普通RIPA裂解液(组织/细胞)

普通RIPA裂解液(组织/细胞)

货号:
R0020

品牌:
Jinpan

产品简介
别名 蛋白提取试剂盒
英文名称 RIPA buffer
储存条件 附件PMSF-20℃,裂解液4℃。有效期1年
单位
规格 100ml
普通RIPA裂解液(组织/细胞)产品配有一支PMSF(100mM,1.5ml)

产品简介:RIPA 组织/细胞裂解液是利用表面活性剂等来裂解细胞膜(包括核膜)。本试剂提取的蛋白为可溶性总蛋白。

使用说明 :

如发现RIPA有沉淀,请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。

根据使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,混匀备用 (PMSF现用现加)。

1、样品前处理:

a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,按照6孔板每孔细胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液,用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 5-10×105细胞/管,然后再裂解。

c)对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量) 。

用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

2、后处理:

将裂解后的样品10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

Western及IP细胞裂解液

Western及IP细胞裂解液

货号:BL509A

规格:100ml

品牌:Biosharp

WesternIP细胞裂解液 

别名Cell lysis buffer for Western and IP

产品简介

WesternIP细胞裂解液(Cell lysis buffer for Western and IP),是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)

 WesternIP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris (pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。WesternIP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

使用说明

对于培养细胞样品:

1、融解WesternIP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM

2、对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(若血清中的蛋白没有干扰,可不洗)。按照6孔板每孔加入100-200ul裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。

  对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200ul裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应无明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。

3、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加100ul裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150200ul

对于组织样品:

1、把组织剪切成细小的碎片。

2、融解WesternIP细胞裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM

3、按照每20mg组织加入100-200ul裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)

4、用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

5、充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

6、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注意事项

1、为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

2、需自备PMSF

3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4进行。

4、可能需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

-20保存,一年有效。

货号 BL509A
规格 100ml
品牌 Biosharp
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NP-40裂解液

NP-40裂解液

货号:BL653A

规格:100ml

品牌:biosharp

商品详情:

NP-40 Lysis Buffer

NP-40裂解液

产品编号

产品名称

规格

BL653A

NP-40裂解液

100 ml

 

产品简介

NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。通过本细胞裂解液提取得到的蛋白样品,可以用于PAGEWestern blot,免疫沉淀(immunol precipitationIP)和免疫共沉淀(co-IP)等实验。

NP-40裂解液的主要成分为1%NP-4050 mM Tris-HclpH7.4),150mM NaCl,以及Sodium OrthovanadateSodium FluorideEDTA等。温和的裂解方法有利于维持原有的蛋白结构,并维持原有的蛋白间相互作用。本产品需要和常规的蛋白酶抑制剂一起使用,以达到更好的提取效果;本产品含有磷酸酶抑制剂,可用于提取磷酸化蛋白。

NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

 

使用说明

1、使裂解液充分融解,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM,根据具体实验需求可选择加入蛋白酶抑制剂。

2、根据样品的类型进行如下操作:

对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(若血清中的蛋白没有干扰,可不洗)。按照6孔板每孔加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用移液器吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。

对于悬浮细胞:离心收集细胞,去除培养基,用手指把细胞用力弹散,按照6孔板每孔细胞加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应无明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。

对于组织样品:把组织剪切成细小的碎片。按照每20mg组织加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)使用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

3、样品充分裂解后,4 10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGEWestern blot、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加150ul裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200250ul

 

注意事项

1、为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

2、需自备PMSF。

3、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

4、可能需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

-20℃保存,一年有效。加入蛋白酶抑制剂后建议适量分装 -20℃冻存,避免反复冻融。

货号 BL653A
规格 100ml
品牌 biosharp
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CEM Accent微波多肽裂解

CEM Accent微波多肽裂解

CEMAccent微波多肽裂解

产品编号:
市场价:¥0.00
会员价:¥0.00
品牌:CEM
生产厂家:CEM

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PYNN培安Accent微波多肽裂解

在多肽合成流程中多肽裂解无疑是最重要的步骤之一。如果因为裂解不成功或者裂解效率不高而导致多肽合成失败,我们就必须再重新合成一次,为什么要冒这样的风险呢?

Accent多肽裂解系统采用的是CEM专利的单模微波技术,最大效率地自动耦合微波能量。光纤温度传感器可以原位进行温度测定,同时控制功率输出,从而保证更快的裂解效率、更高的多肽产量和多肽纯度。

此外,Accent可以帮助你快速简便地检测多肽合成的进程,不必再等上很长时间才知道你的合成是否成功。

Microcleavage仅需2分钟!
在多肽合成过程中可以通过microcleavage结合LC/MS来精确地确定合成是否成功。Microcleavage要比Kaiser测试法更具有权威性,是一种检测合成过程中多肽质量的最好方法。不幸的是,传统的microcleavage需要1个小时才能获得结果,从而浪费宝贵的合成时间。使用Accent系统,microcleavage 可以在不到2分钟的时间内完成,从而快速地确定合成的质量,并且避免最大程度的减少不必要的时间损耗。

主要特点

完整多肽裂解仅需30分钟甚至更少
仅在2分钟内即可完成Microcleavage
更高多肽纯度
更高多肽产量
更少使用刺激性气味试剂,更安全

裂解规模 微量–0.25 mmol
反应器规格 4 mL, 25 mL, 和35 mL
合成方法 Fmoc (不适用HF裂解)
温度传感器 原位光纤
试剂转移 手动或真空泵
搅拌方式 磁力搅拌
电源 240V/50 Hz
尺寸 (56cm宽 x 42.5cm 长x 25cm高)
专利 US Patents 6648659, 5459302, 660792082

红细胞裂解液(1×)

红细胞裂解液(1×)描述浓度使用方法储存/保存方法注意事项别名外观

产品描述
描述

       本品红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer),也称为ACK Lysis Buffer,是一种从人,大小鼠等哺乳动物的新鲜血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。经配方优化,使其在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其他有细胞核的细胞。通常情况下,使用本品可获得样品中全部白细胞的80%以上,且能保证细胞活性不受影响。
        本品的主要成分是氯化铵,即用型溶液,使用极其方便,能快速有效的裂解红细胞,富集分离白细胞。另外,本品是无菌溶液,分离得到的细胞样品可直接用于后续的原代细胞培养、细胞融合、流式分选,还可直接用于核酸或蛋白的提取以及各种常规的分析和检测。
        本产品是利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的。本产品经无菌处理,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
        本裂解液为无菌产品,分离细胞用于细胞培养时请注意无菌操作。

浓度
使用方法
1、在血液样品中加入3倍体积红细胞裂解液(例如,300μl血液加入900μl红细胞裂解液),颠倒混匀,室温或4ºC放置5min,期间再颠倒混匀几次。
2、10000rpm离心1min(若是离心机最高转速不允许,可用3000rpm离心5min),吸去红色上清。建议4ºC离心,效果更佳。
注意:如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2,3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续实验。
3、用适当的缓冲液(如PBS,pH 7.2~7.4)清洗1~2次。
4、离心后留下白细胞沉淀进行后续的操作。
储存/保存方法
室温保存,有效期3个月;2-8℃保存,有效期12个月。
注意事项
1、本品主要成分为氯化铵,不适于裂解有细胞核红细胞,如鸟类,禽类,爬行动物、鱼类等的红细胞。
2、为了提取到最佳的核酸或蛋白,建议使用新鲜血液或保存时间少于7天的血液。若产生血块,需先将其去除。尽量采用抗凝管收集血液样本。
3、通常情况下,血液样品与红细胞裂解液按1:3比例进行裂解,对一些特殊病例如白血病、红细胞增多症等采集的血液,建议采用1:4或更高比例裂解以保证结果。
4、本品适用于从1μl到10ml的血液样品中进行红细胞裂解,富集白细胞。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
基本信息
别名
Red Blood Cell Lysis Buffer; RBC Lysis Buffer; ACK Lysis Buffer
外观
溶液

外泌体专用裂解液

外泌体专用裂解液货号: JP9587

产品描述
描述
        Exosome(外泌体)是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小襄泡,具有典型的脂质双分子层结构,存在于 细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中。Exosome携带有多种蛋白质、 脂类、 DNA和RNA等重要信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用,更有望成为多种疾病的早期 诊断标志物。 
        外泌体专用裂解液针对外泌体样本研发,能够高效的裂解外泌体蛋白。裂解液中含有蛋白酶抑制剂,有效 抑制蛋白降解,适合样本裂解后进行BCA检测,Western Blot等实验。本试剂含有高浓度的去垢剂,不适合 Bradford法测定蛋白浓度。 
使用方法
1、实验前请将裂解液置于2 ~ 8℃融化,冰上备用。 
2、外泌体重悬液按照1:1的体积比加入裂解液,轻轻吹打混匀,置于冰上裂解10min。 
3、4℃,12000×g离心5min取上清,用BCA法测定蛋白浓度或进行Western Blot等后续实验。 
储存/保存方法
-20℃保存,有效期12个月。
注意事项

1、本产品含有蛋白酶抑制剂,请分装保存,避免反复冻融。
2、裂解样品需要在冰上或是4°C进行。
3、裂解后蛋白浓度应小于2ug/uL,以保证裂解充分。
4、为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

红细胞裂解液(10×)

红细胞裂解液(10×)描述浓度使用方法储存/保存方法注意事项别名外观

产品描述
描述

        在生物科研领域,经常需要去除红细胞。去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer 、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey’s Lysis Buffer 。红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为NH4Cl 。
        爱必信提供的红细胞裂解液(10X),配方经过优化不同于ACK Lysis Buffer ,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞,效果不佳,裂解类似细胞时,不建议采用。该裂解液经过滤除菌,为10X 浓缩液,使用1×红细胞裂解液处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测,尤其适用于流式细胞检测或需要高浓度裂解液的情况。

浓度
10X
使用方法

操作步骤(仅供参考):
注意:绝大多数情况下,应使用无菌去离子水稀释红细胞裂解液(10×)至1×使用。
自备材料:胰蛋白酶,离心机,PBS,HBSS,生理盐水或血清培养液。

(一)组织细胞样本的常规操作:
1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解: 加入3-5倍细胞沉淀体积的1×红细胞裂解液,轻柔吹打混匀,裂解1-2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4°C,400-500g离心5min,弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4°C,400-500g离心2-3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1-2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤):
1、制备细胞悬液:新鲜组织经胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,制备细胞悬液,离心弃上清。
2、裂解:加入5倍细胞沉淀体积的1×红细胞裂解液,轻柔吹打混匀,裂解1-2min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。
4、离心:4°C,400-500g离心5min,弃红色上清,本离心步骤亦可在室温下操作。
5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2-4一次。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

(三)血液样本的常规操作:
1、取新鲜抗凝血,400-500g离心5min,弃红色上清。
2、裂解: 加入6-10倍细胞沉淀体积的1×红细胞裂解液,轻柔吹打混匀,裂解1-5min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。(特别提醒:对于鼠的血液,裂解1-2min已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至4-5min,并且裂解过程中轻轻摇动以促进红细胞裂解。)
3、离心:4°C,400-500g离心5min,弃红色上清。本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤: 根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4°C,400-500g离心2-3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
注意:对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液体积的ACK Lysis Buffer 进行第2步操作,并在4℃裂解4-15min。对于鼠的血液,裂解4-5min已经足够;对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。

(四)血液样本的快速操作(无需洗涤):
1、新鲜抗凝血中加入10倍体积的1×红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4-15min。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。(特别提醒:对于鼠的血液,裂解4-5min已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10min,但通常不宜超过15min,并且裂解过程中宜适当摇动以促进红细胞裂解。)
2、加入20-30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀。
3、400-500g离心5min,弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

储存/保存方法
2-8℃保存,有效期12个月。
注意事项

1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、如果经过1×红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用DEPC处理的溶液,即无需在该操作中特意去除RNase。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

基本信息
别名
Red Blood Cell Lysis Buffer; RBC Lysis Buffer, 10X
外观
溶液

单细胞裂解缓冲液酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

单细胞裂解缓冲液
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635013 10X Lysis Buffer Each ¥477 单细胞裂解缓冲液 单细胞裂解缓冲液 单细胞裂解缓冲液
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无标题文档

10X Lysis Buffer
单细胞裂解缓冲液
10X Lysis Buffer是一种单细胞裂解缓冲液。适用于SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing。
 
产品详情请点击:单细胞裂解缓冲液
 
 

页面更新:2023-12-05 13:57:12

红细胞裂解液

红细胞裂解液

货号:BL503A

规格:120ml

品牌:Biosharp

红细胞裂解液

产品编号

产品名称

规格

BL503A

红细胞裂解液

120 ml

BL503B

红细胞裂解液

500 ml

 

产品简介

红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。主要有效成分为氯化铵。不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。已经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

使用说明

对于组织细胞样品:

1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。

2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。

3400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5、洗涤1-2次:加入适量PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。可再重复1次,共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4离心效果更佳。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:

1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。

2、对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。

3、加入15-20ml PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。

4400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。

对于血液样品:

1、取新鲜抗凝血,400-500g离心5分钟,离心弃上清。

2、加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意:对于鼠的血液,裂解1-2分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至4-5分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

3 400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5、洗涤1-2次:加入适量PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。可再重复1次,共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4离心效果更佳。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意:对于微量或少量的血液样品,可在第一步中不进行离心弃上清的操作,直接在第

二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,并在室温或4裂解4-5分钟。对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤:

1、1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4-5分钟。本步骤在室温或4度操作均可。注意:对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

2、加入20-30ml PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。

3 400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意:对于常规步骤,多一步洗涤过程的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。

注意事项

1、本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。

2 如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

4保存,一年有效。室温保存,3个月有效。

货号 BL503A
规格 120ml
品牌 Biosharp
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红细胞裂解液

红细胞裂解液

货号:BL503B

规格:500ml

品牌:Biosharp

红细胞裂解液 

产品简介

红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。经过优化配方,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。主要有效成分为氯化铵。不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。已经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

使用说明

对于组织细胞样品:

1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。

2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。

3400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5、洗涤1-2次:加入适量PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。可再重复1次,共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4离心效果更佳。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:

1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。

2、对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。

3、加入15-20ml PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。

4400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。

对于血液样品:

1、取新鲜抗凝血,400-500g离心5分钟,离心弃上清。

2、加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意:对于鼠的血液,裂解1-2分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至4-5分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

3 400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5、洗涤1-2次:加入适量PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。可再重复1次,共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4离心效果更佳。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意:对于微量或少量的血液样品,可在第一步中不进行离心弃上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,并在室温或4裂解4-5分钟。对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。

对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤:

1、1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4-5分钟。本步骤在室温或4度操作均可。注意:对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。

2、加入20-30ml PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。

3 400-500g离心5分钟,弃红色上清。4离心效果更佳。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。

5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。

注意:对于常规步骤,多一步洗涤过程的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。

注意事项

1、本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。

2 如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件

4保存,一年有效。室温保存,3个月有效。

规格:500ml/瓶  6瓶/箱

货号 BL503B
规格 500ml
品牌 Biosharp
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