耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

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耐热型反转录酶PrimeScript III Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara TCH013 PrimeScript III Reverse Transcriptase 2,000 U ¥351 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase
Takara TCH004 PrimeScript III Reverse Transcriptase 10,000 U ¥1,500
¥900
耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase
 
耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase
耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase  
耐热型反转录酶PrimeScript™ III Reverse Transcriptase
 
■ 制品内容 (Code No.: TCH004)
PrimeScript™ III Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript III Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript™ III Reverse Transcriptase是一种经基因工程改良的M-MLV(Moloney Murine Leukemia Virus)反转录酶。该酶在保留PrimeScript系列RTase的高特异性、高灵敏度和高延伸性等优点的同时,相对于PrimeScript RTase具有更好的热稳定性,可在更高的温度下进行反应(~55℃),更适用于复杂二级结构RNA起始的cDNA合成,具有更好的高GC含量target RNA反转录效率和更好的综合性能。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建及RT-LAMP等。
 
保存
-20℃。
 
起源
E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.
 
活性定义
以poly (rA) ·oligo (dT)12-18 为模板/引物,在37℃的条件下,10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
用途
1. 1st-Strand cDNA的合成。
2. cDNA Probe的制备。
3. RT-PCR。
4. RT-qPCR。
5. RT-LAMP。
 
 

页面更新:2023-10-08 16:10:06

高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

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高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R023A PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,516 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
Takara R023B (A × 4) PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥5,456 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
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高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量*1)
PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl
5×PrimeScript II Buffer 200 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 100 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
PrimeSTAR GXL for RT-PCR 100 μl
5×PrimeSTAR GXL Buffer 500 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1ml
   
*1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl,2 Step RT-PCR时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增 (RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript II High Fidelity RT-PCR Kit是一种对长链RNA及富含GC序列的RNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的PrimeScript II反转录酶是改良型的PrimeScript RTase,可在合成长链cDNA时发挥效力,同时PCR时使用了对长链及富含GC序列的cDNA扩增时具有高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR GXL DNA Polymerase。因PrimeScript II RTase可很好地抑制由于引物错配引起的非特异性扩增,即使使用高浓度的Oligo dT Primer进行反转录反应也不会导致cDNA合成时的阻害作用,因此使用高浓度的RNA作为模板也可进行良好的反转录反应。
本试剂盒中使用PrimeScript II RTase与RNase Inhibitor的混合型PrimeScript II RT Enzyme Mix。另外,PrimeSTAR GXL DNA Polymerase克服了以往的高保真酶由于核酸浓度过高而存在的反应阻害性,在高浓度核酸存在条件下也能发挥其效力,可以在更宽广的RNA模板范围内获得cDNA扩增产物。 本试剂盒具有以下优点:
1. 能够从长链RNA及富含GC序列的RNA中获得错配率很低的cDNA扩增产物。
2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广,便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且,也可以进行1 Step RT-PCR反应。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 6 mers Pd (N)6
Oligo dT Primer Takara独自开发的dT区域的序列
Control F-1 Primer 5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer 5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit
图1. Control RNA:使用Control Primer时所能扩增的DNA片段
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、dNTP Mixture等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for RT-PCR等酶类产品时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
4. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2023-11-01 16:22:38

MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

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MMLV反转录酶PrimeScript Reverse Transcriptase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2680Q PrimeScript Reverse Transcriptase 2,000 U ¥279 MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680A PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U ¥1,197 MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680B (A × 4) PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U × 4 ¥4,290 MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
Takara 2680C (A × 10) PrimeScript Reverse Transcriptase 10,000 U × 10 ¥10,128 MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
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MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase  
MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
 
 
■ 制品内容 (Code No.: 2680A)
PrimeScript Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U
5X PrimeScript Buffer 500 μl
 
■ 制品说明
PrimeScript Reverse Transcriptase是Takara公司依据M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)来源的RTase开发的一种反转录酶。本酶具有很强的延伸能力,能够有效地合成1st-strand cDNA,即使对有复杂二级结构的RNA,在42℃条件下也能得到良好的反应效果,无需进行高温反转录反应,高温的反转录反应会导致RNA的降解。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建等。
了解PrimeScript系列产品更多信息,请点击:高性能的PrimeScript系列反转录试剂
 
保存
-20℃。
 
起源
E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.
 
活性定义
以poly (rA)·oligo (dT)12-18 为模板/引物,在37℃的条件下,10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
用途
1. 1st-Strand cDNA的合成。
2. cDNA Probe的制备。
3. RT-PCR。
 
 

页面更新:2024-01-25 15:46:40

RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

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RT-PCR试剂盒PrimeScript RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR014A PrimeScript RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,299 RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
Takara RR014B (A × 4) PrimeScript RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥4,682 RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
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RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (Code No. RR014A ; 50 次量*1)
PrimeScript RTase (for 2 Step) 25 μl
5 × PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 150 μl
Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl
Random 6 mers (20 μM) 50 μl
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 25 μl
10 × PCR BufferⅡ 250 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 1 ml
 
*1 反转录反应20 μl 、PCR反应50 μl体系时可使用50次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
 
■ 制品说明
PCR (Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应) 是一种使用两条引物在目的DNA序列两侧扩增特异性DNA片段的过程。它是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法,但RNA不能直接被扩增。经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript RT-PCR Kit是具有良好的延伸性能与高扩增效率的2 Step RT-PCR试剂盒。反转录反应使用了Takara Bio Inc.特别开发的M-MLV由来的新型反转录酶PrimeScript RTase;PCR反应使用了扩增性能良好的Hot Start 型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS。本试剂盒具有以下优点:
1. 进行高效的RT-PCR扩增。
2. 在标准的RNA反转录反应温度 (42℃) 下,便可使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸,可以避免RNA在高温条件下的降解。
3. 能有效抑制非特异性的PCR扩增。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需的全部试剂。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 6 mers
       pd (N)6
Oligo dT Primer
       Takara Bio特别设计的dT区域*
Control F-1 Primer
       5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer
       5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
* 该序列和TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver. 3.0 (Code No. : RR019A/B) 的Oligo dT Adaptor Primer不同,不含有与M13 Primer M4匹配的序列。
 
■ Positive Control RNA
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。
 
RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
图1. Positive Control RNA:使用Control Primer可以扩增462 bp的DNA片段
 
■ 保存
-20℃。
 
■ RNA PCR 的原理
PrimeScript RT-PCR Kit首先用PrimeScript RTase将RNA合成cDNA,再取一部分1st strand cDNA作为模板,由TaKaRa Ex Taq HS进行PCR扩增。将RNA反转录成cDNA的引物可以使用Random 6 mers、Oligo dT Primer或特异性下游引物。
 
RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
图2. PrimeScript RT-PCR Kit原理图
 
 
 
RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
图3. PrimeScript RT-PCR Kit 的操作流程
 
■ 特点
RNA模板
      适用于所有RNA
扩增片段大小
      ~12 kb
反转录酶
      PrimeScript RTase (反转录反应最适温度42℃)
DNA Polymerase
      TaKaRa Ex Taq HS
RNase Inhibitor
      Kit中含有
合成第一条cDNA链的引物
      Random 6 mers、Oligo dT Primer和特异性下游引物
 
■ 反转录反应时Primer的选择
反转录引物的选择,应结合实验的具体情况,选择以下三种引物,即:Random 6 mers、Oligo dT Primer或特异性下游引物。对没有发夹结构的短链mRNA,上述三种引物都可以使用;一般情况下的反转录引物的选择请参照以下说明。
Random 6 mers
  适用于长的或具有Hairpin构造的RNA。包括rRNA、mRNA、tRNA等在内的所有RNA的反转录反应都可使用本引物。
Oligo dT Primer
  适用于具有PolyA Tail的RNA。(注意:原核生物的RNA、真核生物的rRNA、tRNA以及某些种类的真核生物的mRNA等不具有PolyA Tail)。
特异性下游引物
(PCR时的下游引物)
  必须与模板序列互补,需了解Target序列。
 
■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 用PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、TaKaRa Ex Taq HS等酶类时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
4. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头,以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2023-11-01 16:21:58

双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

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双链cDNA合成试剂盒PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6111A PrimeScript Double Strand cDNA Synthesis Kit 10 Rxns ¥1,629 双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit 双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit 双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
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■ 制品内容 (10 次量)
PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl
Oligo(dT)18 Primer (1 μg/μl) 20 μl
Random Primer (9mer) (0.3 μg/μl) 20 μl
5 × 1st Strand Synthesis Buffer 40 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 40 μl
E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 20 μl
E. coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 20 μl
5 × 2nd Strand Synthesis Buffer 300 μl
T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 40 μl
RNase free dH2O 600 μl × 2
Control RNA (1 μg/μl)* 5 μl
 
*【Control RNA】
本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段,其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。Control RNA (约1.4 kb) 是带有30个A碱基的具有poly (A)+尾的RNA。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中,如果确实为全长的cDNA,那这种质粒便可获得四环素抗性。
 
■ 制品说明
以原核细胞或者真核细胞的mRNA为模板合成cDNA后再进行cDNA的克隆,是分子生物学研究中的一种重要手段。利用这一技术可以容易地进行基因的构造解析和目的蛋白质的表达研究等。
一般来说,cDNA的合成以及cDNA文库的利用方法是:在合成与目的mRNA互补的双链cDNA后,将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组,再将重组体导入细菌或真核细胞内进行复制、扩增cDNA,然后再对cDNA进行解析,或者再进一步进行体外转录或体外翻译等。
本试剂盒主要以来自植物和动物的poly (A)+RNA合成双链DNA 。
本试剂盒主要是以Gubler-Hoffman法为基础构建的,其原理见图1、图2,简要说明如下:
1. 在PrimeScript RTase的作用下,利用Oligo(dT)18 Primer或者Random Primer合成cDNA的第一条链 。
2. 使用E. coli RNase H使DNA-RNA杂合体中的RNA链形成单链切口 (Nick) 。在E. coli DNA Polymerase I 与E. coli DNA Ligase的作用下,RNA链被DNA链置换,合成cDNA的第二条链。
3. 使用T4 DNA Polymerase使双链cDNA片段末端平滑。
 
■ cDNA合成原理图
 
双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图1 使用Oligo(dT)18 Primer时的cDNA合成
 
 
双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
图2 使用Random Primer时的cDNA合成
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Troubleshooting
如果实验不能正常进行,请按照说明书内容确认实验操作,检验以下几点:
1. Control RNA的使用
本试剂盒中的Control RNA (pSP Tet3 Poly(A)+ mRNA) 可以用于对照实验,并确认1st Strand cDNA或2nd Strand cDNA的合成反应是否顺利进行。
2. mRNA的纯度检测
为了能够获得更高的cDNA合成效率,尽可能使用完整的mRNA是非常重要的。在进行cDNA合成反应前,可以通过测定260 nm和280 nm的吸光度 (A260/A280在1.8~2.1是理想值) ,或使用琼脂糖凝胶电泳法对RNA的纯度进行检测。
3. RNase的污染
实验时要注意一定不能在mRNA的样品中混入RNase。实验用的器具、试剂等应尽可能进行高温灭菌处理。操作过程要佩戴手套。
 
 

页面更新:2023-12-01 16:12:01

cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

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cDNA合成试剂PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6210A PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns ¥975
¥549
cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Takara 6210B (A × 4) PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns x 4 ¥3,510
¥1975
cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit

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cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit  
cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量)cDNA合成试剂PrimeScript™ II 1st Strand cDNA Synthesis Kit
PrimeScript II RTase (200 U/μl) 50 μl
5×PrimeScript II Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (50 μM) 100 μl
RNase Free H2O 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是使用PrimeScript II RTase从Total RNA或Poly (A)+ RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒。含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。
以结构复杂的RNA或长链RNA为模板进行cDNA合成时,cDNA合成受到抑制的主要原因是RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。并且,由于反转录酶的错配引起的非特异性延伸,对RT-PCR或全长cDNA的合成非常不利。PrimeScript II RTase是对PrimeScript RTase进行进一步改良的反转录酶,本反转录酶可以很好地抑制RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。
本制品使用了PrimeScript II RTase,利用Oligo dT从PolyA开始进行延伸反应,使用标准反转录温度42℃,不仅能维持PrimeScript RTase原有的卓越的cDNA合成效率和cDNA合成速度,同时可以合成本底低、纯度高、完整性好的cDNA。另外,反转录反应液配制时所产生的非特异性延伸是抑制cDNA合成的主要原因,本制品能有效控制这一现象。反应液配制后,冰上放置直至反转录反应开始,不会发生抑制cDNA合成的现象。
合成的1st Strand cDNA可广泛应用于2nd Strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增等。特别适用于全长cDNA文库制作、高纯度全长cDNA合成等。
了解PrimeScript系列产品更多信息,请点击:高性能的PrimeScript系列反转录试剂
 
■ 保存
-20℃。
 
 

页面更新:2023-12-19 09:46:11

定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

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定量PCR专用反转录试剂PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR047Q PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 10 Rxns ¥271 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
Takara RR047A PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 100 Rxns ¥1,600
¥650
定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
Takara RR047B (A × 4) PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 100 Rxns × 4 ¥6,080 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日 ,一次性订购RR047A≥10包,每包仅需600元。

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定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) 定量PCR专用反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR047A: 20 μl反应×100次量)
1. gDNA Eraser 100 μl
2. 5X gDNA Eraser Buffer*1
200 μl
3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl
4. 5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)*3 400 μl
5. RT Primer Mix*4 400 μl
6. RNase Free dH2O 1 ml×2
7. EASY Dilution (for Real Time PCR)*5 1 ml
 
*1 5X gDNA Eraser Buffer在反转录反应前使用,请务必进行基因组DNA的除去反应。
*2 含有RNase Inhibitor。
*3 含有dNTP Mixture。
*4 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*5 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板cDNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) (Code No. 9160/9160Q) 也可以单独购买。
注意:EASY Dilution (for Real Time PCR) 请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
为了准确地进行基因表达量分析,必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件,但Total RNA中常常混有基因组DNA,并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增,因此会造成解析结果不准确。为了避免这种情况发生,通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上,使基因组DNA得不到扩增。但是,此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因,同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。在这种情况下,我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理,以除去残存的基因组DNA。而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作,同时会造成RNA的降解和损失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser,通过42℃,2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分,经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA,因此,20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA合成的全过程。
使用本制品合成的cDNA适用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的,选择与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)*、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 组合使用。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 含有去除基因组DNA的gDNA Eraser,只需2 min即可除去基因组DNA。
2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反应用模板cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 反转录引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix,可以均匀合成样品中的各种cDNA。
4. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系,可以根据分析方法选择体系。
TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法区别如下:
(1) 反转录反应中RT Primer Mix的用量。
(2) 反转录反应中总RNA的用量。
5. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR) ,将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1.使用本制品合成的cDNA与TB Green关联制品组合使用时,建议使用:
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
以上制品与本制品组合使用,可以得到可信度高的结果。
本制品与TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 组合使用时,有时反应性能不好,不推荐使用。
2. 当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
3. gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。
4. 5X gDNA Eraser Buffer和5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)在使用前需Vortex振荡混匀,轻轻离心后使用。
5. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
 
 

页面更新:2023-08-10 10:26:45

一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

一链cDNA合成试剂盒PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6110A PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns ¥896
¥757
一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Takara 6110B (A × 4) PrimeScript 1st Strand cDNA Synthesis Kit 50 Rxns x 4 ¥3,226
¥2728
一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit 一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit  
一链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ 1st Strand cDNA Synthesis Kit
 
 
■ 制品内容 (50 次量)
PrimeScript RTase (200 U/ μl) 50 μl
5X PrimeScript Buffer 200 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
Random 6 mers (50 μM) 100 μl
RNase free dH2O 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是使用PrimeScript RTase从Total RNA或PolyA+RNA合成1st Strand cDNA的试剂盒,含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。 PrimeScript Reverse Transcriptase是一种MMLV (Moloney Murine Leukemia virus) 由来的新型反转录酶。本酶能够有效合成长达12 kb的1st Strand cDNA,即使对富含GC的片段或者具有复杂二级结构的RNA,在常规的反转录温度42℃条件下也能得到良好的反转录效果,无需进行高温反转录反应 (高温反转录反应会导致RNA的降解)。合成的1st Strand cDNA 可广泛应用于2nd Strand合成、杂交、PCR扩增、Real Time PCR反应等。
了解PrimeScript系列产品更多信息,请点击:高性能的PrimeScript系列反转录试剂
 
■ 各种引物的序列
引物名称 引物序列
       Random 6 mers        pd(N)6
       Oligo dT Primer        Takara特别开发的dT区域的序列*
* 该序列和TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver.3.0 (Code No. RR019A/B) 的Oligo dT Adaptor Primer不同,不含有M13 Primer M4的序列。
 
■ 保存
-20℃。
 
 

页面更新:2023-12-01 15:12:40

高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R026A PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 50 Rxns ¥1,857 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
Takara R026B (A × 4) PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 50 Rxns × 4 ¥6,703 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
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高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit 高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
 
 
■ 制品内容 (Code No.: R026A)
PrimeScript II RT Enzyme Mix 50 μl
PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR 200 μl
2 × One Step High Fidelity Buffer 625 μl × 2
Control F-1 Primer*1 (20 μM) 10 μl
Control R-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl
Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl
RNase Free dH2O 625 μl × 2
   
*1 Positive Control RNA用上游引物。
*2 Positive Control RNA用下游引物。
 
高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
图1. Control RNA: 使用Control Primer时扩增的DNA片段
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增(RT-PCR),PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit是在一个反应管中连续进行反应的1 step RT-PCR用试剂盒。反转录酶使用延伸性能好且能够合成全长cDNA的PrimeScript II RTase,PCR使用准确性高且适于扩增长链及GC Rich cDNA的PrimeSTAR® GXL DNA Polymerase,这两种酶经优化后可用于1 step RT-PCR。
本试剂盒可用于宽泛浓度RNA起始的反应,在反转录反应10分钟、PCR反应延伸时间为10秒/kb的高速条件下,能够扩增难扩增的长链及GC rich等各种目的基因,可简便快速且准确地获得cDNA产物。

本试剂盒具有以下优点:
· 使用单管反应,降低污染的风险,可准确且简便地扩增RNA起始的目的基因。
· 反转录反应只需10分钟,PCR延伸时间达10秒/kb的高速反应。
· 可扩增GC rich、长链cDNA。
· 反应中total RNA的使用量范围广,易于使用。
本试剂盒含有RNA起始合成cDNA及经PCR扩增cDNA所需的全部试剂。

 
■ 保存
-20℃。
 
■ 试剂盒特点
       RNA模板   适用于所有RNA
       扩增片段大小   ~8 kb
       反转录酶   PrimeScript II RTase (使用温度45℃)
       DNA Polymerase   PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR
       RNase Inhibitor   必须使用 (PrimeScript II RT Enzyme Mix 中含有)
1st strand cDNA合成用引物   使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物)
  (不可使用 Random 6 mers 及 Oligo dT Primer)
       操作   在一个反应管中连续的进行RT-PCR反应
 
■ 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。
1. 当同时需要进行多个RT-PCR 反应时,应先配制各种试剂的混合液(Master Mix;其中包括 RNase Free dHH2O、Buffer、dNTP Mixture 等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR等酶类产品时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2 × One Step High Fidelity Buffer使用前需充分vortex后,离心备用。
4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出,使用后也应立即放入-20℃保存。
5. 为了防止Positive Control RNA分解,应尽量避免反复冻融,建议将其分成小包装后冻存。有条件的实验室最好保存于-70℃~-80℃。
6. 分装试剂时务必使用新的枪头(Tip),以防止样品间污染。
7. 本试剂盒的反转录反应使用基因特异性引物。不要使用Random Primer或Oligo-dT Primer。
 
 
 

页面更新:2023-11-01 16:33:03

Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

Premix型反转录试剂PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR036Q PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 20 Rxns ¥271 Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036A PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns ¥1,600
¥650
Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
Takara RR036B (A × 4) PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) 200 Rxns × 4 ¥6,080 Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)

*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日 ,一次性订购RR036A≥10包,每包仅需600元。

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Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR036A: 10 μl反应×200次量) Premix型反转录试剂PrimeScript™ RT Master Mix (Perfect Real Time)
5X PrimeScript RT Master Mix (for Real Time)*1 400 μl
RNase Free dH2O 1 ml ×2 支
EASY Dilution (for Real Time PCR)*2 1 ml
 
*1 含有PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer (含有Mg2+) 。
*2 制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时,由于受Microtube吸附作用等的影响,往往不能准确地进行稀释,导致实验结果精度降低。使用本制品时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买 (Code No.: 9160/9160Q)。
注意:EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用,对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
 
■ 制品说明
本制品是2 Step Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。5×PrimeScript RT Master Mix中含有定量RT-PCR的反转录反应所需的所有试剂 (PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、反应Buffer),加入模板RNA和水即可迅速进行反应。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase,与制品PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(Code No.: RR037Q/A/B) 相同,可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用模板cDNA。 本制品合成的cDNA可以用于嵌合法和探针法qPCR分析,可以根据实验目的与TB Green® Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)* 、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* 和Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 等定量试剂配合使用,能够进行高性能的基因表达分析。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)产品的名称从2017年12月下旬开始,将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化,请继续放心使用。
产品名称将随新lot的产品逐步变更,产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更,望知悉!
 
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-20℃。
 
■ 试剂盒特长
1. 制品为预先混好的Premix形式,只需加入模板RNA和水便可以开始反应。
2. 可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA,是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。
3. 使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer 2种反转录引物,可以合成适合Real Time PCR用cDNA。
4. Real-time RT PCR定量需要建立标准曲线,建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时,由于模板浓度低不稳定,因而会缩小曲线范围,结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 注意事项
1. 5X PrimeScript RT Master Mix在使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于5X PrimeScript RT Master Mix粘度高,用移液枪慢慢反复吸打充分混匀后使用。
2. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
3. 本制品中已经加入了反转录Primer(Oligo dT Primer 和Random 6 mers),如果要使用Gene Specific Primer进行反转录反应,则不能使用本制品。
 
 
Technote:
  An efficient method for quantification of human gene expression
  levels using PrimeScript reverse transcriptase
   
 
  Monitoring siRNA knockdown: Quantifying transient knockdown of
  LEDGF/p75 in docetaxel-resistant prostate cancer PC-3-DR cells
 

页面更新:2023-07-28 08:29:05