌型胚胎碱性磷酸酶)分泌到上清中,SEAP可以引起HEK-Blue™ Detection培养基的颜色变为紫色或蓝色。该方法无假阳性结果,出现颜色变化的阳性结果即可判定为细胞污染。

HEK-blue LPS检测试剂盒基于TLR4识别革兰氏阴性菌中结构不同的LPS,特别是脂质A(它们的毒性部分)的能力。设计成对LPS极其敏感的专有细胞,称为HEK-blue-4细胞,是这种内毒素检测试剂盒的主要特征。HEK-blue-4细胞检测到低浓度LPS的存在,起始浓度低至0.03ng/ml,都可以导致NK-κB活化。

产品货号 产品名称 描述
rep-pt1 PlasmoTest™ – Mycoplasma Detection Kit 检测支原体污染
rep-lps2 HEK-Blue™ LPS Detection Kit 2 检测支原体污染

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检测ADCC/ADCP的便捷工具

检测ADCC/ADCP的便捷工具

抗体除了利用中和作用阻截病毒以外,也可以通过 Fc 介导的效应功能,例如抗体依赖性细胞毒性 (ADCC) 或吞噬作用 (ADCP)等方法清除病毒。不过传统使用原代细胞的ADCC和ADCP活性检测方法较为复杂,目前现有新冠抗体药物的活性测定主要是基于中和实验。

厦门大学夏宁邵教授团队近日发表的论文中则利用了InvivoGen的Jurkat-Lucia™NFAT报告细胞作为效应细胞,以及稳定表达新冠spike蛋白的靶细胞,对新冠抗体药物和新冠康复患者的血浆样本进行ADCC/ADCP活性检测。实验平台可以通过NFAT通路激活产生的Lucia萤光素酶定量分析 ADCC 和 ADCP,比起传统 ADCC/ADCP 测定更为便捷。研究结果发现尽管所有测试的单抗药物都是IgG1架构,但可能出于抗体亲和力或表位多样性的差异,它们的ADCC 和 ADCP 活性有明显不同。

另外,新冠康复患者的血浆样本里的抗体也大多数检测出具有 ADCC 和ADCP 活性,其滴度与中和抗体滴度呈正相关的关系。研究团队总结,ADCC 和 ADCP 活性或者可作为评估新冠免疫的另一关键指标。

相关产品(订购产品请联系Invivogen代理商上海金畔生物)

Jurkat-LuciaNFAT Cells for ADCC & ADCP Assays
(
检测ADCC/ADCP的便捷工具 https://www.invivogen.com/jurkat-lucia-nfat-adcc-adcp-cells 

Jurkat-LuciaNFAT Cells

(检测ADCC/ADCP的便捷工具https://www.invivogen.com/jurkat-lucia-nfat-cells )

检测ADCC/ADCP的便捷工具

检测ADCC/ADCP的便捷工具

全文链接:https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0166093422001112?via%3Dihub

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