labtch莱伯泰科酸纯化/酸清洗装置

labtch莱伯泰科酸纯化/酸清洗装置

labtch莱伯泰科酸纯化/酸清洗装置

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品牌:Labtech 莱伯泰科
生产厂家:labtch莱伯泰科

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 众所周知,酸广泛应用于ICP、ICP-MS分析样品,酸中所含有的各种杂质,会导致不良的试剂空白,使痕量、超痕量元素的测定发生困难。由于目前市面销售的高纯酸质量岑差不齐,直接导致了超痕量分析结果不一致:且超纯酸的市面价格非常昂贵,采购周期长,往往无法满足日常分析要求。因此,为了适应分析仪器的"苛刻"要求,分析化学领域的科学家们越来越重视纯酸的再纯化。

Cetac OmnipureTM——SUB-Boiling Distillation Systems

亚沸纯化系统性能和优点:

  • 所有部件均为惰性材料(Teflon®PFA&FEP)
  • 纯化温度能到110 ℃
  • 不需要专门的冷却系统
  • 程序升温设置
  • 蒸干自我保护设置
  • 控制端与主机分开,可实现远程控制,保护控制端和操作人员
  • 密闭手机系统设计
  • 使用标准化瓶收集纯化酸
  • 非常容易操作
全自动、酸逆流清洗系统是同于消解罐和ICP/ICP-MS配件的超痕量清洗!

清洗用于痕量分析的各种附件是一项审慎而重要的实验流程。传统的清洗方法是在热酸中浸泡数小时,但是这种方法不仅效率低、易造成大量的酸消耗,而且需要定期更换、热酸和酸蒸汽的暴露也往往给操作人员带来危险。 Milestone超净清洗器是一种自动、密闭、酸逆流系统,它能彻底、安全地清洗痕量分析所使用的各种附件。首先把需要清洗的容器放入超净清洗器中,设定需要的时间和温度,然后按“启动”。新鲜的、由蒸馏而得来的酸蒸汽在密闭的腔体内将持续地逆流,十分彻底地清洗掉容器上的任何金属污染物。清洗完毕后,容器被冷却、干燥后储存备用。显而易见,Milestone超净清洗器最大的优势在于可清洗掉所有酸中的任何痕量金属污染物,并将其留在液体酸中,绝不会接触已清洗干净的器件,可广泛用于清洗各种附件如小瓶、微波消解罐、烧瓶、玻璃器皿以及ICP/ICP-MS配件。

清洗器自动酸回流系统

  • 自动控温
  • 内置排气、冷却装置
  • PTFE镀层的不锈钢腔体
  • 2×20行LCD显示的控制终端
  • 尺寸:48D×50W×108H cm (19.2×20×43.2in)
  • 重量:70kg (154Ibs)
  • 电源:23V-50/60HZ

超净清洗器的特点:

  • 是清洗各种TFM、PFA、玻璃和石英等超痕量分析所用的最佳方案,这些仪器包括:微波消解的样品罐、ICP/ICP-MS配件 (如炬管等)
  • 只有超纯的酸蒸汽接触要清洗容器的表面
  • 表面污染物被清除后,干净的容器将不再接触清洗用的酸
  • 清洗干净的器皿在密闭的腔体内冷却、干燥
  • 确保不被空气中的污染物玷污,并且无需再冲洗、干燥
  • 操作者不会暴露于酸蒸汽中
  • PTFE支架简化了干净器件的操作方案
  • 可选用内置的应用程序或创建储存新程序
  • 自动控温
  • 具有排气和冷却装置,减少酸蒸汽的暴露
  • PTFE镀层的不锈钢腔体保证设备坚固耐用,并且防止了使用过程中的交叉污染
  • 纯化瓶:1L容量,PFA材质,单次可纯化500ml酸
  • 尺寸:纯化单元:43.5cm(W)×38.1cm(D)×73.7cm(H)
  • 控制单元:16cm(W)2×2.1cm(D)×11.5cm(H)
  • 总重:21.1kg
  • 电源需求:100-240VACHz,50-60Hz,7A
  • 温度范围:50 ℃ ~ 110 ℃,递增速率1℃
  • 纯化能力:300-500ml/24h
  • 加热设备:LT电热套
  • 加热功率:100W
  • 加热范围:0-200 ℃
  • 控温方式:电流控制
  • 水路部分:PE管路(不含循环水部分)
  • 设备支架:实心理化板材质

腺病毒纯化酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

腺病毒纯化
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631532 Adeno-X Maxi Purification Kit 2 Preps ¥5,151 腺病毒纯化 腺病毒纯化 腺病毒纯化
Clontech 631533 Adeno-X Maxi Purification Kit 6 Preps ¥13,046 腺病毒纯化 腺病毒纯化 腺病毒纯化
Clontech 631032 Adeno-X Mega Purification Kit 2 Preps ¥13,318 腺病毒纯化 腺病毒纯化 腺病毒纯化
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使用我们的腺病毒纯化试剂盒可以简便快速地纯化腺病毒。这是一种基于色谱的腺病毒纯化系统,可以让您在1.5小时内从感染细胞中纯化扩增后的腺病毒。当细胞病变效应(CPE)接近完成时,您只需收集细胞沉淀,裂解细胞,并纯化病毒。
我们的Adeno-X Maxi Purification Kit有宽泛的病毒纯化能力,可以毫不费力扩大或者缩小纯化规模。该试剂盒可纯化多达1×1012个腺病毒粒子,并提供纯化所需的所有缓冲液和材料。我们便捷的Adeno-X Mega Purification Kit中也提供了相同的技术,您可以使用它来生产和纯化多达1013个高感染性病毒颗粒(高达3×1011IFU)。
 
如何选择腺病毒纯化试剂盒?
  有多少细胞裂解液?   我应该选择哪个试剂盒?
  5×15 cm plates   Adeno-X Maxi Purification Kit
  25×15 cm plates   Adeno-X Mega Purification Kit
 
简单的色谱纯化程序
整个操作流程没有超速离心步骤,而是使用了一种特别的选择性结合腺病毒粒子的膜来进行色谱纯化。我们将膜装在一个小型的一次性滤芯中,可安全安装在标准尺寸的Luer-Lok注射器上。为了方便使用,注射器和过滤器组件都是预组装好的,随时可以使用。在过滤器和注射器之间还装配了一个单向阀,省去了纯化和洗涤过程中拆装注射器的麻烦。含有腺病毒的培养液通过连接到单向阀的管子吸入注射器,然后通过推出过滤器进行纯化。当含有病毒的培养液通过过滤器时,腺病毒粒子会吸附在膜上,将其从溶液中有效地分离出来。然后对结合在膜上病毒粒子进行洗涤和洗脱就可以获得高度纯化的病毒粒子。
 
获得高滴度纯化腺病毒
这种纯化方法纯化的病毒滴度和纯度,与CsCl密度梯度离心法所获得的效果是相当的,病毒粒子和感染单位比可低至20:1。与CsCl密度梯度离心法不同的是,这种方法安全有效,不需要经过严格的培训,也不需要昂贵的设备,只需要简单操作就可以稳定获得高产量的纯化腺病毒。
 
使用注射泵,轻松快速扩大规模
使用Mega kit可以轻松收集大量病毒。在该试剂盒中,我们提供了注射泵(如:Kent Scientific公司的Genie Plus)来驱动澄清的裂解产物通过三层过滤器。在结合、洗涤和洗脱过程中,注射泵恒定的压力和流速非常有助于病毒回收。
 
Overview
· 90分钟内纯化多达到1013腺病毒粒子
· 纯化多达5×15 cm plates (maxi kit) 或者25×15 cm plates (mega kit)细胞裂解液
· 易于使用的腺病毒纯化组件
· 不需要CsCl或者超速离心操作
 
TECH NOTE
Mega-Scale Adenovirus Purification System
 
Maxi Adenovirus Purification Kit
 
FAQs
Questions about adenoviral vector systems, purification and titration
 
 
 
产品详情请点击:腺病毒纯化
 
 

页面更新:2020-10-23 15:39:52

外泌体(Exosome)及其五种常用纯化方式介绍

外泌体(Exosome)及其五种常用纯化方式介绍

外泌体(Exosome)是发现于1986年,一种直径约30~150nm的双层膜囊泡状结构小体,可由机体内多种细胞如免疫细胞、干细胞、心血管细胞、网织红细胞、血小板、神经细胞和肿瘤细胞等主动分泌产生,广泛分布于外周血、尿液、唾液、乳汁、腹水、羊水等体液中。

外泌体携带大量特异性的蛋白质(如细胞因子、生长因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物质,在体内参与细胞通讯、细胞迁移、促血管新生和抗肿瘤免疫等生理过程,与多种疾病的发生和进程密切相关。由于外泌体的特殊结构和功能,使得它具有潜在的应用价值,一方面可以作为诊断多种疾病的生物指标,另一方面也可以作为治疗手段,未来有可能作为药物的天然载体用于临床治疗。

外泌体的研究日益活跃并令人瞩目。但是,由于外泌体的纳米尺寸,同其它类型的胞外囊泡在理化和生化特征上部分重叠,以及自身在大小、组成和功能方面存在异质性,其分离纯化也面临挑战。下面小欣给大家从文献中总结出了目前几大主流外泌体纯化方法,供大家参考。

1、差速离心法(UC)

通过差速超速离心分离外来体通常包括一系列不同离心力和持续时间的离心循环,以根据外来体与样品中其他成分的密度和大小差异来分离外来体,是目前最常用的分析方法。

优势:降低了使用分离试剂造成的污染和成本;样本处理量大,产量高。

缺点:仪器成本投入高,笨重,运行时间长,耗人力,不便携;超速离心可能破坏外泌体而影响下游分析;经常存在杂蛋白和脂蛋白污染。

2、基于大小的分离技术

超滤离心法也是目前很常用的纯化方法之一,其采用不同膜大小和截留分子量(MWCO)的膜过滤器,使大于MWCO的颗粒留下,而小于MWCO的颗粒被丢弃,超滤法作为一种有效的浓缩方法经常与其他外泌体分离方法联合应用。

分子排阻层析(SEC)也常被报道用于外泌体制备,使用具有化学惰性和稳定性的多孔填料,采用非吸附的层析方法,按照不同大小分子流经的路径长短不同来进行样品分离。外泌体在填料的排阻极限之外,无法进入填料的孔隙中,而紧跟着外水体积最先排出;蛋白等其它杂质由于分子量小,可以进入填料孔隙中,经过较长的路径而晚出峰,由此分离。

优势:超滤:快速,不需要特殊仪器,便携。将RNA提取液流经膜可直接用于RNA抽提。SEC:较高纯度外泌体;通常在重力流下操作从而保留了外泌体的完整性和生物活性;可重复性好;中度样本处理量。

缺点:超滤:仪器成本低,中等纯度;剪切力可引起外泌体损伤;有可能造成聚集和囊泡陷入膜孔中,或外泌体吸附在膜上而损失。SEC:仪器成本中等,需要专用的设备;不易放大,运行时间长。

3、外泌体沉淀(PEG-base)

聚乙二醇(PEG),它在水中具有超溶性,可以“束缚”水分子,迫使较难溶的成分,如EV、外泌体、蛋白质和其它较难溶的成分从溶液中分离出来。通常是4℃用PEG孵育样品过夜,随后通过低速离心或过滤即可沉淀回收外泌体。

优势:容易操作,不需要特殊仪器;样本处理量大,具有可放大性。

缺点:缺乏选择性的分离机制,容易和非外泌体污染共沉淀,如其它胞外囊泡、蛋白聚集体、 高丰度蛋白等;运行时间长,需要在分离前先去除脂蛋白等亚细胞颗粒,在分离后去除聚合物材料。

4、免疫亲和捕获技术

免疫捕获过程需要使用微珠,通常约1μm,其带有铁核,通常被称为磁珠,这些磁珠表面包被有可识别外泌体表面标记物(如CD9、CD63和CD81)的捕获分子。捕获分子通常是抗体,但也可能是配体或纳米小体。磁珠可生产用于捕获一个表面标记,如CD63,或使用泛捕获方法捕获所有这三个表面标记。

优势:针对特定来源或亚群的外泌体分离是很好的选择;相比于其它分离方法,纯度要高出很多;利于外泌体的分型。

缺点:试剂成本高,需要预先确认好的外泌体标签(抗原);样本处理量低,只有带标签的外泌体被识别而产量低;仅适用于Cell-free样品;肿瘤的异质性妨碍了免疫识别,可能会造成假阴性;抗原表位可能被封闭或掩藏。

5、微流控技术

微尺度下,利用外泌体的生理和生化特性进行分离,如免疫亲和特性、大小和密度,结合新兴的声波纳滤、电磁和电泳等技术。微流控技术包括捕获微流控技术、过滤微流控技术、磁分离微流控技术、声学分离微流控技术和介电泳微流控技术等。

优势:快速、低成本、高度便携、容易实现自动化,可将外泌体分离和后续检测进行集成。

缺点:缺乏标准化和大规模的临床样本测试,缺少方法验证,低/中等程度的样本处理量。

更多关于外泌体产品或技术问题请咨询上海金畔生物

GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635619 GST Purification Kit 5 Purifications ¥7,001 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂
Clontech 635607 Glutathione-Superflow Resin 10 ml ¥2,997 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂
Clontech 635608 Glutathione-Superflow Resin 100 ml ¥23,562 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂 GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂
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Code No. 产品名称
635619   GST Purification Kit
635607   Glutathione-Superflow Resin
635608   Glutathione-Superflow Resin
 
■ 产品描述
Glutathione-Superflow树脂可以通过分批、重力流以及FPCL的方法对GST标签蛋白质进行快速纯化。树脂的基本结构是6%的交联琼脂糖,共价结合了谷胱甘肽,可承受高达15 ml/cm2/min的流速和中等压力(最高150 psi)。
GST Purification Kit中包含足量的buffer和Glutathione-Superflow纯化柱(1 ml预装柱),可满足5次分批/重力流纯化,单次纯化得到的重组GST标签蛋白质的量最高可达10 mg。
 
■ 特点
· 简单易用,不需要优化
· 纯化产量更高,结合能力强(重组GST标签蛋白质的结合能力>10 mg/ml树脂)
· 产物更纯,没有细胞污染
· 可重复使用,树脂再生及储存操作简单
· 高性价比质
 
■ 产品应用
分批、重力流或FPLC的方法纯化GST标签蛋白质淀
 
Glutathione-Superflow树脂兼容的试剂
试剂 耐受浓度
  Beta-mercaptoethanol   10 mM (with caution)
  EDTA, EGTA   10 mM
  Ethanol   30%, for regeneration only
  Glycerol   20%
  HEPES   50 mM
  Imidazole   200 mM at pH 7.0-8.0
  KCl   500 mM
  MES   20 mM
  MOPS   50 mM
  NaCl   1.0 M
  NP-40   1%
  Tris   50 mM
 
Glutathione-Superflow树脂不兼容的试剂(以下试剂任意浓度都不兼容)
CHAPS、DTE、DTT、盐酸胍、SDS、尿素
 
■ 实验例
 
GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂
从全细胞裂解液中纯化GST标签蛋白质。使用本制品纯化柱分别对含有GST-DHFR(图A)和GST(图D)的全细胞裂解液样品进行纯化,对纯化过程中的各组分进行SDS-PAGE(图B&E)检测并使用anti-GST Ig G进行Western Blot检测(图C&F)。
 
 
产品详情请点击:GST标签蛋白质纯化 GST-纯化树脂
 
 

页面更新:2024-02-29 09:46:07

琼脂糖标记的凝集素在病毒蛋白纯化中的应用

琼脂糖标记的凝集素在病毒蛋白纯化中的应用

2020开年的新型冠状病毒疫情牵动了每一个人的心,在这场没有硝烟的战争中,全国的科研工作者都在争分夺秒的与病毒赛跑。我们时时刻刻和病毒生活在一起,它们在协助生命维系的同时也带来疾病。已有研究表明凝集素可以和病毒的包膜糖蛋白结合。为了更好的帮助科研工作者进行病毒相关工作的研究,现介绍用于病毒蛋白的纯化的Vectorlabs琼脂糖凝集素相关产品。

凝集素(Lectins)是动物细胞和植物细胞都能够合成和分泌的能与糖结合的蛋白质。一种凝集素具有对某一种特异性糖基专一性结合的能力。凝集素在生物识别现象中发挥作用涉及细胞和蛋白的识别。Vectorlabs琼脂糖凝集素采用耐热的、交联度4%的琼脂糖珠作为固相基质,通过共价结合的方式,在凝集素和琼脂糖珠间插入一个亲水间隔臂。这种结合方式可维持凝集素活性,小化结合凝集素发生的构象变化,避免可能造成的非特异性离子或疏水反应的发生。在较广的pH范围内线性稳定,与琼脂糖珠结合的蛋白复合物不易被Tris或常规的Buffer洗脱。

凝集素亲和层析是一种简单广泛应用的用于分离糖复合物的技术。糖复合物与固定的琼脂糖结合,未结合的物质被洗掉,再经糖蛋白洗脱液洗脱即可。通过此方法分离纯化可溶性蛋白、激素、抗原、多糖、细胞表面受体、血型物质、病毒蛋白、血清蛋白等。

 

特色产品推荐

刀豆素 ACon A

Con A可识别在许多血清和膜糖蛋白中的一部分的α-甘露糖在中性和碱性的pH值下,Con A作为四个相同亚基的四聚体存在pH 5.6以下,Con A分解成52 kDa的活性二聚体结构。乙酰化、琥珀酰化或其他衍生物也可以产生稳定的二聚体结构。Con A适用于碳水化合物研究,糖蛋白纯化,酶标记,细胞膜研究,细胞凝集,和细胞分型研究。

 

麦芽凝集素WGA

WGA的受体糖为n –乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine),优先与二聚体和三聚体结合。WGA可与含有末端n –乙酰氨基葡萄糖或几丁糖的低聚糖结合,这些结构在许多血清和膜糖蛋白中很常见。

 

雪兰莲凝集素(GNL) 

与大多数甘露糖特异性凝集素不同,雪花莲凝集素不是金属蛋白,不需要Ca++Mn++才能结合。GNL优先与包含(α-1,3)甘露糖残基结构结合。和绝大多数甘露醇结合的凝集素不同的是GNL不和α链接的甘露糖结合。有报道表明,这种凝集素可以与大鼠和小鼠的IgM结合,但不能与IgG结合。GNL与许多病毒糖蛋白结合。

 

琼脂糖凝集素产品信息

产品名称

货号

规格

Agarose Concanavalin A(Con A)

AL-1003-10

10ml

AL-1003-100

100ml

Agarose bound Soybean Agglutinin (SBA)

AL-1013-2

2 ml

Agarose bound Wheat germ agglutinin (WGA)

AL-1023-2

2ml

AL-1023-5

5ml

AL-1023-10

10ml

Agarose bound, succinylated Wheat Germ Agglutinin (WGA)

AL-1023S-2

2ml

AL-1023S-5

5ml

Agarose bound Lens Culinaris Agglutinin (LCA)

AL-1043-10

10 ml

Agarose bound Ulex Europaeus Agglutinin I (UEA I)

AL-1063-2

2ml

Agarose Bound Peanut Agglutinin (PNA)

AL-1073-2

2ml

AL-1073-5

5ml

Agarose bound Ricinus Communis Agglutinin I (RCA I, RCA120)

AL-1083-2

2 ml

AL-1083-10

10 ml

Agarose bound Erythrina Cristagalli Lectin (ECL, ECA)

AL-1143-2

2 ml

Agarose bound Jacalin

AL-1153-10

10 ml

Agarose bound Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin (LEL, TL)

AL-1173-2

2 ml

Agarose bound Datura Stramonium Lectin (DSL)

AL-1183-2

2 ml

Agarose bound Griffonia (Bandeiraea) Simplicifolia Lectin II (GSL II, BSL II)

AL-1213-2

2 ml

Agarose bound Vicia Villosa Lectin (VVL, VVA)

AL-1233-2

2 ml

Agarose Galanthus nivalis (snowdrop) lectin (GNL)

AL-1243-5

5ml

Agarose bound Sambucus Nigra Lectin (SNA, EBL)

AL-1303-2

2 ml

Agarose bound Wisteria Floribunda Lectin (WFA, WFL)

AL-1353-2

2 ml

Agarose bound Aleuria Aurantia Lectin (AAL)

AL-1393-2

2 ml



更多产品详情请联系Vector Laboratories中国代理商上海金畔生物

全国服务热线: 15221999938       邮箱: sales@jinpanbio.com   

深圳: 021-50837765       北京: 021-50837765         

上海: 021-50837765        广州:18028025014         

代理品牌网站: www.jinpanbio.com   

自主品牌网站: www.jinpanbio.cnet  

镍-琼脂糖凝胶H.P.

镍-琼脂糖凝胶H.P.

货号:
S9320

品牌:
Jinpan

产品简介
有效期 1年
英文名称 Ni Sepharose H.P.
储存条件 2-8℃
外观(性状) 颗粒
单位
规格 25mL(凝胶体积)

产品说明:

Ni-琼脂糖凝胶H.P.是用于纯化6×His标签重组蛋白的一种纯化介质,它是由6%交联的Sepharose耦连了一种四齿螯合剂NTA而得. 它可用于在非变性或变性条件下纯化任何表达系统表达的6×His标签重组蛋白。NTA,含有四个螯合区,较一般的三齿螯合剂能更好的结合Ni2+6×His可与Ni2+螯合,从而使His标签蛋白结合在Ni-NTA纯化介质上,未结合的蛋白被洗涤下去,结合在介质上的蛋白经过一定浓度的咪唑或低pH缓冲液的温和洗脱下来,从而得到高纯度的目的蛋白。该纯化介质与His标签蛋白具有极高的亲和力,可达5-20 mg/mL。可在非变性和变性条件下纯化任何表达系统所得的His标签蛋白。纯化程序简单,所得的蛋白纯度可高达95%。Ni-NTA可再生4-6次,重复使用。本产品悬浮液为20%乙醇,已螯合Ni2+

操作方法:

A. 非变性条件下抽提His标签蛋白

1) 准备细胞,接种,诱导表达。收集细胞,置于-70°C或立即进行步骤2操作。

2) 加入1/20细胞生长体积的NTA-0 BufferPMSFPMSF使用的工作浓度为1 mM现用现加。

3) 将细胞悬浮起来,加入溶菌酶,混匀,冰上放置30分钟,超声或匀浆破碎细胞。该步骤冰上操作。

4) 加入10% Triton X-100, 使终浓度为0.05%,充分混匀,冰上放置15分钟。

5) 12000 rpm/min(20,000×g以上)4°C离心15分钟以上。取上清,置于冰上备用或-20°C保存。

6) NTA树脂装入合适的层析柱,层析用10NTA体积的NTA-0 Buffer洗。

7) 将样品加至NTA层析柱中,流速在15 mL/h左右,收集穿透部分,用SDS/PAGE分析蛋白的结合情况。

8) 层析用5NTA体积的NTA-0 Buffer洗,流速控制在30 mL/h左右。

9) 分别用5NTA体积的NTA-20NTA-40NTA-60NTA-80NTA-100NTA-200NTA-1000 Buffer洗脱,流速控制在15 mL/h左右,收集洗脱液,每管收集一个NTA体积。

10) 确定目标蛋白质在洗脱液中的分布情况。最为有效的方式是SDS-PAGE分析。也可以用Bradford 蛋白质测定试剂盒,快速确定蛋白质的含量,然后用SDS/PAGE分析蛋白质的分布。

11)纯化的目标蛋白质的保存条件需要根据蛋白质的性质和用途确定。 NTA-0 204060801002001000Buffer分别为浓度20 mM Tris-HCl pH7.9, 0.5 M NaCl, 10% Glycerol,添加0204060801002001000 mM Imidazole

B.变性条件下从包涵体中纯化His标签蛋白

1) 准备细胞,接种,诱导表达。收集细胞,置于-70°C或立即进行步骤2操作。

2) 加入1/20细胞生长体积的GuNTA-0 BufferPMSFPMSF使用的工作浓度为1 mM现用现加。

3) 将细胞悬浮起来,冰上超声破碎细胞,降低粘稠度。

4) 室温放置30分钟,间或混匀或用磁力搅拌。

5) 12000/分(20,000×g以上),4°C离心15分钟以上。取上清,置于冰上备用或-20°C保存。

6) NTA树脂装入合适的层析柱,层析用10NTA体积的GuNTA-0 Buffer洗。

7) 将样品加到NTA层析柱中,流速控制在15 mL/h左右,收集穿透部分,用于SDS/PAGE分析蛋白质的结合情况。

8) 层析用5NTA体积的GuNTA-0 Buffer洗,流速控制在30 mL/h左右。

9) 分别用5NTA体积GuNTA-20GuNTA-40GuNTA-60GuNTA-100GuNTA-500洗脱,流速在15 mL/ h左右,收集洗脱液,每管收集一个NTA体积。

10) 确定目标蛋白质在洗脱液中的分布情况。最为有效的方式是SDS/PAGE分析。也可以用Bradford 蛋白质测定试剂盒,快速确定蛋白质的含量,然后用SDS/PAGE分析蛋白质的分布。

11) 目标蛋白质需要进一步纯化需要根据蛋白质的用途确定。 12) 纯化的目标蛋白质需要复性,复性常用的手段可以参考有关手册确定的原则。

GuNTA-0 204060100500Buffer分别为浓度20 mM Tris-HCl pH7.9, 0.5 M NaCl, 10% Glycerol,6 M Guanidium HCl添加0204060100500 mM Imidazole

C. NTA树脂的再生 NTA树脂在使用若干次数(3-5次)后,结合效率有所下降,可以用以下方法再生,提高树脂的使用寿命和蛋白质的结合效率。NTA树脂再生前需要从层析柱下端流干所有溶液,估计出NTA的树脂体积,按下列次序将再生试剂加到层析柱里,在等上一步再生溶液流干后,再加下一步再生溶解。用户需要自行准备25%50%75%100%v/v)乙醇和去离子水。 从层析柱下端流干所有溶液,用2NTA树脂体积的Stripping Solution I2倍体积的去离子水、3倍体积的Stripping Solution II1倍体积的25%乙醇、1倍体积的50%乙醇、1倍体积的75%乙醇、5倍体积的100%乙醇、1倍体积的75%乙醇、1倍体积的50%乙醇、1倍体积的25%乙醇、1倍体积的去离子水、5倍体积的Stripping Solution III3倍体积的去离子水分别洗一遍。 如果立即使用,用5倍体积的Ni Charging Solution洗,再用10倍体积的平衡溶液(NTA-0BufferGuNTA-0 Buffer)洗;如果想长期储存,加入1倍体积的20%乙醇,4°C保存,使用前用5倍体积的Ni Charging Solution洗,再用10倍体积的平衡溶液(NTA-0BufferGuNTA-0 Buffer)洗

再生溶液配方:Stripping Solution I:  6M GuHCl, 0.2M acetic acid。Stripping Solution II: 2% SDS。        Stripping Solution III: 100 mM EDTA, pH 8.0。Ni Charging Solution: 100 mM NiSO4

  备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

核酸纯化柱(提取质粒)

核酸纯化柱(提取质粒)

货号:
N1011-A

品牌:
Jinpan

产品简介
单位
英文名称 Spin column (Nucleic acid purification)
规格 100管/包

核酸纯化柱由:收集管、吸附柱、垫片、滤膜四部分组成。

供应的核酸纯化柱收集管材质为聚丙烯,体积是2mL

吸附柱材质为聚丙烯,容积是0.75mL

垫片材质:聚乙烯

滤膜材质:硅胶膜

DNase/RNase含量: 无

核酸吸附量(载量) ≥10ug

Luna Nanotech热销产品线——核酸提取纯化试剂

Luna Nanotech热销产品线——核酸提取纯化试剂

Luna Nanotech热销产品线——核酸提取纯化试剂

 

Luna Nanotech公司基于快速高效的二氧化硅吸附柱和二氧化硅涂层磁珠提取技术,研发出完整的核酸纯化试剂盒产品线,简化并大大加快了核酸纯化过程,为从细菌、酵母、动物细胞、组织、生理体液、琼脂糖凝胶和酶促反应中提取和纯化质粒以及基因组DNA和RNA提供可靠、高质量的解决方案。

硅吸附柱纯化法不需使用危险有毒的苯酚和氯仿试剂,比传统的苯酚-氯仿提取法更加安全,操作更简单,而且受到污染的概率低,回收的核酸纯度高。Luna Nanotech还可提供96孔板形式的试剂盒,适合实验室的高通量提取。

硅基磁珠法提取纯化的核酸回收率、纯度和成本与硅吸附柱相似,并且其速度更快、操作更简便。Luna Nanotech的磁珠法纯化核酸技术是目前最快的核酸纯化技术,每个磁分离步骤最低可以缩短至30秒,并且PCR产品纯化的完整操作最快可以在5分钟内完成。同样的 ,该方法可以在96孔板中进行,达到96个样品的平行纯化,所以该方法也十分适用于实现高通量和自动化操作。

 

  产品优势:  

● 操作简单,效率高。提取和纯化步骤简单,无需苯酚或氯仿。

● 适用范围广。能够从细菌、酵母、动物细胞、组织、生理液体、琼脂糖凝胶和酶促反应中提取和纯化DNA和RNA。

● 规格多样化。有Mini、MIDI和MAXI等套装的多种规格,部分产品还有高通量版本,能够满足不同的需求。

● 产物回收率和纯度高。试剂盒组分和缓冲液都经过最佳优化,可去除所有蛋白质、盐和其他污染物,获得高纯度核酸产品。

● 产品性价比高。

 

※ 质粒纯化试剂盒

PuroSPIN™质粒提取纯化试剂盒为从培养细菌细胞中快速提取和纯化质粒DNA提供了简便的方法。高纯度的质粒DNA适用于多种下游应用。其中miniprep kit可从1 – 5 mL细菌培养物中分离提取15 μg高质量质粒DNA,MIDIprep kit可从100 mL细菌培养物中分离提取100 μg高质量质粒DNA,MAXIprep kit可从300 mL细菌培养物中分离提取500 μg高质量质粒DNA。

PuroSPIN™ Endotoxin-free Plasmid Kits适用于从细菌细胞培养物中提取和纯化无内毒素的质粒DNA。

PuroMAG™ Plasmid Kits是使用二氧化硅包被磁珠从小规模和大规模的细菌培养物中提取纯化质粒DNA的方法,Miniprep kit可从1 – 5 mL细菌培养物中分离提取10μg高质量质粒DNA,MAXIprep kit从300 mL细菌培养物中分离提取300 μg高质量质粒DNA。

√. 适用范围:细菌培养物(OD600 2~3)。

√. 下游应用:克隆、PCR、限制性内切酶消化、测序、转化、转染等。

 

Luna Nanotech热销产品线——核酸提取纯化试剂

 

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™ Plasmid Miniprep Kit

NK111

50 preps

250 preps

NKP111

4×96 preps

PuroSPIN™ Plasmid MIDIprep Kit

NK112

20 preps

50 preps

PuroSPIN™ Plasmid MAXIprep Kit

NK113

10 preps

30 preps

PuroSPIN™ Endo-Free Plasmid MIDIprep Kit

NKE112

20 preps

50 preps

PuroSPIN™ Endo-Free Plasmid MAXIprep Kit

NKE113

10 preps

30 preps

PuroMAG™ Plasmid Miniprep Kit

NKM111

1×96 preps

4×96 preps

PuroMAG™ Plasmid MIDIprep Kit

NKM112

20 preps

50 preps

PuroMAG™ Plasmid MAXIprep Kit

NKM113

10 preps

30 preps

PuroMAG™ Endo-Free Plasmid MIDIprep Kit

NKEM112

20 preps

50 preps

PuroMAG™ Endo-Free Plasmid MAXIprep Kit

NKEM113

10 preps

30 preps

 

※ 病毒DNA和RNA纯化试剂盒 

PuroSPIN™ Viral DNA and RNA Purification Kit专门设计用于从全血、血清、血浆、口腔拭子、鼻拭子和唾液中提取病毒的基因组核酸。经过优化的缓冲液和柱子可以结合DNA和RNA。PuroMAG™ Viral DNA and RNA Purification Kit利用了二氧化硅包被磁珠的技术,以实现高产量和稳定的性能。

磁珠法工作流程

Luna Nanotech热销产品线——核酸提取纯化试剂

√. 适用范围:冠状病毒、正粘病毒、腺病毒、疱疹病毒等。

√. 下游应用:qPCR、RT-qPCR等。

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™ Viral DNA and RNA Purification Kit

NK055

50 preps

250 preps

4×96 preps

PuroMAG™ Viral DNA and RNA Purification Kit

NKM055

1×96 preps

4×96 preps

PuroSPIN-96™ Viral DNA and RNA Purification Kit

NKP055

4×96 preps

  

※ 基因组DNA纯化试剂盒(另有专门用于植物样本的试剂盒)

PuroSPIN™ Genomic DNA Purification Kit专门设计用于从各种生物样本如细菌,酵母,哺乳动物细胞,血液和动物组织中纯化基因组DNA。该系列试剂盒使用高效RNase和经过优化的缓冲液配方来确保去除RNA污染。

√. 适用样本:细菌、酵母、哺乳动物培养细胞、动物组织和哺乳动物全血等。

√. 下游应用:基因组测序、PCR、RT-qPCR、Southern Blotting等。

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™

Genomic DNA Purification Kit

NK061

50 preps

250 preps

NKP061

4×96 preps

PuroMAG™ Genomic DNA Purification Kit

NKM061

1×96preps

4×96preps

 

※ RNA纯化试剂盒

PuroSPIN™ Total RNA Purification Kit专门设计用于从细菌、哺乳动物细胞、酵母或动物组织中纯化总RNA,也可用于酶促反应后的RNA去除。高效DNase和优化的缓冲液配方,确保可以从样本中高效去除DNA污染。

√. 适用样本:细菌、酵母菌、哺乳动物细胞和动物组织。

√. 下游应用:cDNA文库构建、生物芯片分析、Northern blotting、qPCR、逆转录qPCR等。

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™ Total RNA Purification Kit

 NK051

50 preps

250 preps

NKP051

4×96 preps

PuroMAG™ Total RNA Purification Kit

NKM0514

1×96 preps

4×96 preps

PuroSPIN™ Total RNA Purification From Blood Kit

NK052

50/250 preps

NKP052

4×96 preps

PuroMAG™ Total RNA Purification From Blood Kit

NKM052

1/4×96 preps

 

※ PuroSPIN™ Fibrous Tissue RNA Purification Kit(纤维组织RNA纯化试剂盒)专门用于从动物纤维组织中纯化总RNA。

√. 适用样本:皮肤,骨骼肌,肺和心脏。

√. 下游应用:cDNA文库构建、生物芯片分析、Northern blotting、qPCR、逆转录qPCR等。

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™ Fibrous Tissue RNA Purification Kit

NK053

50 preps

250 preps

NKP053

4×96 preps

PuroMAG™ Fibrous Tissue RNA Purification Kit

NKM053

1×96 preps

4×96 preps

  

 DNA片段纯化试剂盒 

PuroSPIN™ PCR Product Purification Kit专门用于纯化PCR产物(100 bp – 10 kb)。

√. 下游应用:DNA连接反应、生物芯片分析、qPCR、RT-qPCR、测序、Southern blotting、转染、转化等。

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™ PCR Product Purification Kit

NK105

50/250 preps

NKP105

4×96 preps

PuroMAG™ PCR Product Purification Kit

NKM105

1/4×96 preps

 

 PuroSPIN™ Gel Extraction Kit适用于从琼脂糖或PAGE凝胶中提取纯化DNA样本(100 bp – 10 kb)。特有的结合缓冲液配方含有PH指示剂,可视化展现二氧化硅旋转柱的最佳DNA结合条件。

√. 适用范围:琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroSPIN™ Gel Extraction Kit  

NK107

50/250 preps

NKP107

4×96 preps

PuroMAG™ Gel Extraction Kit

NKM107

1/4×96 preps

 

※ 用于DNA和RNA纯化的磁珠

产品名称

货号

规格

二氧化硅柱

磁珠

高通量

PuroMAG™ Silica- Coated Magnetic Beads

NMG101

24 mL

 PuroMAG™ NGSPrep Magnetic Beads

NMG103

5/50/500 mL

 

※ 其他DNA和RNA纯化相关试剂

产品名称

货号

规格

应用

Proteinase K, 

Recombinant

GPK-099

1 g (lyophilized)

一种广谱的丝氨酸蛋白酶,

可在DNA和RNA纯化中去除内源性核酸酶

Proteinase K, 

DNase / RNase Free

GPK-020

3 mL (20 mg/mL)

GPK-020-B

48 mL (20 mg/mL)

Carrier RNA, 

Lyophilized Powder

GCR-055

5 x 600 µg

增强低拷贝核酸与二氧化硅柱的结合,

防止RNase结合和降解病毒RNA

RNase A, DNase Free, 

20 mg/mL (>70U/mg)

GRA-003

3 mL

可在 C 和 U 残基处特异性降解单链 RNA 的核糖核酸内切酶

GRA-048

48 mL

DNase I, RNase-Free, 

Lyophilized Powder

GDN-550

5 x 550U

可以通过切割DNA主链中的磷酸二酯键来降解DNA的核酸内切酶,

通常用于在RNA纯化过程中去除DNA污染

GDN-2550

25 x 550U

DNase I Reaction Buffer, 

10X Concentrate

GDB-005

5 mL

与DNase I配合使用

GDB-025

25 mL


※ 纯化柱

产品名称

货号

规格

应用

PuroSPIN™ NANO Spin Columns for DNA / RNA 

Extraction and Purification

USP002-200N

200 Columns

用于DNA/RNA的纯化和提取,

脱体积6 µL

USP002-500N

500 Columns

PuroSPIN™ MICRO Spin Columns for DNA / RNA 

Extraction and Purification

USP003-200N

200 Columns

用于DNA/RNA的纯化和提取,

洗脱体积20 µL

USP003-500N

500 Columns

PuroSPIN™ MINI Spin Columns for DNA / RNA 

Extraction and Purification

USP004-200N

200 Columns

用于DNA/RNA的纯化和提取,

具有200µg核酸结合能力

USP004-500N

500 Columns

PuroSPIN™ MIDI Spin Columns for DNA / RNA 

Extraction and Purification

USP006-20N

20 Columns

用于DNA/RNA的纯化和提取,

最多可以结合1.2mg gDNA和200µg质粒DNA

USP006-50N

50 Columns

PuroSPIN™ MAXI Spin Columns for DNA / RNA 

Extraction and Purification

USP008-10N

10 Columns

用于DNA/RNA的纯化和提取,

最多可以结合2.3mg gDNA和1mg质粒DNA

USP008-20N

20 Columns

USP008-50N

50 Columns

PuroSPIN™ Nucleic Acid Purification Plate 

Semi-Skirted

USP-096S

10 Plates

用于DNA/RNA的高通量纯化

PuroSPIN™ Nucleic Acid Purification plate 

Full-Skirted

USP-096F

10 Plates

 

※ 样本研磨珠

产品名称

货号

Ø  0.1 mm Zirconia/Silica Beads, Prefilled 2 mL Tubes

AS-13011-05

Ø  0.5 mm Zirconia/Silica Beads, Prefilled 2 mL Tubes

AS-13011-06

Ø  1.0 mm Zirconia/Silica Beads, Prefilled 2 mL Tubes

AS-13011-07

Ø  2.3 mm Zirconia Beads, Prefilled 2 mL Tubes

AS-13011-08

Ø  3.2 mm Chrome-Steel Beads, Prefilled 5 mL Tubes

AS-13011-09

Ø  6.4 mm Chrome-SteelBead, Prefilled 5 mL Tubes

AS-13011-10

  

※ 磁力架

产品名称

货号

规格

8-Positions Mini Magnetic Rack (fits 1.5 mL tubes)

MGR-008

1 ea

16-Positions Mini Magnetic Rack (fits 1.5 mL tubes)

MGR-016

1 ea

 

MIDI Magnetic Separation Rack for 15 mL Tubes

MGRD-008

1 ea

0.2 mL PCR Tube Magnetic Separation Rack

MGR-PCR

1 ea

96-well PCR Plate Magnetic Separation Rack

MGR-PCRP

1 ea

 

96-well Deep Well Plate Magnetic Separation Rack

MGR-DWP

1 ea

96-well Microplate Magnetic Separation Rack

MGR-MPL

1 ea

 

 

 

 

更多产品信息请登录 www.lunanano.com或咨询中国代理商——上海金畔生物