抗体如何选择?选单克隆还是多克隆?

抗体如何选择?选单克隆还是多克隆?

使用抗体时选单抗还是多抗?相信很多同学都有这个疑问,单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别呢?这个问题问得好,因为它们无论是在生产过程还是用途上都非常不同,了解了这些知识以后对选择合适抗体有很大的帮助。本篇总结了很多资料,下面就来给大家一一解答。

首先列出一个表格,让大家对多克隆抗体和单克隆抗体有一个简单的认识和对比

多克隆抗体 单克隆抗体
与目标蛋白上不同表位结合的多种不同抗体 只识别目标蛋白上一种表位的单一抗体
非表位特异的 表位特异的
与相似抗原有更多的交叉反应 交叉反应少
背景干扰较高 背景干扰低
各批次抗体有所不同 每批次抗体完全一样
成本较低 成本较高
制备耗时短 (大约 3 个月) 制备耗时较长 (大约 6 个月)
很多宿主物种可选 宿主物种选择不多

那么到底什么是单克隆抗体呢?

单克隆抗体的定义:单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。

单克隆抗体的制备

简单来说就是将免疫原注射到宿主动物体内产生免疫反应,之后把B细胞从脾脏中移出,单种B细胞与骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤,成为一个永生化胞株。这样一来,杂交瘤的B细胞就会一直产出只识别单一表位的单克隆抗体,通常这个胞株会有一个特定的克隆号(clone number),用来与其他胞株区分。

杂交瘤接下来可以被注射到小鼠的腹腔中大量生产,杂交瘤分泌富含抗体的一种液体,被称作腹水,用注射器抽取纯化,就可获得大量的单克隆抗体。

单克隆抗体更适用于:

  • 检测单一抗原

  • 检测蛋白质家族的单一成员

  • 不同实验/批次的抗体检测结果稳定一致

  • 细胞染色背景较低-很适用于IHC、ICC、IF 等应用

  • 量化蛋白质表达 (例:流式或荧光细胞分选)

  • 探测分子结构变化

  • 探测磷酸化状态的变化

  • 为X射线晶体测试探测目标

  • 制作缺少特定细胞类型的动物模型

  • 免疫治疗

  • 单克隆抗体不建议用于:

  • 根据同源性检测不同物种的目标蛋白

  • 检测浓度较低的目标蛋白

  • 检测形态变化了的蛋白

什么是多克隆抗体呢?

多克隆抗体定义:多克隆抗体是指与目标蛋白上多种不同表位结合的多种不同抗体.

多克隆抗体制备

多克隆抗体的第一步和单克隆抗体一样,都是将免疫原注射到宿主体内产生免疫反应,激活了多种B细胞。不同的是免疫过后,多克隆抗体就直接从免疫宿主的血清中分离出来,或接着进行纯化,没有与骨髓瘤细胞融合的过程。一旦宿主动物死亡,需要免疫新的动物,这时血清中的抗体就会有所不同。

虽然多抗每批次有轻微差别,但是因为它识别的表位多,这个差别影响并不算太大,而单克隆抗体虽然价格偏高,可是特异性更强更稳定。可以说单抗和多抗是各有各的优点。

多克隆抗体更适用于:

  • 检测有高同源性的抗原的已知或未知同种型

  • 检测浓度较低的抗原

  • 捕获尽可能多的抗原 (例如 IP 或 ChiP)

  • 检测变性的蛋白

  • 检测可能发生了糖基化或形态变化的目标蛋白

  • 用多种检测方法检测一种原蛋白时

  • 检测 pH 和盐度不同的溶液中的目标蛋白

多克隆抗体不建议用于:

  • 量化检测,比如:流式。由于不同表位的结合导致信号被放大加强,可能会导致结果不准确

  • 当高同源性蛋白的交叉反应会引起问题时

更多详情请咨询上海金畔生物

鼠源Iba1抗体,无标签,单克隆抗体疾病研究-Wako富士胶片和光

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供货周期 一个月 应用领域 生物产业

鼠源Iba1抗体,无标签,单克隆抗体
Iba1是在小胶质细胞和巨噬细胞中高度表达的蛋白质,分子量约17 kDa。 此蛋白质通常称为中枢神经系统中的小胶质细胞标记物。
近,小胶质细胞已被广泛研究,其负责中枢神经系统中的免疫功能,并且与各种疾病相关,如神经变性疾病,精神错乱,脑肿瘤和感染。

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鼠源Iba1抗体,无标签,单克隆抗体疾病研究-Wako富士胶片和光

 

  Iba1是在小胶质细胞和巨噬细胞中高度表达的蛋白质,分子量约17 kDa。 此蛋白质通常称为中枢神经系统中的小胶质细胞标记物。

  近,小胶质细胞已被广泛研究,其负责中枢神经系统中的免疫功能,并且与各种疾病相关,如神经变性疾病,精神错乱,脑肿瘤和感染。

 

类别:Monoclonal

应用物种:IHC(小鼠、大鼠和狨猴冰冻切片,DABlocking)(1:500-2,000),

IHC(大鼠冰冻切片,fluorescent)(1:100)

 

◆特点

● 免疫组化评估

● 用于多色免疫染色

● 具有高特异性和低背景的单克隆抗体

 

应用 – 免疫组织化学染色

鼠源Iba1抗体,无标签,单克隆抗体疾病研究-Wako富士胶片和光

使用抗Iba1,单克隆抗体(产品编号:012-26723)小胶质细胞的定位信号清晰,与抗Iba1,兔多克隆抗体的效果相同(产品编号:019-19741、019-19741)。

 

实验条件

●样品:7周龄大鼠,7周龄小鼠或成年狨猴的大脑皮质

切片:50 μm冰冻切片(小鼠和大鼠),40 μm冰冻切片(狨猴)

染色法:ABC法+DAB染色

抗体浓度= 1:500

 

抗体信息

抗Iba1,单克隆抗体(NCNP24)

抗原

合成肽(Iba1的C末端)

克隆号

NCNP24

子类

小鼠IgG1

浓度

1.3 mg/mL

Buffer缓冲液

50%甘油/ TBS,0.05%​ NaN₃

物种反应性

小鼠,大鼠,狨猴

应用

免疫组织化学(冷冻切片)(1:500-2,000)

 

◆产品列表

产品编号 产品名称 包装
 012-26723  抗Iba1,单克隆抗体(NCNP24)  10 μL
 016-26721  抗Iba1,单克隆抗体(NCNP24)  50 μL

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Jackson小鼠抗地高辛单克隆抗体

Jackson小鼠抗地高辛单克隆抗体

抗地高辛抗体(anti-digoxin antibody,ADA),主要用于治疗地高辛中毒和IHC、IF、ELISA等免疫检测反应。


地高辛,是一种有机化合物,化学式为C41H64O14,是一种中效强心苷类药物,适用于治疗低输出量型充血性心力衰竭、心房颤动、心房扑动、阵发性室上性心动过速。由于地高辛的治疗指数狭窄,用药过量与用药不足时的症状相似,加之其个体差异大,故中毒的发生率高,是临床上最难掌握药物之一。应用抗地高辛抗体可快速有效专一性的解除地高辛中毒。此外,采用抗地高辛抗体的免疫分析法监测血清/血浆地高辛浓度已成为当今治疗性药物监测的典范。测定血清地高辛浓度,尚可提供其不同个体间生物利用度及药效学差异方面的信息,目前被广泛用于判断地高辛中毒及指导临床用药,对于保证其治疗的有效性及安全性具有重要意义。


 


在免疫检测中也可选用地高辛来标记一抗,再使用荧光基团或者酶标记的抗地高辛抗体作为二抗,可降低物种间免疫球蛋白的交叉反应而导致的背景染色,提供多元化的免疫学检测手段。


Jackson ImmunoResearch 是美国杰出的二抗生产厂商,其在免疫球蛋白的生产和纯化方面拥有35年的经验。作为值得信赖的供应商之一,Jackson公司的二抗以种类丰富(物种齐全,标记多样,应用广泛),性价比高,深受科研学者和工业客户的青睐。除了多种标记的二抗,还可提供对照蛋白和链霉亲和素结合物。


作为Jackson中国代理,上海金畔生物科技有限公司向您推荐Jackson的各种标记的二抗产品,包括HRP及 AP酶标二抗、FITC/Rhodamine /Cy系列/DyLight系列等荧光二抗等均为原装进口包装,高效敏感,能为您提供值得信赖的抗体产品保障和售后服务。


与目前市场上提供的一些多克隆地高辛抗体相比,单克隆具有更好的特异性和效价比,因此不管是应用于科研还是预实验,都具有更好的目的性和指导性。


Jackson可提供多种形式的IgG片段小鼠抗地高辛单克隆抗体。

小鼠抗地高辛单克隆抗体(IgG Fraction Monoclonal Mouse Anti-Digoxin,货号:200-002-156)经过全球多个客户验证受到一致好评,可以用作直接偶联物,也可以在未偶联的情况下使用,然后使用偶联的抗小鼠 IgG (H+L) 以提高灵敏度。该抗体为无菌溶液,不含任何防腐剂,在2-8°C条件下保质期为收到货物后1年,如果检测结果可接受可以适当延长保质期。


HRP标记小鼠抗地高辛单克隆抗体(Peroxidase IgG Fraction Monoclonal Mouse Anti-Digoxin,货号:200-032-156)具有非常高的效价,推荐稀释比例分别为:ELISA(1:5,000 – 1:100,000)、WB显色底物(1:20000-1:400000)、WB发光底物(1:10,000 – 1:200,000 )、immunohisto/cytochemistry(1:500-1:5000)。该抗体以冻干粉形式提供,使用dH2O复溶,复溶后未稀释的储存液可在2-8°C把保存6周也可分装冻存于-70℃以下避免反复冻融或者加入等体积的甘油以液体的形式保存于-20℃。


除以上两种形式外,Jackson还可提供带如下标记的抗地高辛抗体,可满足不同客户的多种需要,请联系上海金畔生物科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。

Unconjugated Fluorescein (FITC) Cy3 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor® 680
Horseradish Peroxidase Rhodamine Red-X AMCA Alexa Fluor® 594 Alexa Fluor® 790
Alkaline Phosphatase DyLight 405 Biotin-SP Alexa Fluor® 647 Rhodamine (TRITC)

更多详情请联系Jackson ImmunoResearch中国代理商上海金畔生物。

乙酰葡萄糖胺转移酶重组兔单克隆抗体

乙酰葡萄糖胺转移酶重组兔单克隆抗体

乙酰葡萄糖胺修饰 (O-GlcNAcylation, O-GlcNAc) 属于转译后修饰的一种,指的是透过O-糖苷键将单醣的N-乙酰葡萄糖胺键结于不同蛋白的丝氨酸或苏氨酸之上,也因此广泛参与了免疫、癌化、神经退行等许多不同的生理现象。乙酰葡萄糖胺修饰的键结与移除是个由许多因子高度介导调控的过程,包括其作用物UDP-N-乙酰葡萄糖胺的含量、营养与压力条件,以及调控乙酰葡萄糖胺键结与移除的乙酰葡萄糖胺转移酶(O-GlcNAc transferase, OGT)与乙酰葡萄糖胺水解酶(O-GlcNAcase, OGA)的酶活性。

乙酰葡萄糖胺修饰在维持正常生理恒定机制与许多病理现象中的重要性,使得乙酰葡萄糖胺转移酶与乙酰葡萄糖胺水解酶在科研与治疗应用等各领域成为了炙手可热的目标。GeneTex近来开发了两支重组兔单克隆抗体(GTX637222 与 GTX637223),适用于多种科研应用。欲了解更多GeneTex的相关产品,请联系我们国内代理商上海金畔生物或访问我们的网站www.genetex.com以获取更多信息。

重点产品

乙酰葡萄糖胺转移酶重组兔单克隆抗体 乙酰葡萄糖胺转移酶重组兔单克隆抗体
O-GlcNAc transferase antibody [HL1641] (GTX637222)  O-GlcNAc transferase antibody [HL1642] (GTX637223) 
乙酰葡萄糖胺转移酶重组兔单克隆抗体
O-GlcNAc transferase antibody (GTX109939)  O-GlcNAc transferase antibody [GT678] (GTX629812)

重点产品

目录号

产品名

应用

GTX637223

O-GlcNAc transferase antibody [HL1642]

WB, ICC/IF, IHC-P

GTX637222

O-GlcNAc transferase antibody [HL1641]

WB, ICC/IF, IHC-P

GTX109939

O-GlcNAc transferase antibody

WB, ICC/IF, IHC-P, FACS, IP

GTX629812

O-GlcNAc transferase antibody [GT678]

WB, ICC/IF, IHC-P

GTX103592

UAP1 antibody [N1C3]

WB, ICC/IF, IHC-P

GTX114634

PGM3 antibody [N1C1]

WB, ICC/IF

GTX115319

GFPT2 antibody

WB

GTX113203

GPI antibody

WB, ICC/IF, IHC-P, IHC-Fr

GTX105248

Hexokinase 1 antibody

WB, ICC/IF, IHC-P, IHC-Wm

GTX111525

Hexokinase II antibody

WB, ICC/IF, IHC-P

GTX111409

Hexokinase III antibody [C1C3-2]

WB, ICC/IF

GTX101212

G6PD antibody

WB, IHC-P

GTX101218

G6PD antibody [N3C3]

WB, IHC-P, IHC-Fr

GTX103682

MPI antibody

WB, IHC-P

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(1) 单页 – 神经退行性疾病

(2) 单页 – 癌症免疫检查点

(3) 挂图 – 神经退行性疾病

(4) 挂图 – 免疫反应

(5) 挂图 – 癌症信号

参考文献

1.Front Aging. 2021 Mar 12;1:620382. doi: 10.3389/fragi.2020.620382. eCollection 2020.

2.EMBO Rep. 2021 Jun 4;22(6):e51649. doi: 10.15252/embr.202051649. Epub 2021 Apr 15.

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