Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶(无甘油) #M0402L 8000 Units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶(无甘油)                              收藏

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#M0402L
8000 Units
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产品概述:

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶是嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)DNA 聚合酶 I,大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,由计算机模拟设计完成;利用核酸适配体技术,可逆结合到聚合酶上,从而抑制聚合酶在 45℃ 以下的活性。当温度高于 45℃ 时,核酸适配体会迅速从酶上脱落,无需单独的激活步骤来激活该聚合酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶具有 5´→3´ DNA 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。但和野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性。
 

产品特点

无甘油版 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶(NEB #M0538)支持冻干和自动化实验流程

可在室温条件下建立反应体系,保持扩增性能的一致性
WarmStart 技术可消除脱靶扩增,提高反应效率
相比野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段,具有更高的耐盐性和热稳定性
最佳反应温度:60 – 72℃
 

产品性能

 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶(无甘油)在 LAMP 实验中对人 DNA 靶标检测效果与含甘油版酶相同。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶(无甘油)                               #M0402L 8000 Units
 使用 NEB #M0538 进行 LAMP(DNA 靶标)实验:Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶或 NEB #M0402:Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶(无甘油)。反应加入 1X LAMP 引物和 0.5X LAMP 荧光染料后,分别加入三个数量级的总 Jurkat DNA(10 ng – 0.1 ng),每个样品做 4 个重复,96 孔板,反应体系为 25 µl。同时设置了无模板的对照反应(NTC)。反应混合物在 65℃ 温育 40 分钟,使用实时热循环仪(Bio-Rad® CFX96)中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表单个反应的荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外,每个样品都检测到所有四个重复(注:如果各重复的检测时间相似,则检测点重叠)。总体而言,含甘油版酶(NEB #M0538)与无甘油版酶(NEB #M0402)在各个模板起始量下都呈现出相似表现。无模板对照均无扩增。

Bst DNA 聚合酶,大片段 #M0275L 8,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Bst DNA 聚合酶,大片段                              收藏

Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units

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#M0275L
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#M0275M
(高浓度15X)8,000 units
3,389.00

#M0275S
1,600 units
849.00

#M0275V
800 units
469.00

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特性

 DNA 等温扩增
 富含 GC 区域的 DNA 测序
 纳克级含量 DNA 模板的快速测序

 可用于要求嗜温链置换的实验 

Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units

概述

Bst DNA 聚合酶,大片段是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分,具有 5´→3´ DNA 聚合酶活性,但
缺失 5´→3´ 核酸外切酶活性。

来源

来源于 E.coli 菌株,此菌株含有来自 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的基因,该基因缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。应用基因重组技术,将麦芽糖结合蛋白(MBP)基因与该基因融合表达,融合蛋白经纯化后再在体外切除掉 MBP,纯化后的聚合酶不含 MBP。

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。

热失活

80℃ 20 分钟。 

使用注意

建议反应温度不要超过 70℃。Bst DNA 聚合酶,大片段不能用于热循环测序或 PCR。

参考文献

 

Bst DNA 聚合酶,全长 #M0328S 500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Bst DNA 聚合酶,全长                              收藏

Bst DNA 聚合酶,全长                                  #M0328S 500 units Bst DNA 聚合酶,全长                                  #M0328S 500 units Bst DNA 聚合酶,全长                                  #M0328S 500 units

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#M0328S
500 units
849.00

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特性

 DNA 等温扩增
 引物延伸
 
Bst DNA 聚合酶,全长                                  #M0328S 500 units

概述

全长的 Bst DNA 聚合酶来源于 Bacillus stearothermophilus,它具有 5´→3´ 聚合酶活性和双链特异的 5´→3´ 核酸外切酶活性,但缺失 3´→5´ 核酸外切酶活性。 

来源

携带有 Bacillus stearothermophilus 基因的 E. coli 菌株。 

浓度

5,000 units/ml。

热失活

80℃ 20 分钟。

使用注意

 

建议反应温度不要超过 70℃。Bst DNA 聚合酶,全长不能用于热循环测序或 PCR。

参考文献

Bst 3.0 DNA 聚合酶 #M0374L 8,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Bst 3.0 DNA 聚合酶                              收藏

Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units

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#M0374L
8,000 units
3,529.00

#M0374M
高浓度(15X)8,000 units
3,529.00

#M0374S
1,600 units
889.00

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特性

Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units 

Bst 3.0 DNA 聚合酶                                    #M0374L 8,000 units

概述

 Bst 3.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,改进了等温扩增性能及反转录活性的大片段同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 3.0 DNA 聚合酶具有对 DNA 或 RNA 模板的 5´ →3´ 聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 和 3´ →5´ 核酸外切酶活性。与 Bst DNA 聚合酶相比,Bst 3.0 DNA 聚合酶不仅具有在高浓度  DNA  扩增抑制剂中扩增的强大性能,而且反转录酶的活性也显著增强。

来源

 来源于携带重组 Bst 3.0 基因的 E. coli 菌株。

反应缓冲液

 1X 等温扩增缓冲液 II [20 mM Tris-HCl(pH 8.8 @ 25℃),150 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM MgS04,0.1% Tween-20]。65℃ 条件下反应。

热失活:80℃ 5 分钟。

单位定义:

 1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶物所需的酶量。

浓度:

 8,000 和 120,000 units/ml。

使用注意:

 建议反应温度不超过 72℃。Bst DNA 聚合酶不能用于 PCR 或需热变性的反应。Bst 3.0 DNA聚合酶不具有 3´ →5´ 核酸外切酶活性。

Bst 2.0 DNA 聚合酶 #M0537L 8,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Bst 2.0 DNA 聚合酶                              收藏

Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units

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#M0537L
8,000 units
3,519.00

#M0537M
高浓度(15X)8,000 units
3,519.00

#M0537S
1,600 units
879.00

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WarmStart® RTx 反转录酶

 
 

特性

 最佳 DNA 等温扩增(LAMP)性能
 快速聚合
 反应条件灵活,比 Bst DNA 聚合酶具有更高的盐耐受力
 6 0 – 7 2℃ 之间具有最佳反应性能(WarmStart)
 用 dUTP 替换 dTTP 对其几乎无影响
 WarmStart DNA 聚合酶可以在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率 
Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units

概述

Bst 2.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶在等温聚合酶中是独有的。像“热启动”PCR 聚合酶一样,这种特性在低于最适反应温度下可以抑制酶活性。因此,实验操作可以在室温下进行,并可以消除非特异性反应产物,提高反应效率。

NEB 的 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶利用了核酸适配体技术。适配体是一种经过广泛修饰的特定核苷酸,通过非共价键作用结合到聚合酶上,从而在非许可温度下抑制酶活性(<50℃)。另外,Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶不需要单独的激活步骤。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶可以消除在室温条件下建立反应时,产生的非特异性的扩增,而传统的 Bst DNA 聚合酶或同源物可以掺入非模板序列核苷酸。

Bst 2.0 DNA 聚合酶                                    #M0537L 8,000 units 

Bst 2.0 WarmStart 的优势:无论刚建立反应(实线)或 25℃ 温育 2 小时后,都能使 LAMP 实验在相同的时间点迅速启动反应。没有 Bst 2.0 WarmStart 的保护,在室温条件下温育的 LAMP 实验结果不一致。Bst 2.0 WarmStart 让扩增结果更均一,可以室温和高通量建立反应。

 

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有诱导启动子,可表达 Bst 2.0 DNA 聚合酶蛋白。 

反应缓冲液

1X 等温扩增缓冲液[20 mM Tris-HCl
(pH 8.8 @ 25℃),50 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM
MgS04,0.1% Tween-20]。65℃ 条件下反应。
热失活:80℃ 20 分钟。

单位定义

1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。

 

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。 

热失活

80℃ 20 分钟。 

使用注意

Bst 2.0 DNA 聚合酶不具有 3´→5´ 核酸外切酶活性。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶的反应温度可以为 60-72℃。Bst 2.0 DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。 

Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶 #M0538L 8,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                              收藏

Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#M0538L
8,000 units
3,859.00

#M0538M
高浓度(15X)8,000 units
3,859.00

#M0538S
1,600 units
969.00

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相关产品

WarmStart® RTx 反转录酶

特性

 最佳 DNA 等温扩增(LAMP)性能
 快速聚合
 反应条件灵活,比 Bst DNA 聚合酶具有更高的盐耐受力
 6 0 – 7 2℃ 之间具有最佳反应性能(WarmStart)
 用 dUTP 替换 dTTP 对其几乎无影响

 WarmStart DNA 聚合酶可以在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率  

Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units

概述

Bst 2.0 DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶 I,大片段(Bst DNA 聚合酶,大片段)的同源物,并由电脑模拟设计完成。Bst 2.0 DNA 聚合酶具有 5´→3´ 的聚合酶活性和强链置换活性,但没有 5´→3´ 核酸外切酶活性。和野生型 Bst DNA 聚合酶,大片段相比,该酶可有效提高扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶在等温聚合酶中是独有的。像“热启动”PCR 聚合酶一样,这种特性在低于最适反应温度下可以抑制酶活性。因此,实验操作可以在室温下进行,并可以消除非特异性反应产物,提高反应效率。

NEB 的 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶利用了核酸适配体技术。适配体是一种经过广泛修饰的特定核苷酸,通过非共价键作用结合到聚合酶上,从而在非许可温度下抑制酶活性(<50℃)。另外,Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶不需要单独的激活步骤。

Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶可以消除在室温条件下建立反应时,产生的非特异性的扩增,而传统的 Bst DNA 聚合酶或同源物可以掺入非模板序列核苷酸。

Bst 2.0 WarmStart® DNA 聚合酶                                     #M0538L 8,000 units
Bst 2.0 WarmStart 的优势:无论刚建立反应(实线)或 25℃ 温育 2 小时后,都能使 LAMP 实验在相同的时间点迅速启动反应。没有 Bst 2.0 WarmStart 的保护,在室温条件下温育的 LAMP 实验结果不一致。Bst 2.0 WarmStart 让扩增结果更均一,可以室温和高通量建立反应。 

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有诱导启动子,可表达 Bst 2.0 DNA 聚合酶蛋白。  

反应缓冲液

1X 等温扩增缓冲液

[20 mM Tris-HCl (pH 8.8 @ 25℃),50 mM KCl,10 mM (NH4)2S04,2 mM MgS04,0.1% Tween-20]。  

单位定义

1 单位指 65℃ 条件下反应 30 分钟,能使 25 nmol 的 dNTPs 掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。 

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。  

热失活

80℃ 20 分钟。  

使用注意

Bst 2.0 DNA 聚合酶不具有 3´→5´ 核酸外切酶活性。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶的反应温度可以为 60-72℃。Bst 2.0 DNA 聚合酶不能用于热循环测序或 PCR。  

链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

供货周期 一个月以上 应用领域 生物产业

Bst DNA Polymerase​
链置换酶
◆产品说明
  本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性,是一款自动从模板双链DNA的氢键解离,然后后合成新DNA链的酶。由于其特性,耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离,即可在恒定温度下合成DNA,且合成不受DNA二级结构的抑制。

Bst DNA Polymerase链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

链置换酶

 

 

◆产品说明

 

  本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性,是一款自动从模板双链DNA的氢键解离,然后后合成新DNA链的酶。由于其特性,耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离,即可在恒定温度下合成DNA,且合成不受DNA二级结构的抑制。

 

 

特点

 

●  具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性

●  可在恒定温度下合成DNA

●  适用于合成GC含量高的DNA链

●  合成不受DNA二级结构抑制

 

 

应用

 

●  利用链置换活性的应用(等温基因扩增法等)

 

 

理想反应温度

60°C~65°C

失活时间*1

80°C、5分钟

*1 将酶原液直接热变性时的失活温度

 

 

来源

嗜热脂肪芽孢杆菌

活性

8 units/μL

单位定义

1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板,在65°C,30分钟的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的酶量。

储存液成分

10 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5), 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L 

 EDTA, 50% 丙三醇

酶反应条件

随酶附带10×的酶反应缓冲液(0.5 mL×1)。如反应总体积为50 μL,添加5 μL的酶反应缓冲液

 

 

◆产品组成

 

Bst DNA Polymerase(1,600 units)

 

产品组分

容量

保存

Bst DNA Polymerase(8units/μL)

200微升×1

-20°C

10× Bst Reaction Buffer(80mmol/L Mg2+

500微升×1

-20°C

 

 

◆应用实例

 

实验案例1  LAMP法中的运用

 

LAMP法 反应条件

 

 链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

  3.0% Agarose 21

  TAE凝胶电泳

  EtBr染色

 

  M:Gene Ladder Wide 1

  1:A 公司Bst DNA Polymerase

  2:本公司Bst DNA Polymerase

 

 Candidatus Liberibacter asiaticus DNA

1 × 106copies

 FIP*

40pmol

 BIP*

40pmol

 F3 Primer*

5pmol

 B3 Primer*

5pmol

 Loop Primer F*

20pmol

 Loop Primer B*

20pmol

 dNTPs Mixture

1.4mM each

 10 × Bst Reaction Buffer

2.5μL

 Bst DNA Polymerase

8units

 总计

25μL

 

链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

反应

 

 65°C

 60分钟

 

*引物序列

 

FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'

BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'

F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'

B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'

Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'

Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'

 

 

实验案例2  RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与理想反应温度

 

链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

 

RCA法 反应溶液组成

 

 M13mp18 single strand DNA

40ng

 Universal primer

50mM

 dNTPs Mixture

1.4mM each

 Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)

20mM

 KCl

10mM

 (NH4)2SO4

10mM

 MgSO4

8mM

 Tween 20

0.10%

 Betaine

0.8M

 Bst DNA Polymerase

4units

 总计

20μL

 

链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

反应条件

 

 各个温度下

 30分钟

 

结果

 

链置换酶 Bst DNA Polymerase小分子与天然产物-wako富士胶片和光

 

条带

 

M:Gene Ladder Wide 1 

D:模板 DNA (M13mp8 single strand)

 

引物序列

 

5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'

 

电泳条件

 

0.7% Agarose S/TAE凝胶电泳

EtBr染色

使用不含SDS的上样缓冲液

 

备注

 

  本实验为比较两种Bst DNA Polymerase,使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的缓冲液时,须进行预实验探究反应体系。

 

 

◆相关信息

 

备注

 

●  本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。

●  检测柑橘黄龙病菌的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机

●  构九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术,在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技

●  术开发”中开发的产品。

 

许可

 

●  LAMP法由荣研化学株式会社持有专.利权。

 

 

◆产品列表

 

产品编号

产品名称

包装

311-07481

Bst DNA Polymerase

1600units

 

 

◆相关产品

 

产品编号

产品名称

包装

319-07281

Csa DNA Polymerase

1600units

319-07301

96-7 DNA Polymerase

1600units

312-07271

dNTPs Mixture(25mM each)

400微升

 

 

富士胶片和光(广州)贸易有限公司是日本富士胶片和光纯药株式会社(FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation,以下称”富士胶片和光”)在中国的子公司,主营富士胶片和光品牌试剂产品,囊括合成与材料、分析、培养、生命科学、药品生产与品质管理领域。和光纯药工业株式会社(前武田药品工业株式会社)成立于1922年,2017年被富士胶片集团全面收购而成为集团成员之一。富士胶片和光是日本的试剂企业,也是优质的试剂供应商,在美国、欧洲和中国都设有分公司。自成立以来,一直致力于高品质的试剂生产与开发,并获得ISO9001,ISO/IEC17025,ISO14000等(部分)多项认证。

通过对本次收购,富士胶片集团将充分发挥其在胶片领域积累的化学合成、纳米、生产等技术,在医疗健康事业、高性能材料事业两个核心业务中实现协同增效作用。尤其是医疗健康事业,在颇具市场潜力的再生医学、生物制药等领域都将产生巨大的协同增效作用。

富士胶片和光所供应的FUJIFILM Wako品牌试剂产品超过50,000多种,涉及生命科学、分析化学、有机、无机化学、生物工程、高纯度及认证标准品、食品、医药、环境分析、疾病和有效治疗研究、再生医疗研究、天然提取物、中药研究等,从基础研究至关乎人类健康的前沿的生命科学研究都有相关产品。

随着富士胶片集团对生命科学领域的更大重视和投入,今后富士胶片和光将继续为中国客户提供更多前沿、品质可靠的产品。