YF®555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(橙红色荧光) 货号: C6020S/C6020M/C6020L 规格: 5T/20T/50T

YF®555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(橙红色荧光)

产品货号: C6020S/C6020M/C6020L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价(元):431/1326/2947

推荐仪器:流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

5T

20T

50T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

100 µL

0.4 mL

1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

25 µL

100 µL

250 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

500 µL

2×1 mL

5 mL

2-8℃

D. CuSO4

200 µL

0.8 mL

2× 1 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

15 mg

60 mg

150 mg

2-8℃

规格:上述反应次数针对6孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nmYF® 555 Azide555/565 nm
YF®594 Azide590/617 nm;YF® 647A Azide650/670 nm.

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(橙红色荧光) 货号:               C6020S/C6020M/C6020L  规格:               5T/20T/50T UE-C6020S/C6020M/C6020L    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®647A Click-iT EdU 成像试剂盒(远红荧光) 货号: C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®647A Click-iT EdU 成像试剂盒(远红荧光)

产品货号: C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

组分

规格

20T

100T

500T

1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

0.2 mL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

4 µL

20 µL

100 µL

200 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

0.5 mL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:上述反应次数针对96孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1

荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nm;YF® 555 Azide555/565 nmYF®594 Azide590/617 nm

YF® 647A Azide650/670 nm;Hoechst 33342350/461 nm(bound to DNA)


产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者 用 DNase 消化)暴露出 BrdU,从而方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。

说明书:

YF®647A Click-iT EdU 成像试剂盒(远红荧光) 货号:               C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6018S/C6018M/C6018L/C6018XL    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(绿色荧光) 货号: C6019S/C6019M/C6019L 规格: 5T/20T/50T

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(绿色荧光)

产品货号: C6019S/C6019M/C6019L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价(元):431/1326/2947

推荐仪器:流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

储存条件
-20℃ 避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

组分

规格

5T

20T

50T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

100 µL

0.4 mL

1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

25 µL

100 µL

250 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

500 µL

2×1 mL

5 mL

2-8℃

D. CuSO4

200 µL

0.8 mL

2× 1 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

15 mg

60 mg

150 mg

2-8℃

规格:上述反应次数针对6孔板培养的细胞不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide495/519 nmYF® 555 Azide555/565 nm
YF®594 Azide590/617 nm;YF® 647A Azide650/670 nm.

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。 
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒(绿色荧光) 货号:               C6019S/C6019M/C6019L  规格:               5T/20T/50T UE-C6019S/C6019M/C6019L    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(橙红色荧光) 货号: C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL 规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(橙红色荧光)

产品货号: C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL

产品规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜、流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

产品货号及规格:

货号

产品名称

规格

C6043S

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(绿色荧光)

2-20T

C6043M

10-100T

C6043L

50-500T

C6043XL

100-1000T

C6044S

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(橙红色荧光)

2-20T

C6044M

10-100T

C6044L

50-500T

C6044XL

100-1000T

C6045S

YF®594 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(红色荧光)

2-20T

C6045M

10-100T

C6045L

50-500T

C6045XL

100-1000T

C6046S

YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(远红荧光)

2-20T

C6046M

10-100T

C6046L

50-500T

C6046XL

100-1000T

产品内容:

组分

2-20T

10-100T

50-500T

100-1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

200 µL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

10 µL

50 µL

250 µL

500 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

500 µL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:如果用于荧光显微镜检测,所能使用次数为上述各个规格的最大使用次数(针对96孔板培养的细胞),如C4043S可检测20个孔的样品(不同容器的具体用量可参考附表1);如果用于流式检测,所能使用次数为上述各个规格的最小使用次数,如C4043S可检测2个样品。
荧光光谱数据:YF® 488 Azide:495/519 nm;YF® 555 Azide:555/565 nm;YF®594 Azide:590/617 nm

  YF® 647A Azide:650/670 nm;Hoechst 33342:350/461 nm(bound to DNA)

储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

产品介绍

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 

BrdU法。EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。

本试剂盒中,EdU含有炔烃,YF® 488/555/594/647A Azide染料含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。BrdU方法需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用DNase消化)暴露出BrdU,从而方便BrdU抗体结合;而EdU法只需标准化的多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(橙红色荧光) 货号:               C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL  规格:               2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T UE-C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL    
MSDS:

MSDS C6044 YF®555 Click-iT EdU Universal Cell Proliferation Detection Kit
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。

Click-iT EdU-488细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM)

Click-iT EdU-488细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM)

¥680.00

货号:BL915A

规格:BL915A

品牌:Jinpan

Click-iT EdU-488细胞增殖检测试剂盒(适用于FACSFM)

产品编号

产品名称

规格

BL915A

Click-iT EdU-488细胞增殖检测试剂盒(适用于FACSFM)

100 T

 

产品简介:

细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗肿瘤药物效果等的基本方法。目前检测细胞增殖的方法有很多其中,公认最精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成由于该方法有放射性污染且很难实现单细胞检测,随后逐渐被基于抗体检测的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合,导致DNA双链结构破坏,影响其他染料的结合,染色弥散,准确性降低等问题不论是最初使用的放射性标记核苷掺入法,还是后续改进的基于抗体检测的BrdU法,都有着一定的自身局限性

EdU5-Ethynyl-2′- deoxyuridine5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷)是一种含有一个乙炔基团的胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,当将其注射到动物体内或者对体外培养的细胞进行孵育,这些小分子能够迅速扩散到各个器官组织,并渗入到细胞中,可以在细胞增殖时期代替胸苷(T)掺入到新合成的DNA中。EdU分子中的乙炔基团能与荧光标记的叠氮化合物探针(Alexa Fluor 488Alexa Fluor 555Alexa Fluor 594Alexa Fluor 647)在铜离子催化下发生点击反应(Click reaction)形成稳定的三唑环,因此可以使新合成的DNA被相应的荧光探针所标记。与另外两种方法相比,没有放射性污染,无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高。

本试剂盒可用于检测体外培养的细胞或动物组织中细胞增殖情况。试剂盒中荧光探针为绿色荧光,最大激发波长为491 nm,最大发射波长为516 nm,处于增殖的细胞被标记后,细胞核会显示出明亮的绿色荧光,通过配套常规细胞核染料共同标记细胞核(本试剂盒提供 Hoechst 33342细胞核染料)可用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等仪器直接观察细胞增殖情况;也可以使用流式细胞仪检测体外培养细胞群荧光强度,根据荧光强度,来判断细胞周期中S期的DNA复制活性。

 

产品组成:

组分

名称

规格

BL915A-1

EdU储存液(10 mM

100 μL

BL915A-2

催化试剂(试剂A

120 μL

BL915A-3

荧光染料iF488(试剂B

50 μL

BL915A-4

催化添加剂(试剂C

2×100 mg

BL915A-5

反应缓冲液

20 mL

BL915A-6

Hoechst 33342 染色液

30 μL

 

使用方法:

见说明书

 

注意事项:

1、 对于常见的哺乳动物细胞如HeLa3T3HEK293等,细胞周期大约在18-25小时,孵育时间宜在2小时左右。人胚胎细胞的细胞周期约30分钟,推荐的孵育时间为5分钟;酵母细胞的细胞周期约3小时,推荐的孵育时间为20分钟,增殖的神经细胞其细胞周期约5天,推荐的孵育时间为1天。孵育时间小于45分钟时,建议提高EdU的浓度;孵育时间大于20小时时,建议适当降低EdU的浓度。

2、 对于体外培养细胞,具体EdU使用浓度、孵育时间随样品以及研究目的的不同,可进行适当调整。

3、 部分组织细胞增殖速度缓慢,为了排除造模效果不佳等因素,建议选增殖快的组织样品作为参照样本(如肠道组织)。

4、 背景颜色过深,可能是实验中洗涤不充分、组织样品固定时间过长、固定液残余导致。

5、 EdU催化添加试剂(试剂C)易氧化,尽量避免长时间暴露于空气中,配制成水溶液后,建议分装保存;经测试,如EdU催化添加试剂颜色发生轻微变化,点击反应催化体系依旧能够正常进行,如呈现 棕色,表明该组分已失效,请弃用。

6、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

4避光保存一年

货号 BL915A
规格 BL915A
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

Click-iT EdU-647细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM)

Click-iT EdU-647细胞增殖检测试剂盒(适用于FACS、FM)

¥680.00

货号:BL918A

规格:100T

品牌:Jinpan

Click-iT EdU-647细胞增殖检测试剂盒(适用于FACSFM)

产品编号

产品名称

规格

BL918A

Click-iT EdU-647细胞增殖检测试剂盒(适用于FACSFM)

100 T

 

产品简介:

细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗肿瘤药物效果等的基本方法。目前检测细胞增殖的方法有很多其中,公认最精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成由于该方法有放射性污染且很难实现单细胞检测,随后逐渐被基于抗体检测的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法的缺点是需要变性DNA后才能与抗体结合,导致DNA双链结构破坏,影响其他染料的结合,染色弥散,准确性降低等问题不论是最初使用的放射性标记核苷掺入法,还是后续改进的基于抗体检测的BrdU法,都有着一定的自身局限性

EdU5-Ethynyl-2′- deoxyuridine5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷)是一种含有一个乙炔基团的胸腺嘧啶脱氧核苷类似物,当将其注射到动物体内或者对体外培养的细胞进行孵育,这些小分子能够迅速扩散到各个器官组织,并渗入到细胞中,可以在细胞增殖时期代替胸苷(T)掺入到新合成的DNA中。EdU分子中的乙炔基团能与荧光标记的叠氮化合物探针(Alexa Fluor 488Alexa Fluor 555Alexa Fluor 594Alexa Fluor 647)在铜离子催化下发生点击反应(Click reaction)形成稳定的三唑环,因此可以使新合成的DNA被相应的荧光探针所标记。与另外两种方法相比,没有放射性污染,无需使用抗体、操作便捷、检测灵敏度高。

本试剂盒可用于检测体外培养的细胞或动物组织中细胞增殖情况。试剂盒中荧光探针为粉色(远红外)荧光,最大激发波长为656 nm,最大发射波长为670 nm,处于增殖的细胞被标记后,细胞核会显示出明亮的粉色(远红外)荧光,通过配套常规细胞核染料共同标记细胞核(本试剂盒提供 Hoechst 33342细胞核染料)可用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜等仪器直接观察细胞增殖情况;也可以使用流式细胞仪检测体外培养细胞群荧光强度,根据荧光强度,来判断细胞周期中S期的DNA复制活性。

 

 

产品组成:

组分

名称

规格

BL918A-1

EdU储存液(10 mM

100 μL

BL918A-2

催化试剂(试剂A

120 μL

BL918A-3

荧光染料iF647(试剂B

50 μL

BL918A-4

催化添加剂(试剂C

2×100 mg

BL918A-5

反应缓冲液

20 mL

BL918A-6

Hoechst 33342 染色液

30 μL

 

使用方法:

见说明书

 

注意事项:

1、 对于常见的哺乳动物细胞如HeLa3T3HEK293等,细胞周期大约在18-25小时,孵育时间宜在2小时左右。人胚胎细胞的细胞周期约30分钟,推荐的孵育时间为5分钟;酵母细胞的细胞周期约3小时,推荐的孵育时间为20分钟,增殖的神经细胞其细胞周期约5天,推荐的孵育时间为1天。孵育时间小于45分钟时,建议提高EdU的浓度;孵育时间大于20小时时,建议适当降低EdU的浓度。

2、 对于体外培养细胞,具体EdU使用浓度、孵育时间随样品以及研究目的的不同,可进行适当调整。

3、 部分组织细胞增殖速度缓慢,为了排除造模效果不佳等因素,建议选增殖快的组织样品作为参照样本(如肠道组织)。

4、 背景颜色过深,可能是实验中洗涤不充分、组织样品固定时间过长、固定液残余导致。

5、 EdU催化添加试剂(试剂C)易氧化,尽量避免长时间暴露于空气中,配制成水溶液后,建议分装保存;经测试,如EdU催化添加试剂颜色发生轻微变化,点击反应催化体系依旧能够正常进行,如呈现棕色,表明该组分已失效,请弃用。

6、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

4避光保存一年

货号 BL918A
规格 100T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

YF®488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光) 货号: C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光)

产品货号: C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

产品货号及规格:

货号

产品名称

规格

C6015S

YF® 488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光)

20T

C6015M

100T

C6015L

500T

C6015XL

1000T

C6016S

YF® 555 Click-iT EdU成像试剂盒(橙红色荧光)

20T

C6016M

100T

C6016L

500T

C6016XL

1000T

C6017S

YF® 594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光)

20T

C6017M

100T

C6017L

500T

C6017XL

1000T

C6018S

YF® 647A Click-iT EdU成像试剂盒(远红荧光)

20T

C6018M

100T

C6018L

500T

C6018XL

1000T

产品内容:

           规格

组分

20T

100T

500T

1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

0.2 mL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

4 µL

20 µL

100 µL

200 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

0.5 mL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:上述反应次数针对96孔板培养的细胞,不同容器的具体用量可参考附表1
荧光光谱数据:YF® 488 Azide:495/519 nm;YF® 555 Azide:555/565 nm;YF®594 Azide:590/617 nm

                      YF® 647A Azide:650/670 nm;Hoechst 33342:350/461 nm(bound to DNA)


储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

产品介绍

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU含有炔烃,YF® 488/555/594/647A Azide染料含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。BrdU方法需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用DNase消化)暴露出BrdU,从而方便BrdU抗体结合;而EdU法只需多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 荧光染料均存在淬灭问题,实验操作时请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3. Click-iT EdU缓冲液添加物溶液最好现配现用,以保证最佳结果。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书:

YF®488 Click-iT EdU成像试剂盒(绿色荧光) 货号:               C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL    
MSDS:

MSDS C6015 YF®488 Click-iT EdU Imaging Kits
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。


使用本产品的文献:

1.miR-146a-5p promotes epithelium regeneration against LPS-induced inflammatory injury via targeting TAB1/TAK1/NF-κB signaling pathway

Xingping Chen, Weite Li, Ting Chen, Xiaohui Ren, Jiahao Zhu, Fangxin Hu, Junyi Luo, Lipeng Xing, Hao Zhou, Jiajie Sun, Qingyan Jiang, Yongliang Zhang, Qianyun Xi
International Journal of Biological Macromolecules

参考文献
1.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine
应用方向:植物细胞

2.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)
应用方向:DNA修复

3.Chick Embryo Proliferation Studies Using EdU Labeling
应用方向:EdU(动物)细胞增殖检测

4.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification
应用方向:线粒体活性检测

5.A method for evaluating the host range of bacteriophages using phages fluorescently labeled with 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU)
应用方向:细胞成像&细胞流式

6.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis
应用方向:病毒活性检测

7.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU
应用方向:细胞标记示踪

YF®594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光) 货号: C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL 规格: 20T/100T/500T/1000T

YF®594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光)

产品货号: C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL

产品规格: 20T/100T/500T/1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜

大包装询价


产品概述:

产品内容

组分 20T 100T 500T 1000T 保存温度 稳定性
A. 10 mM EdU 40 µL 0.2 mL 1 mL 2× 1 mL -20℃ 按指定温度保 存可有效放置 一年
B. YF® 488/555/594/647A Azide 4 µL 20 µL 100 µL 200 µL -20℃,避光
C. 10× Click-iT EdU 反应缓冲液 2 200 µL 1 mL 5 mL 10 mL 2-8℃
D. CuSO4 100 µL 0.5 mL 2× 1.25 mL 5 mL 2-8℃
E. Click-iT EdU 缓冲液添加物 6 mg 30 mg 150 mg 2 × 150 mg 2-8℃
F. Hoechst 33342  5 µL 25 µL 125 µL 250 µL 2-8℃

储存条件
-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU (5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。
本试剂盒中,EdU 含有炔烃,YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效,易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性(如酸变性、热变性或者用 DNase 消化)暴露出 BrdU,从而方便 BrdU 抗体结合;而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。
说明书:

YF®594 Click-iT EdU成像试剂盒(红色荧光) 货号:               C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL  规格:               20T/100T/500T/1000T UE-C6017S/C6017M/C6017L/C6017XL    
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。


使用本产品的文献:

参考文献
1.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU
应用方向:细胞标记示踪

2.Primary cilia control hedgehog signaling during muscle differentiation and are deregulated in rhabdomyosarcoma
应用方向动物细胞增殖分析

3.Silencing of STRN4 suppresses the malignant characteristics of cancer cells
应用方向动物细胞增殖检测

4.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine
应用方向植物细胞增殖检测

5.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)
应用方向DNA损伤修复

6.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification
应用方向线粒体活性检测

7.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis
应用方向病毒活性检测

热烈祝贺Vector Laboratories完成对Click Chemistry Tools、Fluoroprobes以及Quanta Biodesign品牌收购和产品整合

热烈祝贺Vector Laboratories完成对Click Chemistry Tools、Fluoroprobes以及Quanta Biodesign品牌收购和产品整合

近日,Vectorlabs宣布,Click Chemistry Tools, Fluoroprobes和Quanta Biodesign品牌已成为Vectorlabs的一部分,且这三个品牌的产品现已完全转移到Vectorlab官网(vectorlabs.com)上。为方便广大用户查找,Vectorlabs对其重新进行了新的产品分类,用户可登录Vectorlabs官网进行查看。

 

上海金畔生物作为VectorLabs原有免疫组化产品线和凝集素产品线的中国代理商,现在也被可以销售Click Chemistry Tools, Fluoroprobes和Quanta Biodesign这三个品牌的全线产品,如果有订购需求,欢迎联系我们咨询。

热烈祝贺Vector Laboratories完成对Click Chemistry Tools、Fluoroprobes以及Quanta Biodesign品牌收购和产品整合

美国Click Chemistry Tools(CCT)公司位于亚利桑那州斯科茨代尔(Scottsdale,AZ)。自公司成立以来,一致致力于不断开发和扩展一系列连接产品。他们利用最新的研究成果研发生产出新颖的交联和标记试剂。产品被广泛用于药物研发、癌症治疗以及各类诊断技术等。此外,CCT还可以提供个性化的定制产品,已满足不同用户的需求。目前CCT的产品线主要包括:Azides(Biotin-Azides)试剂、Bis-sulfone交联试剂、DBCO试剂、TCO试剂、Terminal Alkyne试剂、Tetrazine试剂、标记试剂盒以及分选用底物等。

热烈祝贺Vector Laboratories完成对Click Chemistry Tools、Fluoroprobes以及Quanta Biodesign品牌收购和产品整合

Fluoroprobes公司位于美国亚利桑那州斯科茨代尔(Scottsdale, AZ),自成立以来,一直致力于不断开发一系列的连接(linker)产品。利用最新的研究成果研发生产出各类新颖的交联和标记试剂。其产品被广泛用于药物研发与筛选、疾病治疗方法和诊断技术等领域。此外,Fluoroprobes还可以根据客户的个性化需求提供各类定制连接产品。代表产品有Classic

Fluorescent Dyes, AZDye, Cyanine Dyes, IR Dyes, MB dyes以及一些标记试剂盒等。

热烈祝贺Vector Laboratories完成对Click Chemistry Tools、Fluoroprobes以及Quanta Biodesign品牌收购和产品整合

Quanta Biodesign公司位于美国中部的俄亥俄州,成立于1997年。也是专注于生产研发各类标记产品的品牌之一。其研发的产品与dPEG®技术相结合,生产出他们独有的专利产品dPEG® Building Blocks and Linkers,被广泛用于细胞治疗和分子诊断等研究领域。另外,还可为广大科研工作者提供多种化学修饰试剂以及传统Liner等。

以下是该三个品牌产品被Vectorlabs收购后所调整的地方:

1. 产品货号:

Click Chemistry Tools品牌所有产品货号,增加了”CCT-“前缀。例如:原货号为1419,新货号为CCT-1419。

Fluoroprobes品牌所有产品货号,增加了”FP-“前缀。例如:原货号为1300,新货号则为FP-1300。

Quanta Biodesign品牌所有产品货号,增加了“QBD-”前缀。

 

2. 产品包装:

所有Click Chemistry Tools, Fluoroprobes和Quanta Biodesign的产品都将使用Vectorlabs品牌包装发货。包装盒和产品标签可能会有所不同,但产品实物与之前从 Click Chemistry Tools 或 Fluoroprobes 购买的产品完全相同。

更多详情请联系Vectorlabs代理商——上海金畔生物

Vector 品牌经理:15221999938


YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(远红荧光) 货号: C6046S/C6046M/C6046L/C6046XL 规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(远红荧光)

产品货号: C6046S/C6046M/C6046L/C6046XL

产品规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

目录价(元):212/811/1621/2653

推荐仪器:荧光显微镜、流式细胞仪

大包装询价


产品概述:

产品货号及规格:

货号

产品名称

规格

C6043S

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(绿色荧光)

2-20T

C6043M

10-100T

C6043L

50-500T

C6043XL

100-1000T

C6044S

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(橙红色荧光)

2-20T

C6044M

10-100T

C6044L

50-500T

C6044XL

100-1000T

C6045S

YF®594 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(红色荧光)

2-20T

C6045M

10-100T

C6045L

50-500T

C6045XL

100-1000T

C6046S

YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(远红荧光)

2-20T

C6046M

10-100T

C6046L

50-500T

C6046XL

100-1000T

产品内容:

组分

2-20T

10-100T

50-500T

100-1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

200 µL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

10 µL

50 µL

250 µL

500 µL

-20℃,避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

500 µL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格:如果用于荧光显微镜检测,所能使用次数为上述各个规格的最大使用次数(针对96孔板培养的细胞),如C4043S可检测20个孔的样品(不同容器的具体用量可参考附表1);如果用于流式检测,所能使用次数为上述各个规格的最小使用次数,如C4043S可检测2个样品。
荧光光谱数据:YF® 488 Azide:495/519 nm;YF® 555 Azide:555/565 nm;YF®594 Azide:590/617 nm

  YF® 647A Azide:650/670 nm;Hoechst 33342:350/461 nm(bound to DNA)

储存条件

-20℃避光保存,有效期见外包装。开封后,保存温度详见说明书。 

产品介绍

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 

BrdU法。EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU(5-乙炔基-2’-脱氧尿苷)是一种嘧啶类似物,在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应,形成共价键。

本试剂盒中,EdU含有炔烃,YF® 488/555/594/647A Azide染料含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。BrdU方法需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用DNase消化)暴露出BrdU,从而方便BrdU抗体结合;而EdU法只需标准化的多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞,只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分,可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书:

YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒(远红荧光) 货号:               C6046S/C6046M/C6046L/C6046XL  规格:               2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T UE-C6046S/C6046M/C6046L/C6046XL    
MSDS:

MSDS C6046 YF®647A Click-iT EdU Universal Cell Proliferation Detection Kit
常见问题解答:

YF®488/555/594/647有什么区别?

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同,检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同,可根据偏好或需求进行选择。

EdU试剂盒中,固定后3% BSA in PBS的作用是什么?
清洗步骤中,BSA可以终止掉未反应的甲醛。

能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测?
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记,但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型,检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗?检测顺序是什么?
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光,故染色后无法直接检测GFP,建议使用GFP抗体间接检测。

观测到较高的本底干扰,这是什么原因所致?如何减少本底干扰?
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性,生物体内几乎不可能有副反应发生,所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时,也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照,以排除自发荧光干扰。此外,您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应,验证Click反应信号的特异性。

为什么标记样品无信号或特异性信号非常低?如何提高信号? 
1.请保证试剂使用时为无色的状态,不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液;
2.为确保Click反应试剂能够到达核内,细胞需要充分地固定和通透;
3.由于铜离子能结合到部分试剂上,这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前,不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂(例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等),对某些含有这些物质的实验样品来说,进行Click反应前,可能需要增加额外的洗涤步骤;
4.当铜离子在合适的化合价时,Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育,可更有效地提高标记效率。

如何对细胞核进行复染?
试剂盒中配有Hoechst 33342,可以在Click反应后用于细胞核的染色,也可选择使用DAPI。

可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子,可以穿透植物细胞的细胞壁。