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氨基核苷嘌呤霉素

发表于由

氨基核苷嘌呤霉素

货号：
IP1160

品牌：
Jinpan

氨基核苷嘌呤霉素

暂无详情
产品简介
EC EINECS 200-388-3
MDL MFCD00063462
InChIKey RYSMHWILUNYBFW-GRIPGOBMSA-N
InChI InChI=1S/C12H18N6O3/c1-17(2)10-8-11(15-4-14-10)18(5-16-8)12-9(20)7(13)6(3-19)21-12/h4-7,9,12,19-20H,3,13H2,1-2H3/t6-,7-,9-,12-/m1/s1
PubChem CID 6020
别名 嘌呤霉素氨基核苷
英文名称 Puromycin aminonucleoside
CAS 58-60-6
分子式 C12H18N6O3
分子量 294.31
纯度 ≥98%
单位 支
生物活性 Puromycin aminonucleoside 是一种氨基核苷类抗生素，为嘌呤霉素类似物，但并不影响蛋白质合成或诱导凋亡。[1-4]
In Vitro 嘌呤霉素氨基核苷（30μg/ mL）显著增加足细胞中的p53蛋白水平。嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡是p53依赖性的，并且支持地塞米松通过p53的下调对暴露于嘌呤霉素氨基核苷的细胞发挥抗细胞凋亡作用的观点。嘌呤霉素氨基核苷以时间依赖的方式诱导足细胞凋亡[1]。表达PMAT和载体转染的细胞的IC 50值分别为48.9和122.1μM，表明PMAT增强的细胞对嘌呤霉素氨基核苷的敏感性表达。嘌呤霉素氨基核苷（250μM）对表达PMAT和载体转染的细胞均有毒性。表达PMAT的细胞中的嘌呤霉素氨基核苷摄取在pH6.6时比pH7.4时高4倍[2]。
In Vivo 对照大鼠中每个肾小球的足细胞数量为95.5±17.6，第4天为90.7，在嘌呤霉素氨基核苷（8mg/100g，iv）处理的肾病大鼠中。对照组大鼠肾小球nephrin含量为1.02±0.11 fmol，第4天和第7天嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠nephrin含量降至0.46±0.06 fmol和0.35±0.04 fmol。与足细胞相关的nephrin含量显著降低。嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠蛋白尿的发生[3]。给予嘌呤霉素氨基核苷（100 mg/kg，sc）的大鼠体重增加较少，血清肌酐水平高于对照组大鼠，表明imPuromycin氨基核苷酸肾功能[4]。
SMILES OC[C@@H]1[C@@H](N)[C@H]([C@H](N2C=NC3=C2N=CN=C3N(C)C)O1)O
靶点 Bacterial
动物实验 11周龄的雄性F344大鼠购自JaPuromycin氨基核苷SLC。在本研究中使用正常大鼠和嘌呤霉素氨基核苷肾病模型。通过在盐水中以8mg/100g体重的剂量单次静脉内注射嘌呤霉素氨基核苷，在大鼠中诱导嘌呤霉素氨基核苷肾病。对照动物接受相同体积的盐水。在嘌呤霉素氨基核苷注射后第4天和第7天研究肾病大鼠（每组n = 6）。
细胞实验 将细胞以5,000个细胞/孔的密度接种在96孔板上的含有10％FBS的MEM中。在孵育48小时后（约40-50％汇合），将细胞更换为含有不同浓度的嘌呤霉素氨基核苷的新鲜生长培养基。对于保护实验，将细胞在含有250μM嘌呤霉素氨基核苷的培养基中培养，有或没有PMAT抑制剂癸-22（2μM）。在37℃的95％O 2培养箱中孵育总共72小时后，洗涤细胞和平板。通过使用非线性回归（WinNonLin版本3.2）将细胞生长数据拟合到以下模型来确定IC 50值：S = Smax – [Smax-S0]×[Cγ/（Cγ+IC50γ）]，其中S是细胞存活表示为未处理对照细胞的光密度百分比，Smax是最大细胞存活率，S0是高药物浓度下的最低残留细胞存活率，C是嘌呤霉素氨基核苷浓度，γ是希尔系数，IC50是嘌呤霉素氨基核苷浓度导致半数最大细胞存活。在每个实验中进行五至六次测定，并进行四次独立实验。
数据来源文献 [1]. Wada T, et al. Dexamethasone prevents podocyte apoptosis induced by puromycin aminonucleoside: role of p53 and Bcl-2-related family proteins. J Am Soc Nephrol. 2005 Sep;16(9):2615-25.

[2]. Xia L, et al. Podocyte-specific expression of organic cation transporter PMAT: implication in puromycin aminonucleosidenephrotoxicity. Am J Physiol Renal Physiol. 2009 Jun;296(6):F1307-13.

[3]. Kawakami H, et al. Dynamics of absolute amount of nephrin in a single podocyte in puromycin aminonucleoside nephrosis rats calculated by quantitative glomerular proteomics approach with selected reaction monitoring mode. Nephrol Dial Transplant. 2012 Apr;

[4]. Nosaka K, et al. An adenosine deaminase inhibitor prevents puromycin aminonucleoside nephrotoxicity. Free Radic Biol Med 1997 ;22 (4): 597-605
规格 5mg 10mg 50mg

Puromycin aminonucleoside 是一种氨基核苷类抗生素，为嘌呤霉素类似物，但并不影响蛋白质合成或诱导凋亡。

Puromycin（嘌呤霉素）——pac基因筛选抗生素

发表于由

Puromycin（嘌呤霉素）——pac基因筛选抗生素

Puromycin是由Streptomyces alboniger（白黑链霉菌）产生的一种氨基糖苷类抗生素，可抑制原核细胞和真核细胞的肽基转移。Puromycin可抑制革兰氏阳性菌、多种动物细胞和昆虫细胞的生长，但是真菌和革兰氏阴性菌对Puromycin具有抗性，在一些特殊的情况下，Puromycin也可用于大肠杆菌。Puromycin用于选择携带pac抗性基因的转染细胞。
 
Puromycin化学特性
CAS号：58-58-2
分子式：C22H29N7O5, 2HCl
分子量：471.51
pKa值：6.8 和7.2
分子结构：

 
推荐使用浓度
大肠杆菌
大肠杆菌对Puromycin不敏感。
哺乳动物细胞

细胞系 种属 组织 培养基 Puromycin(ug/ml)
Hela human uterus DMEM 3
293 human kidney DMEM 3
B16 mouse melanoma RPMI 1-3
PC1.0 hamster adenocarcinoma RPMI 10

 
质量控制
纯度>95%(HPLC)
经细菌和哺乳动物细胞系鉴定活性
 
保存
4°C或-20°C保存2年，避免反复冻融。
 
产品信息

产品名称 产品编号 规格 品牌 报价 折扣
Puromycin ant-pr-1 100 mg (10 x 1 ml) invivogen ¥1,582 请询
Puromycin ant-pr-5 500 mg (50 x 1 ml) invivogen ¥5,292 请询

 
文献引用
•2011 – Mol. Endocrinol., 25: 1416 – 1430
The extreme C-terminal region of Gαs differentially couples to the luteinizing hormone and beta2-adrenergic receptors.
 DeMars G, Fanelli F, Puett D
 
•2011 – J. Cell Sci., 124: 2349 – 2356
Real-time monitoring of redox changes in the mammalian endoplasmic reticulum.
 van Lith M, Tiwari S, Pediani J, Milligan G, Bulleid NJ
 
•2011 – J. Cell Biol., 193: 307 – 318
Defective nucleotide excision repair with normal centrosome structures and functions in the absence of all vertebrate centrins.
 Dantas TJ, Wang Y, Lalor P, Dockery P, Morrison CG
 

更多基因筛选抗生素信息，请联系invivogen中国战略合作伙伴——上海金畔生物，

Puromycin Dihydrochloride ；嘌呤霉素二盐酸盐

发表于由

Puromycin Dihydrochloride ；嘌呤霉素二盐酸盐

货号：
IP1280

品牌：
Jinpan

Puromycin Dihydrochloride ；嘌呤霉素二盐酸盐

暂无详情
产品简介
EC EINECS 200-387-8
MDL MFCD00012691
别名 二氢氯化嘌呤毒素;Stillomycin
英文名称 Puromycin Dihydrochloride
CAS 58-58-2
分子式 C22H31Cl2N7O5
分子量 544.43
纯度 HPLC≥98%
单位 支
生物活性 Puromycin dihydrochloride是嘌呤霉素的二盐酸盐。 Puromycin是一种抑制 protein synthesis 的氨基糖苷类抗生素。[1-3]
In Vitro 嘌呤霉素在氨酰基-sRNA形成后阻断蛋白质合成，同时它导致小肽的积累。这两种效应似乎都是由于核糖体结合的肽基-sRNA的分裂，导致不完整肽链的释放[1]。嘌呤霉素是氨酰基-tRNA的3末端的类似物，通过与生长的多肽链非特异性连接而导致翻译过早终止。嘌呤霉素具有两种抑制作用模式。第一种是通过作为受体底物，其攻击P位点中的肽基-tRNA以形成新生肽。第二种是通过与氨酰基-tRNA竞争结合A位点[2]。当以最小量使用时，嘌呤霉素掺入新合成的蛋白质直接反映体外mRNA翻译的速率。嘌呤霉素免疫检测是放射性氨基酸标记的有利替代方案。它允许通过免疫荧光显微镜直接评估单细胞中的翻译活性，并通过荧光激活细胞分选直接评估异质细胞群[3]。
SMILES OC[C@@H]1[C@@H](NC([C@@H](N)CC2=CC=C(OC)C=C2)=O)[C@H]([C@H](N3C=NC4=C3N=CN=C4N(C)C)O1)O.[H]Cl.[H]Cl
靶点 Bacterial
数据来源文献 [1]. Nathans D, et al. Puromycin inhibition of protein synthesis: incorporation of puromycin intopeptide chains. Proc Natl Acad Sci U S A. 1964 Apr;51:585-92.

[2]. Miyamoto-Sato E, et al. Specific bonding of puromycin to full-length protein at the C-terminus. Nucleic Acids Res. 2000 Mar 1;28(5):1176-82.

[3]. Schmidt EK, et al. SUnSET, a nonradioactive method to monitor protein synthesis. Nat Methods. 2009 Apr;6(4):275-7
规格 5mg 10mM*1mL in Water 10mg 25mg

Puromycin是一种抑制 protein synthesis 的氨基糖苷类抗生素。

使用本产品的应用案例（仅供参考）

In Vitro

Cell（OC cells，2 μg/mL  puromycin）

PCNP expression plasmid and empty vector, the PCNP shRNA (sh-PCNP group) and scramble shRNA (sh-Scb group) and were transfected into OC cells with Lipofectamine 3000 Transfection Reagent to construct stable cell lines. They were screened, respectively, by G418 (Jinpan, Shanghai, China) at a concentration  of 800 μg/mL and puromycin (Jinpan, Shanghai, China) at a concentration of 2 μg/mL. 

来源文献：Dong P, Fu H, Chen L, Zhang S, Zhang X, Li H, Wu D, Ji X. PCNP promotes ovarian cancer progression by accelerating β-catenin nuclear accumulation and triggering EMT transition. J Cell Mol Med. 2020 Jul;24(14):8221-8235. doi: 10.1111/jcmm.15491. Epub 2020 Jun 16. PMID: 32548978; PMCID: PMC7348179.

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素

发表于由

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素

货号：BS111-25mg

规格：25mg

品牌：Biosharp

产品简介：

嘌呤霉素是由白黑链霉菌发酵代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过抑制蛋白质合成而杀死革兰氏阳性菌,各种动物和昆虫细胞。作用机制在于嘌呤霉素是氨酰-tRNA分子3’末端的类似物,能够与核糖体的A位点结合并掺入到延伸的肽链中。嘌呤霉素同A位点结合后,不会参与随后的任何反应,从而导致蛋白质合成的提前终止并释放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

别名：二盐酸嘌呤霉素；嘌呤霉素盐酸盐

CAS：58-58-2

分子式：C22H29N7O5 · 2HCl

分子量：544.44

纯度：≥98%

储存条件：-20℃

外观：白色粉末

单位：瓶

有效期：3年

应用：

常用于筛选能够表达pac基因（puror）的细胞株,一般2天内可以杀死99%的不表达pac基因的细胞。

使用方法：

   见说明书

注意事项：

1、  本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途

2、 本产品为有毒化合物,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

货号 BS111-25mg
规格 25mg
品牌 Biosharp
说明书下载 点击下载

嘌呤霉素溶液

发表于由

嘌呤霉素溶液

货号：BL528A

规格：1ml

品牌：Biosharp

Puromycin Solution（10mg/ml）

嘌呤霉素溶液(10mg/ml)

 CAS: 58-58-2          Formula: C22H29N7O5·2HCl          MW: 544.43

产品简介：

Puromycin是来源于Streptomyces alboniger的一种氨基核苷类抗生素,中文名为嘌呤霉素,常用于筛选能够表达pac基因（puror）的细胞。pac基因表达嘌呤霉素N-乙酰转移酶(Puromycin N-acetyl-tranferase),如果该基因表达,就会对嘌呤霉素产生抗性,这一特性目前普遍应用于筛选表达pac基因的哺乳动物稳定细胞株。目前,很多商业化的慢病毒载体都携带pac基因(一般在质粒图谱上标记为puror),可以利用嘌呤霉素的筛选,得到特定基因稳定表达的细胞株。嘌呤霉素也可以用来筛选表达pac基因的大肠杆菌菌株、酵母菌株等。Puromycin不仅能用于稳定细胞株的筛选,也用于稳定细胞株的维持。Puromycin的作用特点是快速作用于细胞,一般2天内可以杀死99%的不表达pac基因的细胞。

本产品浓度为10mg/ml,已过滤除菌,可以直接用于细胞培养。

使用说明：

一、推荐工作浓度：

推荐的作用于哺乳动物细胞的嘌呤霉素浓度一般为1-10μg/ml,但最佳工作浓度需要通过剂量反应曲线来确定。 

二、嘌呤霉素剂量反应曲线的确定(以shRNA转染或者慢病毒感染为例）：

嘌呤霉素的有效筛选浓度与细胞类型、生长状态、细胞密度、细胞代谢及细胞所处细胞周期等因素相关。为了筛选到稳定表达的shRNA或感染病毒的细胞株,确定杀死未转染/感染细胞的最低浓度嘌呤霉素非常重要。对于初次使用的细胞,一般需要通过实验来确定适合自身实验体系的剂量反应曲线(dose-response curve or kill curve)。

1、第一天：24孔板中以5~8×104cells/孔的密度接种细胞,接种够量的孔以便进行后续的剂量梯度实验。细胞培养箱内培养过夜。

2、第二天： 在培养过夜后的细胞中更换新鲜配制的筛选培养基,该筛选培养基为含不同浓度嘌呤霉素的新鲜培养基(如0、1、2.5、5、7.5、10μg/ml等),更换培养基后在细胞培养箱中继续培养。

3、第三天后：由于嘌呤霉素可以快速作用于细胞,一般2天内可以杀死99%的未表达pac基因的细胞,所以在加嘌呤霉素后的1-2天就可以进行观察细胞存活率,从而确定有效杀死正常细胞的药物最低浓度。如果细胞耐药性比较强,需要每日观察,一般4-10天内即可确定嘌呤霉素的最低浓度。

三、哺乳动物稳定表达细胞株的筛选：

转染含有pac基因的质粒或者感染含有该基因的病毒后,即可筛选稳定表达株。

1、细胞转染或感染48小时后,将细胞置于含有适当浓度嘌呤霉素的新鲜培养基中培养,此为处理组。

注意：当细胞处于分裂活跃期时,抗生素作用最明显。细胞过于密集,抗生素产生的效力会明显下降,所以细胞的密度最好不超过25%。建议同时做一个正常细胞的对照组。转染或感染48小时后,如果细胞过密也可以消化后重新接种细胞,培养过夜后即可进行嘌呤霉素筛选。

2、每隔2-3天,更换含有嘌呤霉素的培养基。

3、筛选7天后,对照组正常细胞应该100%死亡,处理组中存活的细胞为表达pac基因的细胞。然后根据实验目的进行多克隆或单克隆细胞的筛选。

注意：每日进行细胞生长状态的观察。嘌呤霉素的筛选至少需要24小时,有效浓度嘌呤霉素的筛选周期一般在2-10天。

4、待细胞可以稳定生长后,嘌呤霉素的浓度可以减半用于后续的培养。在得到稳定表达细胞株后,一般建议嘌呤霉素也须持续加入,并2-3天更换含有嘌呤霉素的新鲜培养液。

注意事项：

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

         -20℃保存,一年有效,尽量避免反复冻融。

货号 BL528A
规格 1ml
品牌 Biosharp
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