淋巴细胞分离液

货号：BL590

规格：200ml

品牌：Biosharp

淋巴细胞分离液

产品简介：

人血中红细胞和白细胞等细胞密度较大,为1.090g/ml左右,淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090g/ml,血小板为1.030~1.035g/ml,本产品为密度在 1.077 g/mL 并且与外周全血等渗的溶液（分离液）,经过密度梯度离心,使一定密度的细胞按照相应密度梯度分布,从各种血细胞中分离出淋巴细胞。

本产品收集细胞的得率大于80%。

使用方法：

常规实验操作方法：

1、取新鲜抗凝血2ml,用等体积PBS或Hank’s液混匀。

2、在离心管中加入3ml分离液,小心将稀释后的血样平铺到分离液液面上方。

3、离心 400 g,30-40 min。

4、离心结束后,此时离心管中由上至下细胞分四层：第一层为血浆层,第二层为环状乳白色淋巴细胞,第三层为透明分离液层,第四层为红细胞层。

5、小心吸取第二层细胞到另一离心管中,加入三倍体积的PBS或Hank’s液混匀,60-100g,离心 10min,弃上清。以0.5ml后续实验所需相应液体重悬目的细胞。

注：血液样品量增大时,可通过改变离心管直径的方法始终保持样本量高度与分离液高度为2、4cm 与3cm,其他分离条件不变。

为满足客户实际使用需求,不同血液样本量推荐具体实验操作方法详见说明书。

注意事项：

1、全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果,最好在取血2h 内进行实验,血液存放时间越长,细胞分离效果越差。血液放置超过6h后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

2、本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品,应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品,因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面,影响细胞分离效果。

3、吸取过多的淋巴细胞层及分离液层会导致分离液交界处的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加。

4、吸取过多的淋巴细胞层上层溶液会导致血浆蛋白及血小板混杂。

5、当血液样本粘度过高需稀释时,最优稀释方法：将血液与PBS或 Hank’s液混匀备用。注：不当的稀释方法会降低细胞得率及活性。如血液样本经过稀释则分离过程中需适当降低离心力和离心时间。

7、 因血液样本的个体差异及血液粘度不同,需调整离心力及离心时间,离心力最大不超过1000g。

保存条件：

常温保存,有效期2 年。本品易感染细菌,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启封后置常温保存。如4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。

淋巴细胞分离液1.077（通用型）

货号：BL672A

规格：100ml

品牌：Jinpan

产品简介：

本产品是一种用于分离淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。人血中红细胞和粒细胞密度较大，为1.090 g/mL左右，淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/mL，血小板为1.030~1.035 g/mL。为此利用一种密度介于1.075～1.092之间而近于等渗的溶液做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布，从而将各种血细胞加以分离。

操作方法（常规方法，仅供参考）：

1、用2–4倍体积生理盐水、PBS或Hank’s等无菌稀释液稀释血液样品。

2、在离心管中加入15-20mL分离液，小心将稀释后的血样20-30mL平铺到分离液液面上方。

3、室温离心400 g，15–30 min。

4、离心结束后，此时离心管中由上至下细胞分四层：第一层为血浆层，第二层为环状乳白色淋巴细胞（目的细胞），第三层为透明分离液层，第四层为红细胞层。

5、小心吸取第二层细胞到另一离心管中，加入三倍体积的生理盐水、PBS或Hank’s液等无菌稀释液混匀，300g，离心 10min，弃上清。

6、为了去除残余血小板，可将细胞重悬于30-50mL生理盐水、PBS或Hank’s液等无菌稀释液中，室温200g离心10-15分钟，小心弃掉上清。

7、可选择性地重复第6步，将会去除绝大部分血小板。

8、用适当体积的后续实验所需相应液体重悬目的细胞，进行后续实验。

注意事项：

1、在实验过程中样本、试剂及实验环境均应在22±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过6h后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

2、本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。

3、吸取过多的淋巴细胞层及分离液层会导致分离液交界处的粒细胞被吸出从而使混杂的粒细胞数量增加；吸取过多的淋巴细胞层上层溶液会导致血浆蛋白及血小板混杂。

4、 因血液样本的个体差异及血液粘度不同，使用本试剂得到的分离效果也会有一定差异，可根据实际情况调整离心力及离心时间，离心力最大不超过1000g。

保存条件：

常温保存，两年有效；拆封后请置于4℃避光保存，一个月内使用。