NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统 #E8201S 1 set-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 蛋白表达和纯化技术 – 表达系统 :大肠杆菌

NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统                              收藏

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#E8201S
1 set
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产品特点

该产品可直接替换 NEB #E8200,pMAL™ 蛋白融合表达系统

NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统利用 Ptac 超强启动子和麦芽糖结合蛋白(MBP)的翻译起始信号来增强目标蛋白在大肠杆菌中的溶解度和表达水平。所得产物是 MBP 融合蛋白,后续可通过亲和反应进行纯化。
 

特性

·稳定可靠的大肠杆菌表达系统:蛋白产量高(可达 100 mg/L)
·目标蛋白与 MBP 融合表达可增强其在大肠杆菌中的溶解度(1)
·两步纯化:第一步:直链淀粉洗脱后使用 TEV 蛋白酶切割,第二步:经镍柱填料分离可获得高纯度的无标签的靶蛋白
·使用麦芽糖进行温和洗脱;无需洗涤剂或刺激性变性剂
 

概述

 在 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统中,pMAL-c6T 载体提供了一种将克隆基因或开放阅读框编码的蛋白质表达和纯化的方法。首先,将目标克隆基因插入大肠杆菌编码麦芽糖结合蛋白(MBP)的 malE 基因框架下游;这样构建的载体可表达 MBP 融合蛋白(2,3)。pMAL-c6T 载体表达 N 端标记六组氨酸的 malE 基因(缺少分泌信号序列,并且经改造可以与直链淀粉更紧密地结合),其后是 TEV 蛋白酶识别序列、多克隆酶切位点和三位终止密码子。pMAL-c6T 载体在细胞质中表达 MBP 融合蛋白。这种方法使用“tac”强启动子和 malE 翻译起始信号,从而能够使克隆序列进行高水平表达(4,5)。然后,利用 MBP 与麦芽糖的亲和特性,使用直链淀粉树脂对融合蛋白进行一步纯化(6)。


直链淀粉纯化后,可以使用 TEV 蛋白酶将 MBP 标签从目标蛋白上切下来,目标蛋白不残留任何载体衍生基团。MBP 标签和 TEV 蛋白酶均带有 His 标签,因此可轻松从反应中去除。将上述反应产物经 NEBExpress 镍柱填料(NEB#S1428)分离,可去除 MBP 标签和 TEV 蛋白酶,从而在收集管液中可获得目标蛋白。目标蛋白产量最高可达 100 mg/L,一般产量为 10–40 mg/L。

图 1:NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统的原理图
NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统                               #E8201S 1 set
图 2:使用 NEBExpress® MBP 融合表达及纯化系统进行蛋白表达
NEBExpressTM MBP 融合表达及纯化系统                               #E8201S 1 set
亲和纯化的 MBP6-TEV-ParamyosinΔSal 蛋白使用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。泳道 1:蛋白标准品。泳道 2:未处理的细胞。泳道 3:转入目标基因的细胞。泳道 4:使用麦芽糖从直链淀粉柱上洗脱下来的纯化融合蛋白。泳道 5:TEV 蛋白酶切割后的纯化蛋白。泳道 6:NEBExpress 镍柱填料收集管液分离的目标蛋白。
 

试剂盒组分

随产品提供如下试剂

 

名称

储存温度()

浓度

pMAL-c6T DNA

 

200 µg/ml

Amylose Resin

4

 

TEV Protease

-20

10,000 units/ml

TEV Protease Reaction Buffer

-20

10 X

Anti-MBP Monoclonal Antibody

-20

 

MBP6 Protein

-20

40 µg/ml

MBP6-TEV-Paramyosin ΔSal

-20

5 mg/ml

E. coli ER2523 (NEB Express) (Glycerol Stock)

-20

 

储存温度

 -20℃

肠出血性大肠杆菌用Primer Set酶试剂盒Takara Clontech

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肠出血性大肠杆菌用Primer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara S006 Primer Set EVT-1&2 1,000 pmol each ¥1,475 肠出血性大肠杆菌用Primer Set 肠出血性大肠杆菌用Primer Set 肠出血性大肠杆菌用Primer Set
Takara S007 Primer Set EVS-1&2 1,000 pmol each ¥1,475 肠出血性大肠杆菌用Primer Set 肠出血性大肠杆菌用Primer Set 肠出血性大肠杆菌用Primer Set
Takara S008 Primer Set EVC-1&2 1,000 pmol each ¥1,475 肠出血性大肠杆菌用Primer Set 肠出血性大肠杆菌用Primer Set 肠出血性大肠杆菌用Primer Set
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■ 制品列表肠出血性大肠杆菌用Primer Set

Code No.
制品名称
S006
 肠出血性大肠杆菌VT1基因检出用Primer Set EVT-1&2
S007
 肠出血性大肠杆菌VT2基因检出用Primer Set EVS-1&2
S008
 肠出血性大肠杆菌VT基因检出用Primer Set EVC-1&2

 
□ 浓度 19 pmol/μl
□ 体积 53 μl
□ 检出细菌 enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) (Verocytotoxin-producing E. coli : VTEC)
 
■ 制品说明
下表是使用PCR方法特异性检测肠出血性大肠杆菌Vero毒素基因的引物信息。
Primer
(Code No.)
可检出基因 扩增片段大小
Vero毒素
1型基因
Vero毒素
2型基因
Vero毒素2型变异基因
EVT-1&2(S006) VT1         349 bp
EVS-1&2(S007)   VT2 VT2vha VT2vhb VT2vp1 404 bp
EVC-1&2(S008) VT1 VT2 VT2vha VT2vhb VT2vp1 171 bp
 
■ 保 存
-20℃。
 
 

页面更新:2019-12-25 14:13:07

痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set酶试剂盒Takara Clontech

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痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara S016 Primer Set INV-1&2 1,000 pmol each ¥1,475 痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set 痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set 痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set
Takara S017 Primer Set IPA-1&2 1,000 pmol each ¥1,475 痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set 痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set 痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set
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■ 制品列表痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌检出用Primer Set

Code No.
制品名称
S016  痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)invE基因检出用Primer Set INV-1&2
S017  痢疾杆菌和肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)ipaH基因检出用Primer Set IPA-1&2

 
□ 浓度 19 pmol/μl
□ 体积 53 μl
□ 检出细菌 Shigella sp. and enteroinvasive E. coli (EIEC)
 
■ 制品说明
下表是使用PCR方法特异性检测痢疾杆菌及肠侵袭性大肠杆菌病原基因的引物信息。
Primer (Code No.) 检测基因 扩增产物大小
INV-1&2( S016 )
invE 基因 293 bp
IPA-1&2( S017 )
ipaH 基因 242 bp
 
■ 保 存
-20℃。
 
 

页面更新:2020-06-16 14:56:49

逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)酶试剂盒Takara Clontech

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逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6166 Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 100 次 ¥1,031 逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 逆转录病毒滴度试剂Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)
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■ 制品内容 (100 次量)*1
Forward Titer Primer FRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
Reverse Titer primer RRT-1(10 pmol/ μl) 50 μl
RNA Control Template (5×108 copies/ μl)*2 10 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR) 1 ml×2
DNase I (RNase Free) (5 U/μl) 40 μl
10X DNase I Buffer 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
 
*1 Real Time RT-PCR 100次反应,DNase I 可以处理 20次。
*2 为了避免RNA Control Template反复冻融降解,请分成小包装-70℃~-80℃保存使用。
 
■ 制品说明
Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR) 是利用Real Time RT-PCR法测定基于MLV (murine leukemia virus: 小鼠白血病病毒) 改造的逆转录病毒载体的基因组RNA量,确定逆转录病毒滴定度的制品。本制品与One Step TB Green® PrimeScript RT-PCR Kit* (Perfect Real Time)(Code No. :RR066A/RR086A)一起使用,4小时内即能直接测定病毒上清液中RNA的滴定度。另外,本制品扩增的是MLV病毒包装信号的序列区,可以测定几乎所有的以MLV为基础改造的逆转录病毒载体的RNA滴定度。
逆转录病毒载体感染效率测定时,目的细胞被逆转录病毒载体感染后,通常是利用荧光和抗药性等测定感染效率,然后算出滴定度。这个方法需要数日,而且,如果没有报告基因和抗药性基因,使用此方法不能进行测定。另外,根据生物学滴定度决定感染复数 (MOI) 进行细胞感染时,滴定度测定需要数日,因此病毒上清液需要冷冻保存,冻融容易使病毒滴定度降低,并造成感染复数 (MOI) 不准,同时易造成污染。
本制品是对逆转录病毒载体的基因组RNA量进行测定,对没有报告基因和抗药性基因的逆转录病毒载体也能够测定滴定度。由于在4小时内即可得到测定结果,因此病毒上清液不需要冷冻保存,并可以根据测定的感染复数 (MOI) 进行感染。
配套使用的One Step TB Green PrimeScript RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 是采用嵌合荧光染料法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。本制品中使用了适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase (RTase H free) 和TaKaRa Ex Taq HS,具有高扩增效率和高扩增特异性,能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。
 
■ 保存
RNA Control Template: -80℃
其他组份:-20℃
 
 

页面更新:2024-02-29 10:51:53

espec爱斯佩克高温恒温干燥箱 SET-151H

espec爱斯佩克高温恒温干燥箱 SET-151H

espec爱斯佩克高温恒温干燥箱 SET-151H

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:ESPEC 爱斯佩克
生产厂家:espec爱斯佩克

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espec爱斯佩克高温恒温干燥箱 SET-151H

本产品为卧式结构,PID温湿度控制调节器控制性能精确,操作简单,可以选择定值运转和程序运转,同时可以选择斜率控制方式;多重安全装置,可靠性强;系列规格齐全,具有丰富的选购件,性价比高。适合于试验室、研究室、工矿企事业所需的干燥、热处理等用途。

产品技术参数

 

生产厂商

上海爱斯佩克环境试验设备有限公司

 

产地

中国 上海

 

电源

AC 380V 3Φ 4W 50 hz

 

最大电流

21.5 A

 

功率

9 KVA

 

使用环境

+5℃~+35℃

 

循环方式

强制热风循环方式

 

温度范围

环境温度加20℃~+200℃

 

温度波动度

±0.5℃

 

温度均匀性

±2.5℃ (+100.1℃~+200℃)
±2.5℃ (+100.1℃~+200℃)

 

温度上升时间

40分钟以内(室温~+200℃)

 

结构
外壳

防锈处理冷轧钢板(表面喷塑处理)

 

结构
内胆

铬-镍不锈钢板表面研磨加工

 

结构

双开门

 

结构
隔热材料

玻璃棉

 

结构
加热器

铬一镍合金电热丝式加热器

 

结构
鼓风机

离心式风机

 

温度指示调节器
调节方式

PID控制方式

 

温度指示调节器
运转方式

定值运行

 

温度指示调节器
设定范围

温度:0~210℃;1分~99小时59分

 

温度指示调节器
设定方式

数字增减方式 + 位移动键

 

温度指示调节器
显示方式

LED 数字显示

 

温度指示调节器
传感元件

K型热电偶

 

温度指示调节器
安全保护

输入断线检测功能、上限温度过热报警功能、蜂鸣器报警功能、自动温度过热防止功能、自行诊断功能

 

定时功能

1分~99小时59分

 

安全保护装置

电源用漏电断路器,电动机温度保护开关,温度保险丝,独立温度过升防止装置

 

搁板承重

20 Kg

 

产品内部尺寸

1000W1350H1000D (mm)

 

产品尺寸

1470W1960H1450D (mm) 不包括外凸部份

 

重量

约 600 Kg

 

附件

搁板 x 3 套
搁板架 x 3 套
使用说明书 x 1 册

 

备注

*1:在环境温度+23℃时;空载条件下按日本技术条件测得的数据。
*2:外尺寸包括鼓风机罩壳和脚轮高度;
*本公司亦可根据客户要求,承接设计、制造各种大型非标干燥箱。

引物对ApoPrimer Set (Bcl-2 family)酶试剂盒Takara Clontech

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引物对ApoPrimer Set (Bcl-2 family)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6623 ApoPrimer Set (Bcl-2 family)(库存销售完毕即终卖) 1 Set ¥1,188 引物对ApoPrimer Set (Bcl-2 family) 引物对ApoPrimer Set (Bcl-2 family) 引物对ApoPrimer Set (Bcl-2 family)
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■ 制品内容 (for 40 reactions per primer mix)
human Mcl-1 primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human Bfl-1 primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human Bax-α primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human Bcl-2 primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human Bak primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human Bik primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human Bcl-x primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
human β-actin primer mix (each 10 pmol/μl) 40 μl
APO Positive Control RNA 1 (106 copies/μl) 24 μl
 
■ 制品说明
Human Bcl-2家族蛋白是在细胞凋亡过程中起关键性作用的一类蛋白质,本制品包含扩增human Bcl-2 family基因的cDNA的Primer set。可扩增human Bcl-2 family中的7种基因的cDNA (mcl-1,bfl-1,bax-α,bcl-2,bak,bik,bcl-x*) 和β-actin基因。 (*human Bcl-x primer mix是在bcl-xLbcl-xS基因的相同序列上设计的引物,因此使用同一个引物可分别扩增bcl-xLbcl-xS基因) 。
APO Positive Control 1 RNA中包含上述8种引物的序列,可以与试剂盒中所有的引物进行PCR反应。以Positive Control RNA为模板的扩增产物,与实际mRNA扩增产物的片段大小不同,易于区别。
 
每种引物对扩增产物大小
Primer mix Positive Control RNA来源 mRNA来源
mcl-1 primer mix 358 bp 449 bp
Bfl-1 primer mix 331 bp 413 bp
Bax-α primer mix 330 bp 412 bp
Bcl-2 primer mix 304 bp 380 bp
Bak primer mix 297 bp 371 bp
Bik primer mix 296 bp 370 bp
Bcl-x primer mix 272 bp xL:340 bp
xS
:151 bp
β-actin primer mix 340 bp 275 bp
*:Bcl-x primer mix是在bcl-xLbcl-xS基因的相同序列上设计的引物,因此使用同一个引物可分别扩增bcl-xLbcl-xS基因。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

页面更新:2024-04-01 15:31:10

霍乱毒素检出用Primer Set酶试剂盒Takara Clontech

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霍乱毒素检出用Primer Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara S014 Primer Set VCT–1&2 1,000 pmol each ¥1,475 霍乱毒素检出用Primer Set 霍乱毒素检出用Primer Set 霍乱毒素检出用Primer Set
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□ 浓度 19 pmol/μl
□ 体积 53 μl
□ 检出细菌 Vibrio cholerae
 
■ 制品说明霍乱毒素检出用Primer Set
下表是使用PCR方法特异性检测霍乱毒素(CT)基因的引物信息。
Primer (Code No.) 检测基因 扩增产物大小
       VCT-1&2(S014) 霍乱毒素基因(ctx基因) 307 bp
 
■ 保 存
-20℃。
 
 

页面更新:2020-06-16 15:06:21

NEBuffer Set 1.1, 2.1, 3.1 + CutSmart #B7200S 5 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – Buffers – Buffers

NEBuffer Set 1.1, 2.1, 3.1 + CutSmart                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#B7200S
5 ml
339.00

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停产通知

 该产品于 2021 年 12 月 15 日停产,替代产品为 NEBuffer 套装 (r1.1、r2.1、r3.1 和 rCutSmart)(NEB #B7030)