标签归档：核酸酶

BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease酶试剂盒Takara Clontech

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BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2510A BAL 31 Nuclease 50 U ￥176 BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease
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■ 制品内容 (Code No.: 2510A)
BAL 31 Nuclease (2 U/μl) 50 U
2X BAL 31 Nuclease Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
BAL 31 Nuclease是海洋性细菌A.espejiana BAL 31在菌体外产生的酶。能以内切方式特异性地降解单链DNA (活性I)，没有单链时也作用于双链DNA (活性II)，表现出从DNA两端同时降解的5’→3’及3’→5’的外切酶活性，最终产物为5’-P单核苷酸。本酶主要有[F]型和[S]型，相对于活性I，[F]型具有相对较高的活性II，[S]型的活性II较低。尽管二者活性不同，但反应条件相同，本公司出售的BAL 31 Nuclease主要为[F]型。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Alteromonas espejiana BAL 31
 
■ 活性定义
以热变性小牛胸腺DNA为底物，在30℃、pH8.0的条件下，1分钟内生成1 μg酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
从DNA片段的两端限定降解。缺失的长度适合于100-1,000个碱基左右。
 
■ 使用注意
1. 本酶表现外切酶活性的最适pH为8.0，反应需要Ca2+的存在，通过使用螯合剂可使其不可逆失活。在NaCl浓度为1 M左右时，该酶对于单链DNA表现出最大外切活性。相反对于双链DNA，其外切活性则随着盐浓度的增加而降低。当盐浓度在100 mM以下时，双链DNA可能发生随机降解。因此，建议在盐浓度200-600 mM范围内进行反应。
2. 降解速率取决于碱基序列，因此两端降解速率不同。
 
 

页面更新：2024-01-31 16:20:15

EnGen® SpRY Cas9 核酸酶 #M0669M 2500 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#M0669M
2500 pmol
7,949.00
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#M0669T
500 pmol
1,999.00
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概述

 EnGen® SpRY Cas9 核酸酶克隆自化脓链球菌（Streptococcus pyogenes），是一种经过改造的DNA 内切酶，可在靶向位点特异切割双链 DNA。其靶向切割需要一个大约 100 nt sgRNA，sgRNA 与双链 DNA 底物的 PAM 序列上游紧邻的 20 个核苷酸区域互补。与野生型 Spy Cas9 的经典 5´-NGG-3´ PAM 不同，SpRY Cas9 在体外靶向切割基本上没有 PAM序列的要求，只需要一个 5´-NNN-3´ PAM，在 PAM 上游 3 个核苷酸处进行双链切割。EnGen SpRY Cas9 在其编码蛋白的 C 端带有 SV40（Simian virus 40）T 抗原核定位序列（NLS）。

 

特性：

• 使用非特异性 PAM（5´-NNN-3´ PAM），消除对双链 DNA 靶向切割的序列限制

• 在克隆工作流程中成功用于消化大片段质粒
• 可与 EnGen sgRNA 合成试剂盒 S.pyogenes  (NEB #E3322)， EnGen 突变检测试剂盒（NEB #E3321）和 NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液（NEB #E2621）联合使用
 

产品描述：

图1 EnGen SpRY Cas9 核酸酶在体外对靶向 DNA 的切割没有序列限制
 
EnGen® SpRY Cas9 核酸酶 #M0669M 2500 pmol
EnGen SpRY Cas9 核酸酶是来自 S. pyogenes的Cas9 核酸酶的变体，其 PAM 作用结构域内有几个点突变。与野生型 Cas9 不同，EnGen SpRY Cas9 不受 NGG PAM 的限制，在体外应用中可以在任意三核苷酸序列上游进行双链切割。
 
图2 用 EnGen SpRY Cas9 对 22.6 kb 质粒 DNA 进行切割，会产生与限制性内切酶类似的特异性 
 
EnGen® SpRY Cas9 核酸酶 #M0669M 2500 pmol
EnGen SpRY Cas9 切割灵活性的演示。A）pXba 的示意图，显示了限制性内切酶 BsrGI 识别位点。矩形框中包含了 BsrGI 识别序列，红色三角形表示切割位点。B）用于靶向 pXba 中 BsrGI 位点的三个 sgRNA 序列。EnGen SpRY Cas9 和 BsrGI 的切割位点均以红色三角指示。 SpRY Cas9 非经典 PAMs 以黄色文本表示。C）在 1X NEBuffer r3.1 中，使用 10 units BsrGI 或 1µM EnGen SpRY Cas9 和上述三种 sgRNA（浓度均为1µM）消化 1µg pXba 质粒（22563 bp）。所有反应在 37°C 下温育 1 小时，然后在 80°C 下温育 5 分钟。通过使用 Agilent gDNA ScreenTape 系统在 4200 TapeStation 仪器上进行凝胶电泳，以比较 BsrGI 和 SpRY 消化后产物 DNA 条带。针对 pXba 质粒的 BsrGI 位点进行定点切割， BsrGI 和 SpRYCas9 切割产生了几乎一致的条带图谱。使用浓度低至 50 nM 的 EnGen SpRY Cas9 和 sgRNA对 1µg pXba 质粒进行消化，结果与浓度 1 µM 的相似。未酶切的 pXba 作为对照进行电泳，但是环状 DNA 在 gDNA ScreenTape 系统中电泳不能精确地按大小进行分离。
 
图3 利用 EnGen SpRY Cas9 对 22.6 kb 质粒进行线性化，然后利用 NEBuilder 高保真 DNA 组装试剂盒进行克隆
 
EnGen® SpRY Cas9 核酸酶 #M0669M 2500 pmol

 

在 1X NEBuffer™ r3.1 中，使用 50 nM 的 EnGen SpRY Cas9 和 50 nM 的 sgRNA，在37°C下反应 1 小时，将 1 µg pXba（22,563 bp）在 pVII ORF 起始密码子的下游进行线性化。在继续 DNA 组装之前，线性化质粒可以选择经过柱纯化或不纯化。按照推荐方案，使用 NEBuilder 高保真 DNA 组装试剂盒将编码核定位信号（NLS）标签的寡核苷酸插入到pVII中。通过转化后生长的克隆数量，可以定性评估在 EnGen SpRY Cas9 消化质粒后，有多少转化子来自未消化的质粒。虽然不是必需的，但在组装前对线性化的 pXba 质粒进行纯化可以减少背景菌落百分比。
 

绿豆核酸酶 #M0250L 7,500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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绿豆核酸酶 #M0250L 7,500 units 绿豆核酸酶 #M0250L 7,500 units 绿豆核酸酶 #M0250L 7,500 units

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#M0250L
7,500 units
3,229.00
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#M0250S
1,500 units
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特性

 除去 DNA 或 RNA 分子的 3´ 或 5´ 突出末端，形成可以用连接酶连接的平齐末端
 构建转录图谱
 切割发夹结构中的 loop 环
 从基因组 DNA 中切除基因编码序列
 产生新的限制性酶切位点
 

概述

本品是一种单链 DNA 或 RNA 特异性的核酸内切酶，可以从 DNA 或 RNA 分子的末端降解单链突出端，产生可连接的平齐末端。 

来源

绿豆芽。 

反应条件

1X 绿豆核酸酶反应缓冲液
[50 mM NaAc（pH 5.0 @ 25℃），30 mM NaCl，1 mM ZnSO4]，30℃ 温育。 

质保声明

绿豆核酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

1 单位指 30℃ 条件下，1 分钟产生 1 μg 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。活性检测条件请联系我们。  

浓度

10,000 units/ml。 

注意事项

不建议热失活。在该酶热失活前，DNA 会发生“呼吸”作用，从而导致降解。

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。  

S1核酸酶-S1 Nuclease酶试剂盒Takara Clontech

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S1核酸酶-S1 Nuclease
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2410A S1 Nuclease 20,000 U ￥525 S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease
Takara 2410B (A × 5) S1 Nuclease 20,000 U × 5 ￥2,484 S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease
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■ 制品内容 (Code No.: 2410A)
S1 Nuclease (180 U/μl) 20,000 U
10X S1 Nuclease Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是单链特异性的核酸内切酶，能将DNA或RNA降解成为酸可溶性5’-P核苷酸，也可以降解双链核酸中的单链部分。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Aspergillus oryzae
 
■ 活性定义
以热变性小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH4.6的条件下，1分钟内生成1 μg的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 特性
1. 分子量：32,000，依赖Zn2+的糖蛋白质。
2. 最适pH：pH4.5 (CH3COONa缓冲液)。
3. 辅因子：Zn2+(必要)。
4. 抑制剂： EDTA (1-20 mM)
  磷酸盐： 磷酸 (2 mM抑制活性50%)。
  焦磷酸盐 (20 μM抑制活性50%)。
dAMP (85 μM抑制活性50%)。
dATP (1 μM抑制活性50%)。
 
■ 稳定性
1. 本酶在0.4 M NaCl，0.6% SDS和0.8 M尿素中活性稳定。
2. 当反应液中含有40-50%甲醛时，需将酶量增加10倍。
3. 对热很稳定，在底物存在下65-70℃仍能表现活性。
 
■ 用途
1. 除去DNA-DNA和DNA-RNA杂交体中的单链部分。
2. 双链DNA末端平滑化。
3. S1 mapping。
 
 

页面更新：2024-01-25 16:26:02

无核酸酶水 #B1500L 100 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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无核酸酶水                              收藏

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#B1500L
100 ml
879.00
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#B1500S
25 ml
359.00
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概述

无核酸酶水是配制试剂和酶学反应使用的理想用水。生产过程中未使用DEPC等有毒溶剂，因此不会对酶学反应有任何抑制作用。

优势和特性

储存温度：

25℃

微球菌核酸酶 #M0247S 320,000 gel units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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微球菌核酸酶 #M0247S 320,000 gel units 微球菌核酸酶 #M0247S 320,000 gel units 微球菌核酸酶 #M0247S 320,000 gel units 微球菌核酸酶 #M0247S 320,000 gel units 微球菌核酸酶 #M0247S 320,000 gel units

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#M0247S
320,000 gel units
899.00
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特性

 蛋白质制备中降解核酸
 体外翻译
 在非机械细胞裂解液制备时降低细胞裂解液的粘性
 染色质结构分析
 快速 RNA 测序
 ChIP 分析 

概述

微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），是一种非特异性的核酸内切酶和核酸外切酶。该酶从重组 E. coli 菌株纯化得到，可消化双链、单链、环化以及线性的核酸。在 pH 7.0-10.0 的范围内，微球菌核酸酶均有活性，无论对于 DNA 底物还是 RNA 底物，其最适 pH 值均为 9.2。微球菌核酸酶偏向于切割富含腺苷酸、脱氧腺苷酸或胸腺苷酸的底物。酶切 DNA 和 RNA 底物产生带有 3´ 磷酸的单核苷酸和二核苷酸。 

来源

重组 E. coli 菌株，含有微球菌核酸酶（GeneID：3238436）和麦芽糖结合蛋白（MBP）的融合基因。融合蛋白去除 MBP 并经纯化获得微球菌核酸酶。 

反应条件

1X 微球菌核酸酶反应缓冲液
[50 mM Tris-HCl（pH 7.9 @ 25℃），5 mM CaCl2]，加入 100 μg/ml BSA，37℃ 温育。 

质保声明

微球菌核酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

单位定义

（Kunitz 单位）1 单位指 37℃ 条件下，30 分钟内催化生成能在 260 nm 处增加 1 个 OD 值的酸溶性寡核苷酸所需的酶量。
（琼脂糖凝胶单位）1 单位指 37℃ 条件下，15 分钟内消化 1 μg Lambda 基因组 DNA，使低分子量 DNA 片段（100-400 bp）在 1.2% 的琼脂糖凝胶上消失所需的酶量。
注意：10,000 个琼脂糖凝胶单位约等于 1,000 个Kunitz 单位。
单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或 www.nebchina.com。 

浓度

2 X 106 gel units/ml。 

注意事项

微球菌核酸酶的活性需要 1-5 mM Ca2+。微球菌核酸酶的活性范围为 pH 7-10，盐离子浓度低于 100 mM。加入过量 EGTA 可使酶失活。 

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。  

核酸酶 P1 #M0660S 10,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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核酸酶 P1                              收藏

核酸酶 P1 #M0660S 10,000 units 核酸酶 P1 #M0660S 10,000 units 核酸酶 P1 #M0660S 10,000 units

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#M0660S
10,000 units
679.00
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特性

去除 DNA 分子上单链末端以形成平末端

切割发夹环
DNA 或 RNA 碱基组成分析
蛋白纯化过程中去除核酸
 

概述

 核酸酶 P1（来源自 p.citrinum）是锌依赖的单链特异性核酸酶，能无碱基特异地水解 RNA 和单链 DNA 上的 3’→5′ 磷酸二酯键。该酶也具有 3’-磷酸单酯酶活性。

 
尽管核酸酶 P1 是单链特异性核酸酶，其在核酸酶 P1 反应缓冲液中对双链 DNA （dsDNA）也具有活性。在双链 DNA 存在的情况下，如果只想消化单链核苷酸（ssDNA 或 RNA），建议核酸酶 P1 在 1X NEBuffer 1.1 反应缓冲液条件下进行反应，以使该酶发挥最大单链核酸酶活性。
 

反应条件

 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液，37℃ 温育。

热失活：75℃ 加热 10 分钟。
 

单位定义

 1 单位指在 1X 核酸酶 P1 反应缓冲液体系中，37℃ 条件下，每分钟消化圆酵母（Torula Yeast）总 RNA 释放 1 μg 酸可溶性核苷酸所需要的酶量。

浓度

 100,000 units/ml

注意事项

核酸酶 P1 底物特异性如下：3’AMP＞RNA＞ssDNA＞＞dsDNA

2’AMP 的水解效率比 3’AMP 低 3000 倍。
 

EnGen® Spy dCas9（SNAP-tag®）核酸酶 #M0652S 70 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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EnGen® Spy dCas9（SNAP-tag®）核酸酶                              收藏

EnGen® Spy dCas9（SNAP-tag®）核酸酶 #M0652S 70 pmol EnGen® Spy dCas9（SNAP-tag®）核酸酶 #M0652S 70 pmol EnGen® Spy dCas9（SNAP-tag®）核酸酶 #M0652S 70 pmol

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#M0652S
70 pmol
759.00
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#M0652T
400 pmol
1,899.00
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特性

·体外切刻 dsDNA。

·通过直接导入有活性的切刻酶复合物进行基因编辑。

概述

 EnGen ® Spy dCas9（SNAP-tag） 核酸酶是 Cas9 核酸酶的无活性突变体，保留了与 DNA 的结合活性。N 端 SNAP-tag 标签可与荧光基团、生物素和许多其它利于可视化和靶标富集的偶联物共价结合。与 EnGen sgRNA 合成试剂盒，S. pyogenes （NEB #E3322）兼容。

反应条件

 1X NEBuffer™ 3.1，37℃ 温育

浓度

 1 µM，20 µM

质保声明

 EnGen ® Spy dCas9（SNAP-tag） 核酸酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或 www.jinpanbio.com。

参考文献

 关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。 www.jinpanbio.cn 或 www.jinpanbio.com

绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease酶试剂盒Takara Clontech

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绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2420A Mung Bean Nuclease 2,000 U ￥278 绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease 绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease 绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease
Takara 2420B (A × 5) Mung Bean Nuclease 2,000 U × 5 ￥1,315 绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease 绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease 绿豆芽核酸酶Mung Bean Nuclease
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■ 制品内容 (Code No.: 2420A)
Mung Bean Nuclease (40 U/μl) 2,000 U
10X Mung Bean Nuclease Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是单链特异性核酸内切酶，生成具有5’-P末端的单核苷酸或寡核苷酸。过量的酶还可以降解双链DNA、RNA或者DNA-RNA杂交体，这时，它会选择性地降解富含AT的区域。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Mung Bean Sprouts
 
■ 活性定义
以热变性小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH5.0的条件下，1分钟内产生1 μg的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 杂交作图 (S1 mapping)，与S1核酸酶相比不易发生Nibbling现象 (Code No.: 2410)，因此能得到正确的电泳带。
2. 双链DNA末端的平滑化 (平滑化的效率依赖于碱基序列)。
3. 在甲酰胺存在的条件下，切除基因编码区。
 
■ 使用注意
1. 本酶在pH 7.0条件下稳定。
2. 如果不含0.1 mM Zn2+,1 mM半胱氨酸和0.005%Triton X-100，本酶在pH 5.0条件下会失活。在低pH条件下，单链特异性会降低。
3. 添加EDTA热处理或使用0.01%SDS处理能使本酶完全失活。
4. 双链识别能力依赖于碱基序列，切点多为ApN及T (U) pN，特别是在ApA处完全分解，而对G及C的序列几乎不分解。
5. 与S1 Nuclease不同，不能切断切口互补链。
 
 

页面更新：2024-01-31 16:18:17

核酸酶Exonuclease I酶试剂盒Takara Clontech

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核酸酶Exonuclease I
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Takara 2650A Exonuclease I 750 U ￥134 核酸酶Exonuclease I 核酸酶Exonuclease I 核酸酶Exonuclease I
Takara 2650B (A × 5) Exonuclease I 750 U × 5 ￥537 核酸酶Exonuclease I 核酸酶Exonuclease I 核酸酶Exonuclease I
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■ 制品内容 (Code No.: 2650A)
Exonuclease I (5 U/μl) 750 U
10X Exonuclease I Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
E.coli exonuclease I是单链特异性3’→5’核酸外切酶，分解生成5’-单核苷酸。本酶对单链DNA的特异性非常高，不分解双链DNA及RNA。可通过80℃处理15分钟使之失活。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli JM109 carrying plasmid encoding the gene for E.coli exonuclease I
 
■ 活性定义
以热变性的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH9.5的条件下，30分钟内产生10 nmol 的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
 
■ 用途
1. PCR反应后残存引物的分解。
2. 在反应液中去除ssDNA 片段。
 
 

页面更新：2023-12-01 16:35:32