逆转录试剂盒（含dsDNase）

货号：BL699A

规格：100T

品牌：Biosharp

产品简介：

本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组 DNA 污染的反转录系统,5× RTMasterMix 为一管式反转录预混 Mix,含有反转录所需的多种试剂（HˉRTase、RNaseInhibitor、dNTP Mixture、Buffer）,只需加入模板 RNA 引物和水即可进行反应。试剂盒采用的反转录酶去除了 RNase H活性,且热稳定性更强,可耐受 55℃反应,提高复杂RNA模板的反转录。MasterMix 中添加了热敏双链特异性核酸酶,可在反转录过程中直接降解去除 RNA样品中残留的基因组 DNA（gDNA）污染。Oligo dT & Random Primer 单管提供,如需使用特异性引物,可直接将其替换使用。

产品组成：

组分  100T

5× RT MasterMix  400 μl

20× Oligo dT & Random Primer  100 μl

RNase free H 2 O  2×1 ml

使用方法：

1、将模板 RNA 和试剂在冰上解冻,使用前将每种溶液轻弹或者轻微涡旋振荡混匀,

简短离心以收集残留在管壁的液体到管底。

2、在 RNase free 管中冰上配制以下反应体系：

组分  体积

Total RNA/mRNA  0.1-2 μg

5× RT MasterMix  4 μl

20× Oligo dT & Random Primer 或特异性引物  1 μl

RNase free H2O  补足 20 μl

3、移液器轻轻吹打混匀,放入 PCR仪运行如下程序

快速程序  标准程序

37℃,15~30min  25℃,10min

85℃,5min  55℃,30~60min

85℃,5min

通常可选择快速程序进行反转录反应；如果模板具有复杂二级结构或高 GC 区域,使用标

准程序。

4、得到的 cDNA 产物可立即用于 qPCR 反应,或在-20℃保存,并在半年内使用；长

期存放建议分装后在-80℃保存。cDNA应避免反复冻融。

注意事项：

1、避免 RNase污染。

2、为保证反转录成功建议使用高质量的 RNA 样品。

3、5×RT MasterMix 非常粘稠,易吸附在管壁和吸头外导致损失,用前请点甩离心,

并避免吸头外壁沾附损失。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存方法：

避免反复冻融,-20 ℃保存 1年。