Spy Cas9 核酸酶 #M0386M 2500 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Spy Cas9 核酸酶                                   #M0386M 2500 pmol Spy Cas9 核酸酶                                   #M0386M 2500 pmol Spy Cas9 核酸酶                                   #M0386M 2500 pmol Spy Cas9 核酸酶                                   #M0386M 2500 pmol

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#M0386M
2500 pmol
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90 pmol
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500 pmol
1,699.00

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特性

·双链 DNA 位点特异性切割
·基因组编辑 

概述

Cas9 核酸酶,S. pyogenes,是一种 RNA 介导的核酸内切酶,可以催化双链 DNA 的特异位点切割。其识别 PAM(Protospacer Adjacent Motif)序列的  NGG 处,在靶序列的 3 个碱基内进行切割。PAM 序列的 NGG 必须连在基因编辑靶标位点之后,位于与 sgRNA 互补的 DNA 的对链上。 

来源

重组 E. coli 菌株,其克隆有来自 Streptococcus pyogenes 的 Cas9 基因。 

反应条件

1X Cas9 核酸酶反应缓冲液,37℃ 温育。 

质保声明

Cas9 核酸酶,S. pyogenes 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。  

浓度

1 μM,20 μM

参考文献

关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。  

Cas9 核酸酶,S.pyogenes 序列识别和 DNA 剪切工作原理示意图

 Spy Cas9 核酸酶                                   #M0386M 2500 pmol

S1核酸酶-S1 Nuclease酶试剂盒Takara Clontech

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S1核酸酶-S1 Nuclease
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2410A S1 Nuclease 20,000 U ¥525 S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease
Takara 2410B (A × 5) S1 Nuclease 20,000 U × 5 ¥2,484 S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease S1核酸酶-S1 Nuclease
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■ 制品内容 (Code No.: 2410A)
S1 Nuclease (180 U/μl) 20,000 U
10X S1 Nuclease Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是单链特异性的核酸内切酶,能将DNA或RNA降解成为酸可溶性5’-P核苷酸,也可以降解双链核酸中的单链部分。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Aspergillus oryzae
 
■ 活性定义
以热变性小牛胸腺DNA为底物,在37℃、pH4.6的条件下,1分钟内生成1 μg的酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 特性
1. 分子量:32,000,依赖Zn2+的糖蛋白质。
2. 最适pH:pH4.5 (CH3COONa缓冲液)。
3. 辅因子:Zn2+(必要)。
4. 抑制剂: EDTA (1-20 mM)
  磷酸盐: 磷酸 (2 mM抑制活性50%)。
  焦磷酸盐 (20 μM抑制活性50%)。
dAMP (85 μM抑制活性50%)。
dATP (1 μM抑制活性50%)。
 
■ 稳定性
1. 本酶在0.4 M NaCl,0.6% SDS和0.8 M尿素中活性稳定。
2. 当反应液中含有40-50%甲醛时,需将酶量增加10倍。
3. 对热很稳定,在底物存在下65-70℃仍能表现活性。
 
■ 用途
1. 除去DNA-DNA和DNA-RNA杂交体中的单链部分。
2. 双链DNA末端平滑化。
3. S1 mapping。
 
 

页面更新:2024-01-25 16:26:02

EnGen® Sau Cas9 核酸酶 #M0654S 70 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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EnGen® Sau Cas9 核酸酶                                   #M0654S 70 pmol EnGen® Sau Cas9 核酸酶                                   #M0654S 70 pmol EnGen® Sau Cas9 核酸酶                                   #M0654S 70 pmol EnGen® Sau Cas9 核酸酶                                   #M0654S 70 pmol

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70 pmol
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400 pmol
1,899.00

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特性

·体外切割 dsDNA
·通过直接导入有活性的核酸酶复合物进行基因编辑

概述

EnGen ® Sau Cas9 核酸酶识别 5′-NNGRRT-3′ PAM 序列,切割位于 PAM 序列上游的第 3 个碱基位置,切割后为平末端。其双端核定位序列(NLS)可提高运输到细胞核的效率。高浓度酶可用于显微注射、电转和脂质体转染。

 

反应条件

 1X NEBuffer™ 3.137 温育

热失活

 65°C5 min

浓度

 1 µM20 µM

质保声明

 EnGen ® Sau Cas9 核酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。 www.jinpanbio.cn www.jinpanbio.com

参考文献

 关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。 www.jinpanbio.cn www.jinpanbio.com

Sau Cas9 核酸酶序列识别和 DNA 剪切工作原理示意图

 EnGen® Sau Cas9 核酸酶                                   #M0654S 70 pmol

EnGen® SpRY Cas9 核酸酶 #M0669M 2500 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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#M0669M
2500 pmol
7,949.00

#M0669T
500 pmol
1,999.00

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概述

 EnGen® SpRY Cas9 核酸酶克隆自化脓链球菌(Streptococcus pyogenes),是一种经过改造的DNA 内切酶,可在靶向位点特异切割双链 DNA。其靶向切割需要一个大约 100 nt sgRNA,sgRNA 与双链 DNA 底物的 PAM 序列上游紧邻的 20 个核苷酸区域互补。与野生型 Spy Cas9 的经典 5´-NGG-3´ PAM 不同,SpRY Cas9 在体外靶向切割基本上没有 PAM序列的要求,只需要一个 5´-NNN-3´ PAM,在 PAM 上游 3 个核苷酸处进行双链切割。EnGen SpRY Cas9 在其编码蛋白的 C 端带有 SV40(Simian virus 40)T 抗原核定位序列(NLS)。

 

特性:

• 使用非特异性 PAM(5´-NNN-3´ PAM),消除对双链 DNA 靶向切割的序列限制

• 在克隆工作流程中成功用于消化大片段质粒
• 可与 EnGen sgRNA 合成试剂盒 S.pyogenes  (NEB #E3322), EnGen 突变检测试剂盒(NEB #E3321)和 NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液(NEB #E2621)联合使用
 

产品描述:

图1 EnGen SpRY Cas9 核酸酶在体外对靶向 DNA 的切割没有序列限制
 
EnGen® SpRY Cas9 核酸酶                               #M0669M 2500 pmol
EnGen SpRY Cas9 核酸酶是来自 S. pyogenes的Cas9 核酸酶的变体,其 PAM 作用结构域内有几个点突变。与野生型 Cas9 不同,EnGen SpRY Cas9 不受 NGG PAM 的限制,在体外应用中可以在任意三核苷酸序列上游进行双链切割。
 
图2 用 EnGen SpRY Cas9 对 22.6 kb 质粒 DNA 进行切割,会产生与限制性内切酶类似的特异性 
 
EnGen® SpRY Cas9 核酸酶                               #M0669M 2500 pmol
EnGen SpRY Cas9 切割灵活性的演示。A)pXba 的示意图,显示了限制性内切酶 BsrGI 识别位点。矩形框中包含了 BsrGI 识别序列,红色三角形表示切割位点。B)用于靶向 pXba 中 BsrGI 位点的三个 sgRNA 序列。EnGen SpRY Cas9 和 BsrGI 的切割位点均以红色三角指示。 SpRY Cas9 非经典 PAMs 以黄色文本表示。C)在 1X NEBuffer r3.1 中,使用 10 units BsrGI 或 1µM EnGen SpRY Cas9 和上述三种 sgRNA(浓度均为1µM)消化 1µg pXba 质粒(22563 bp)。所有反应在 37°C 下温育 1 小时,然后在 80°C 下温育 5 分钟。通过使用 Agilent gDNA ScreenTape 系统在 4200 TapeStation 仪器上进行凝胶电泳,以比较 BsrGI 和 SpRY 消化后产物 DNA 条带。针对 pXba 质粒的 BsrGI 位点进行定点切割, BsrGI 和 SpRYCas9 切割产生了几乎一致的条带图谱。使用浓度低至 50 nM 的 EnGen SpRY Cas9 和 sgRNA对 1µg pXba 质粒进行消化,结果与浓度 1 µM 的相似。未酶切的 pXba 作为对照进行电泳,但是环状 DNA 在 gDNA ScreenTape 系统中电泳不能精确地按大小进行分离。
 
图3 利用 EnGen SpRY Cas9 对 22.6 kb 质粒进行线性化,然后利用 NEBuilder 高保真 DNA 组装试剂盒进行克隆
 
EnGen® SpRY Cas9 核酸酶                               #M0669M 2500 pmol

 

在 1X NEBuffer™ r3.1 中,使用 50 nM 的 EnGen SpRY Cas9 和 50 nM 的 sgRNA,在37°C下反应 1 小时,将 1 µg pXba(22,563 bp)在 pVII ORF 起始密码子的下游进行线性化。在继续 DNA 组装之前,线性化质粒可以选择经过柱纯化或不纯化。按照推荐方案,使用 NEBuilder 高保真 DNA 组装试剂盒将编码核定位信号(NLS)标签的寡核苷酸插入到pVII中。通过转化后生长的克隆数量,可以定性评估在 EnGen SpRY Cas9 消化质粒后,有多少转化子来自未消化的质粒。虽然不是必需的,但在组装前对线性化的 pXba 质粒进行纯化可以减少背景菌落百分比。
 

核酸酶与核酸清除剂

核酸酶与核酸清除剂

货号:BL770A

规格:250ml/盒

品牌:biosharp

品详情:

 

产品简介:

本产品主要用于各类PCR实验室中的样本处理区域、操作区等实验环境,多种高效清除成分能够有效地清除核酸及核酸酶,来防止因核酸污染造成的假阳性结果及核酸酶造成的假阴性结果,保证实验结果的真实性、准确性。

 

 

使用方法:

直接将本产品喷洒在桌面或实验仪器上,等约10分钟后用干净的纸巾或者湿巾进行擦拭即可。还可以用于各种实验耗材,例如离心管、吸头盒、试管架、试管等,直接喷到耗材表面,待表面晾干后(约10分钟)即可直接使用。对于其他的乳胶制品、不锈钢制品等均有效果。

 

 

注意事项

1、 本产品安全,无毒,无刺激性,但是在使用过程中建议佩戴口罩,避免和皮肤黏膜接触,如果接触请立即用大量清水冲洗。

2、 如果离心管等耗材在进行清除时,试剂没有完全干就加入核酸样本,会因为产品本身的清除效果对核酸样本造成影响,请确认耗材表面的清除试剂完全干后再进行后续实验

3、 若长时间不适用本产品,请将喷头调至关闭状态,防止误喷。

4、 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

保存条件:

常温保存,有效期半年。

货号 BL770A
规格 250ml/盒
品牌 biosharp

Authenticase® 切割错配核酸酶 #M0689L 125 reactions-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆质粒 & DNA

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#M0689L
125 reactions
7,199.00

#M0689S
25 reactions
1,799.00

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产品特点

 
能够识别错配和插入/缺失(indel),并在其外侧酶切的结构特异性核酸酶混合物
 ·识别插入/缺失(indel)以及单碱基错配:C/C、T/C、A/C、T/G、G/G、T/T 和 A/A
 ·应用:
       ·  在寡核苷酸合成过程中进行错误修正
       ·  错配检测分析

产品描述

 Authenticase 切割错配核酸酶是一种专有的结构特异性核酸酶混合物,能够识别双链 DNA 上范围为 1-10 bp的错配和插入/缺失(indel)区域,并在其外侧进行切割。该配方可以限制对 DNA 同源双链区域的非特异性切割活性。Authenticase 切割错配核酸酶可作为一种在寡核苷酸的 PCR 基因组装过程中的修正试剂,在最后复性和扩增步骤之前,通过酶法去除错误(即去除由寡核苷酸合成引起的错配和插入/缺失(indel)错误)。另外,Authenticase 切割错配核酸酶可替代 T7 核酸内切酶 I 进行错配检测分析,用于评估基因组编辑效率。

 

 产品应用特色

 

 · 减少需要筛选的菌落数,从而节省时间

 ·  替代 T7 核酸内切酶 I 用于错配检测

 

 Authenticase 切割错配核酸酶的作用机理

Authenticase® 切割错配核酸酶                               #M0689L 125 reactions

Authenticase 切割错配核酸酶可以切割携带错配或插入/缺失(indel)的双链 DNA,留下 3′ 或 5′ 突出末端。
 
图 2:Authenticase 切割错配核酸酶的应用
Authenticase® 切割错配核酸酶                               #M0689L 125 reactions
 
Authenticase 切割错配核酸酶是一种专有的结构特异性核酸酶混合物,能够识别双链 DNA 上范围为 1-10 bp的错配和插入/缺失(indel)区域,并在其外侧进行切割。该配方可以限制对 DNA 同源双链区域的非特异性切割活性。Authenticase 切割错配核酸酶可作为一种在寡核苷酸的 PCR 基因组装过程中的修正试剂,在最后复性和扩增步骤之前,通过酶法去除“错误”(即去除由寡核苷酸合成引起的错配和插入/缺失(indel)错误)。另外,Authenticase 切割错配核酸酶可替代 T7 核酸内切酶 I 进行错配检测分析,用于评估基因组编辑效率(其中 S1 是起始物质,P1 和 P2 是 Authenticase 切割错配核酸酶消化所得的产物)。
 
图3:相比 CorrectASE 酶,Authenticase 切割错配核酸酶在降低错误率方面的表现更优
 
Authenticase® 切割错配核酸酶                               #M0689L 125 reactions
由 IDT® 公司合成 16 种寡核苷酸(大小范围为 50-60 nt),用于扩增 MBD 基因(645 bp)。按照说明书建议,进一步处理 PCR 扩增子以降低片段中的错误率。使用 NEBuilder® 高保真 DNA 组装克隆试剂盒 (NEB #E5520) 将经过错误修正的片段克隆到载体中,并利用筛选平板 (LB +amp) 分离菌落。每组实验均选取出 12 个 E. coli 菌落进行 DNA 质粒提取:1) 无酶处理; 2) 用 Authenticase 切割错配核酸酶处理;3) 用 CorrectASE 处理,然后进行 Sanger DNA 测序。Authenticase 切割错配核酸酶将错误率从 645 bp 中 1 个错误降低到 1935 bp 中 1 个错误,而使用 CorrectASE 的错误率为 1,419 bp中 1 个错误。
 
图 4:突变检测:Authenticase 切割错配核酸酶 vs T7 核酸内切酶 I
 
Authenticase® 切割错配核酸酶                               #M0689L 125 reactions
比较使用 Authenticase 切割错配核酸酶和 T7 核酸内切酶 I 进行错配检测的效果。通过混合序列确定的 PCR 扩增子,然后加热并重新退火,人工创建含有各种错配或插入缺失(例如 A/C 错配、T/T 错配、2-bp 插入缺失等)的异源双链 DNA 库。这样就为每种测试的变体制备了具有预设突变率(约 21-25% 突变体和 75-79% 野生型)的异源双链底物。通过 Authenticase 切割错配核酸酶或 T7 Endo I 进行错配切割,并在 Agilent® Bioanalyzer® 上分析反应产物。根据观察到的切割产物和起始底物的摩尔浓度计算大约的突变率(切割百分比),然后绘制表示预期突变率的黑色实线参考线。Authenticase 切割错配核酸酶的性能与 T7 核酸内切酶 I 相当或更好。如果突变类型是单碱基或 2 bp 突变,Authenticase 切割错配核酸酶的检测效果优于 T7 核酸内切酶 I。如果突变类型是 indel(插入/删除)或超过 3 bp 的突变,Authenticase 切割错配核酸酶的检测效果与 T7 核酸内切酶 I 相当。
 

 

 

 

 

EnGen® Spy dCas9(SNAP-tag®)核酸酶 #M0652S 70 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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EnGen® Spy dCas9(SNAP-tag®)核酸酶                              收藏

EnGen® Spy dCas9(SNAP-tag®)核酸酶                                  #M0652S 70 pmol EnGen® Spy dCas9(SNAP-tag®)核酸酶                                  #M0652S 70 pmol EnGen® Spy dCas9(SNAP-tag®)核酸酶                                  #M0652S 70 pmol

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70 pmol
759.00

#M0652T
400 pmol
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特性

·体外切刻 dsDNA

·通过直接导入有活性的切刻酶复合物进行基因编辑。

概述

 EnGen ® Spy dCas9SNAP-tag 核酸酶是 Cas9 核酸酶的无活性突变体,保留了与 DNA 的结合活性。N SNAP-tag 标签可与荧光基团、生物素和许多其它利于可视化和靶标富集的偶联物共价结合。与 EnGen sgRNA 合成试剂盒,S. pyogenes NEB #E3322)兼容。

反应条件

 1X NEBuffer™ 3.137 温育

浓度

 1 µM20 µM

质保声明

 EnGen ® Spy dCas9SNAP-tag) 核酸酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。 www.jinpanbio.cn www.jinpanbio.com

参考文献

 关于该酶性质和产品应用的参考文献,请联系我们。 www.jinpanbio.cn www.jinpanbio.com

EnGen® Seq1 Cas9 核酸酶 #M0668T 500 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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货 号
规 格
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#M0668T
500 pmol
1,899.00

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产品特点:

PAM 序列(5´- NAGA- 3´)允许靶向额外的基因组区域
是直接导入 Cas9/sgRNA 复合物进行基因编辑的理想选择
与 EnGen 突变检测试剂盒(NEB #E3321S)兼容
体外应用时,在 20°C至 45°C范围内具有活性
 

概述:

 该酶克隆自马链球菌(Streptococcus equinus),是一种由 RNA 引导的核酸内切酶,可在靶向位点特异切割双链 DNA。靶向切割需要由 Cas9 和 116 nt sgRNA 组成的核糖核蛋白复合物。sgRNA 编码一个 20 核苷酸序列,与非靶链上 5´–NAGA–3´ 原间隔区相邻序列(PAM)上游的 DNA 靶向互补。EnGen Seq1 Cas9 在 PAM 上游的第 3 个碱基外进行 DNA 双链切割。EnGen Seq1 Cas9 在其蛋白质的 N 端和 C 端带有 SV40(Simian virus 40)T 抗原核定位序列(NLS)。

 
sgRNA 引导 S. equinus Cas9 核酸酶切割靶标 DNA 示意图
 
EnGen® Seq1 Cas9 核酸酶                               #M0668T 500 pmol
 
上图中,S. equinus Cas9(Seq1 Cas9)蛋白以米色显示,sgRNA 以蓝色显示,DNA 以灰色、绿色和红色显示。DNA 靶标以及前间隔序列以绿色显示,图中 R-loop 区域展示了靶标序列与向导 RNA 互补配对。Cas9 与 DNA 结合所需的 PAM 序列(protospacer adjacent motif)以红色显示,黑色三角标注 DNA 的切割位置。
 

BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease酶试剂盒Takara Clontech

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BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2510A BAL 31 Nuclease 50 U ¥176 BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease BAL 31 核酸酶BAL 31 Nuclease
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■ 制品内容 (Code No.: 2510A)
BAL 31 Nuclease (2 U/μl) 50 U
2X BAL 31 Nuclease Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
BAL 31 Nuclease是海洋性细菌A.espejiana BAL 31在菌体外产生的酶。能以内切方式特异性地降解单链DNA (活性I),没有单链时也作用于双链DNA (活性II),表现出从DNA两端同时降解的5’→3’及3’→5’的外切酶活性,最终产物为5’-P单核苷酸。本酶主要有[F]型和[S]型,相对于活性I,[F]型具有相对较高的活性II,[S]型的活性II较低。尽管二者活性不同,但反应条件相同,本公司出售的BAL 31 Nuclease主要为[F]型。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Alteromonas espejiana BAL 31
 
■ 活性定义
以热变性小牛胸腺DNA为底物,在30℃、pH8.0的条件下,1分钟内生成1 μg酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
从DNA片段的两端限定降解。缺失的长度适合于100-1,000个碱基左右。
 
■ 使用注意
1. 本酶表现外切酶活性的最适pH为8.0,反应需要Ca2+的存在,通过使用螯合剂可使其不可逆失活。在NaCl浓度为1 M左右时,该酶对于单链DNA表现出最大外切活性。相反对于双链DNA,其外切活性则随着盐浓度的增加而降低。当盐浓度在100 mM以下时,双链DNA可能发生随机降解。因此,建议在盐浓度200-600 mM范围内进行反应。
2. 降解速率取决于碱基序列,因此两端降解速率不同。
 
 

页面更新:2024-01-31 16:20:15

无核酸酶水 #B1500L 100 ml-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 限制性内切酶 – 缓冲液稀释液

无核酸酶水                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
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#B1500L
100 ml
879.00

#B1500S
25 ml
359.00

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概述

无核酸酶水是配制试剂和酶学反应使用的理想用水。生产过程中未使用DEPC等有毒溶剂,因此不会对酶学反应有任何抑制作用。

优势和特性

储存温度:

25