IOX-1
| MDL | MFCD18417145 |
| 别名 | 8-Hydroxy-5-quinolinecarboxylicacid |
| CAS | 5852-78-8 |
| 分子式 | C10H7NO3 |
| 分子量 | 189.17 |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| SMILES | O=C(C1=C2C=CC=NC2=C(O)C=C1)O |
| 靶点 | Histone Demethylase;KDM3A，KDM4C，KDM6B，KDM2A，KDM4E |
| 规格 | 2mg 5mg 10mg |
IOX2
| MDL | MFCD22580424 |
| EC | EINECS 804-733-4 |
| 别名 | JICL38; 2-(1-苄基-4-羟基-2-氧代-1,2-二氢喹啉-3-甲酰氨基)乙酸 |
| CAS | 931398-72-0 |
| 分子式 | C19H16N2O5 |
| 分子量 | 352.34 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | IOX2 是一种特异性的脯氨酰羟化酶-2 (PHD2) 抑制剂，IC50 为 22 nM。[1-2] |
| IC50 | 22 nM (PHD2)[1] |
| In Vitro | 对于PHD2而言，IOX2至少为2-5000倍选择性，通过IC50值判断，相对于KDM和因子抑制HIF（FIH）[1]。当在常氧和缺氧条件下生长时，IOX2显著上调正常人表皮角质形成细胞（NHEK）和正常人皮肤成纤维细胞（NHDF）中VEGF-A和BNIP3的转录。 IOX2有效促进角质形成细胞和成纤维细胞中的HIF-1α稳定性，核转位和靶基因表达。此外，IOX2显著上调缺氧条件下生长的硫芥（SM）暴露的NHEK和NHDF中VEGF-A和BNIP3的生物合成和转录。这些结果表明，应用IOX2可用于恢复角质形成细胞和成纤维细胞中受SM影响的HIF-1α稳定性和信号传导活性[2]。 |
| In Vivo | 为了研究IOX2作为体内功能性探针的效用，测试IOX2以上调整个生物体中的HIF信号传导，即转基因斑马鱼（Danio rerio）。由于PHD3编码基因的表达受人和斑马鱼中HIF的调节，因此PHD3水平是HIF活性的读数。产生斑马鱼缺氧报道系，其表达具有phd3启动子元件的GFP。用化合物（10μM）处理2天后受精后3天的转基因野生型胚胎相对于对照显示肝脏中phd3：EGFP表达的明显增加。用IOX2观察到GFP水平显著增加[1]。 |
| 激酶实验 | 抑制测定在384孔白色ProxiPlates中在10μL反应体积中进行。标准反应混合物由化合物（2％DMSO终浓度），酶混合物（0.001μM的PHD2,10μM的Fe（II），100μM的抗坏血酸盐）和肽混合物（0.06μM的生物素化的C-末端氧依赖性）组成。在50mM HEPES pH 7.5,0.01％Tween-20和0.1％BSA缓冲液中的降解域（CODD）肽，2μM的20G）。将化合物（例如，IOX2）与酶混合物预孵育15分钟，然后在22℃下与肽混合物孵育10分钟。用5μL的30mM EDTA淬灭每个反应。将含有AlphaScreen珠子的珠子混合物与对羟基-HIF1α（Pro564）具有选择性的兔单克隆抗体预孵育1小时，并在22℃下再加入孔中1小时。 |
| SMILES | O=C(O)CNC(C1=C(O)C2=C(N(CC3=CC=CC=C3)C1=O)C=CC=C2)=O |
| 靶点 | HIF/HIF Prolyl-Hydroxylase |
| 动物实验 | 斑马鱼[1] Phd3：gfpsh144/sh144鱼（Danio rerio）正在生产phd3：gfpsh144/sh144胚胎，这些胚胎在28℃下在E3培养基中培养。 phd3：gfpsh144/sh144系是由phd3报告基因GFP构建体的BAC重组产生的缺氧报道系。在受精后3天，将潜在抑制剂（例如，IOX2）以10μM在1％DMSO中的新鲜培养基中添加。将胚胎与化合物一起温育另外48小时。 |
| 细胞实验 | 使用VHL缺陷型（具有空载体的肾癌细胞，RCC4）和VHL感受态细胞人胚肾HEK293T，骨肉瘤U2OS和RCC4/VHLHA（用C末端HA标记的wt VHL稳定转染的RCC4）。用DMSO（对照）和测试的化合物（例如，IOX2）处理细胞（溶解在DMSO中，除了DMOG，其溶解在PBS中并直接添加到培养基中）4-5小时。用针对羟基-Pro564（CODD-OH）和羟基-Asn803（CAD-OH）的抗体探测细胞提取物。 HIF-1α谱带强度用于归一化羟化信号[1]。 |
| 数据来源文献 | [1]. Chowdhury R, et al. Selective small molecule probes for the hypoxia inducible factor (HIF) prolyl hydroxylases. ACS Chem Biol. 2013 Jul 19;8(7):1488-96. [2]. Deppe J, et al. Impairment of hypoxia-induced HIF-1α signaling in keratinocytes and fibroblasts by sulfur mustard is counteracted by a selective PHD-2 inhibitor. Arch Toxicol. 2016 May;90(5):1141-50. |
| 规格 | 5mg 10mM*1mL in DMSO 10mg 50mg |
IOX2 是一种特异性的脯氨酰羟化酶-2 (PHD2) 抑制剂。