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cDNA合成试剂PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年7月21日由上海金畔生物科技有限公司

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cDNA合成试剂PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6215A	PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix	50 Rxns	￥1,545 ￥1082
Takara	6215B (A × 4)	PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix	50 Rxns x 4	￥5,562 ￥3893

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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■ 制品内容 (20 μl 反应×50次量)

5×PrimeScript IV cDNA Synthesis Mix＊1 200 μl Random 6 mers (50 μM)＊2 100 μl RNase Free H2O 1 ml × 2

*1：含有PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反应Buffer     (含Mg+2)。 *2：不含polyA的 RNA起始cDNA的合成及Real Time PCR用的cDNA的合成，RNA全部区域cDNA的     均匀合成等情况下添加至反应液中。

■ 制品说明

PrimeScript IV 1st strand cDNA Synthesis Mix是从total RNA或polyA+ RNA起始合成1st strand cDNA的试剂盒。合成1st strand cDNA所需的反转录酶PrimeScript IV RTase、RNase Inhibitor、 Oligo dT Primer、dNTP Mixture及反应Buffer已预混成premix型试剂，反应时，只需要添加模板RNA及水即可简单快速开始反应。 本制品通过添加辅助蛋白质改良了Buffer的组成，省去了以往进行反转录反应前的RNA变性操作。此外，PrimeScript IV RTase相比于以往制品，能在更短时间内合成cDNA。 通过提高耐热性使反转录反应可以在高温下进行，在使用Gene Specific Primer合成cDNA的效率和特异性的提升上发挥了重要作用。 本制品合成的1st strand cDNA适用于2nd strand cDNA合成、杂交、PCR法扩增，全长cDNA文库的制备等需要高品质全长cDNA的应用。另外，通过试剂盒中附带的Random 6 mers，可以从不含有polyA+ 的RNA起始合成cDNA，同时也适用于利用Real Time PCR方法进行基因表达分析的cDNA合成。 了解PrimeScript系列产品更多信息，请点击：高性能的PrimeScript系列反转录试剂

■ 保存

-20℃。

■ 关联资料 6215资料： 点击图片下载

页面更新：2023-12-19 09:47:53

一步法RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年7月11日由上海金畔生物科技有限公司

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一步法RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR055A	PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2	50 Rxns	￥1,350 ￥515
Takara	RR055B (A × 4)	PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2	50 Rxns × 4	￥4,858

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日

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■ 制品内容 (Code No.: RR055A)

PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 100 μl 2 × 1 Step Buffer 625 μl ×2 Control F-1 Primer (20 μM)*1 20 μl Control R-1 Primer (20 μM)*2 20 μl Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl RNase Free dH2O 625 μl ×2   *1 Positive Control RNA用上游引物。 *2 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，RT-PCR方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 本试剂盒采用了一步 (One Step) RT-PCR法。RNA→cDNA→PCR反应操作在同一反应体系中连续进行，反应中途不需添加任何试剂，降低污染风险。反转录反应使用了Takara Bio公司特别开发的新型反转录酶PrimeScript RTase。该反转录酶对具有复杂二级结构的RNA模板也具有很强的延伸能力；PCR反应使用了扩增性能优越的Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS，大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。在本试剂盒中，已将PrimeScript RTase、TaKaRa Ex Taq HS、RNase Inhibitor以及One Step RT-PCR用稳定剂等配制成了Premix型的PrimeScript 1 step Enzyme Mix；同时把反应用Buffer、dNTP以及One Step Enhancer Solution配制成了Premix型的2×1 Step Buffer的形式，使实验操作时的反应液配制更为简单方便。使用本试剂盒可进行高效的RT-PCR扩增。反转录温度可以设定为50℃，能够有效抑制非特异性扩增。另外，本试剂盒可减少由于错配和引物二聚体造成的非特异性反应。 本试剂盒中含有进行One Step RT-PCR反应用的全部试剂，可以方便有效地对RNA进行扩增分析。

■ 各种引物的序列

引物名称 各引物序列 Control F-1 Primer        5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′ Control R-1 Primer        5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 原 理

PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2可在同一反应管中连续进行由PrimeScript RTase将RNA反转录为cDNA，再由TaKaRa Ex Taq HS扩增此cDNA的RT-PCR反应。

图1. PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2原理图

■ 保存

-20℃。

■ 注意事项

1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时，应先配制至少10次量各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。

2. 使用PrimeScript 1 Step Enzyme Mix时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。

3. 2×1 Step Buffer使用前用vortex充分混匀，离心后使用。 4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放回-20℃中保存。 5. 为了防止Positive Control RNA分解，应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃～-80℃。 6. 分装试剂时务必使用新的枪头，以防止样品间污染。 7. 使用本试剂盒进行反转录反应时必须使用特异性的反转录引物，Random Primer、Oligo dT Primer不能使用。

页面更新：2023-11-01 16:22:11

MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年3月17日由上海金畔生物科技有限公司

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MMLV反转录酶PrimeScript™ Reverse Transcriptase
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	2680Q	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	2,000 U	￥279
Takara	2680A	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U	￥1,197
Takara	2680B (A × 4)	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U × 4	￥4,290
Takara	2680C (A × 10)	PrimeScript™ Reverse Transcriptase	10,000 U × 10	￥10,128

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■ 制品内容 (Code No.: 2680A)

PrimeScript™ Reverse Transcriptase (200 U/μl) 10,000 U 5X PrimeScript Buffer 500 μl

■ 制品说明

PrimeScript Reverse Transcriptase是Takara公司依据M-MLV (Moloney Murine Leukemia Virus)来源的RTase开发的一种反转录酶。本酶具有很强的延伸能力，能够有效地合成1st-strand cDNA，即使对有复杂二级结构的RNA，在42℃条件下也能得到良好的反应效果，无需进行高温反转录反应，高温的反转录反应会导致RNA的降解。本酶适合于长链cDNA的合成及高比例的全长cDNA文库的构建等。 了解PrimeScript系列产品更多信息，请点击：高性能的PrimeScript系列反转录试剂   ■ 保存 -20℃。   ■ 起源 E. coli carrying the plasmid that encodes reverse transcriptase gene.   ■ 活性定义 以poly (rA)·oligo (dT)12-18 为模板/引物，在37℃的条件下，10分钟内掺入1 nmol [3H] dTTP所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。   ■ 用途 1. 1st-Strand cDNA的合成。 2. cDNA Probe的制备。 3. RT-PCR。

页面更新：2024-01-25 15:46:40

RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年2月22日由上海金畔生物科技有限公司

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RT-PCR试剂盒PrimeScript™ RT-PCR Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR014A	PrimeScript™ RT-PCR Kit	50 Rxns	￥1,299
Takara	RR014B (A × 4)	PrimeScript™ RT-PCR Kit	50 Rxns × 4	￥4,682

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■ 制品内容 (Code No. RR014A ; 50 次量*1)

PrimeScript RTase (for 2 Step) 25 μl 5 × PrimeScript Buffer 200 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl dNTP Mixture (10 mM each) 150 μl Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl Random 6 mers (20 μM) 50 μl TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 25 μl 10 × PCR BufferⅡ 250 μl Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 20 μl RNase Free dH2O 1 ml   *1 反转录反应20 μl 、PCR反应50 μl体系时可使用50次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种使用两条引物在目的DNA序列两侧扩增特异性DNA片段的过程。它是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法，但RNA不能直接被扩增。经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 PrimeScript RT-PCR Kit是具有良好的延伸性能与高扩增效率的2 Step RT-PCR试剂盒。反转录反应使用了Takara Bio Inc.特别开发的M-MLV由来的新型反转录酶PrimeScript RTase；PCR反应使用了扩增性能良好的Hot Start 型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS。本试剂盒具有以下优点： 1. 进行高效的RT-PCR扩增。 2. 在标准的RNA反转录反应温度 (42℃) 下，便可使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸，可以避免RNA在高温条件下的降解。 3. 能有效抑制非特异性的PCR扩增。 本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需的全部试剂。

■ 各种引物的序列

引物名称 各引物序列 Random 6 mers        pd (N)6 Oligo dT Primer        Takara Bio特别设计的dT区域* Control F-1 Primer        5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′ Control R-1 Primer        5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

* 该序列和TaKaRa RNA PCR Kit (AMV) Ver. 3.0 (Code No. : RR019A/B) 的Oligo dT Adaptor Primer不同，不含有与M13 Primer M4匹配的序列。

■ Positive Control RNA

本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段，其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。

图1. Positive Control RNA：使用Control Primer可以扩增462 bp的DNA片段

■ 保存

-20℃。

■ RNA PCR 的原理

PrimeScript RT-PCR Kit首先用PrimeScript RTase将RNA合成cDNA，再取一部分1st strand cDNA作为模板，由TaKaRa Ex Taq HS进行PCR扩增。将RNA反转录成cDNA的引物可以使用Random 6 mers、Oligo dT Primer或特异性下游引物。

图2. PrimeScript RT-PCR Kit原理图

图3. PrimeScript RT-PCR Kit 的操作流程

■ 特点

RNA模板       适用于所有RNA 扩增片段大小       ～12 kb 反转录酶       PrimeScript RTase (反转录反应最适温度42℃) DNA Polymerase       TaKaRa Ex Taq HS RNase Inhibitor       Kit中含有 合成第一条cDNA链的引物       Random 6 mers、Oligo dT Primer和特异性下游引物

■ 反转录反应时Primer的选择

反转录引物的选择，应结合实验的具体情况，选择以下三种引物，即：Random 6 mers、Oligo dT Primer或特异性下游引物。对没有发夹结构的短链mRNA，上述三种引物都可以使用；一般情况下的反转录引物的选择请参照以下说明。

Random 6 mers   适用于长的或具有Hairpin构造的RNA。包括rRNA、mRNA、tRNA等在内的所有RNA的反转录反应都可使用本引物。 Oligo dT Primer   适用于具有PolyA Tail的RNA。(注意：原核生物的RNA、真核生物的rRNA、tRNA以及某些种类的真核生物的mRNA等不具有PolyA Tail)。 特异性下游引物 (PCR时的下游引物)   必须与模板序列互补，需了解Target序列。

■ 使用注意

1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。 2. 用PrimeScript RTase、RNase Inhibitor、TaKaRa Ex Taq HS等酶类时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。 3. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放入-20℃保存。 4. 为了防止Positive Control RNA分解，应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃～-80℃。 5. 分装试剂时务必使用新的枪头，以防止样品间污染。

页面更新：2023-11-01 16:21:58

双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年2月20日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

双链cDNA合成试剂盒PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	6111A	PrimeScript™ Double Strand cDNA Synthesis Kit	10 Rxns	￥1,629

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■ 制品内容 (10 次量)

PrimeScript RTase (200 U/μl) 10 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 10 μl Oligo(dT)18 Primer (1 μg/μl) 20 μl Random Primer (9mer) (0.3 μg/μl) 20 μl 5 × 1st Strand Synthesis Buffer 40 μl dNTP Mixture (10 mM each) 40 μl E. coli RNase H/E. coli DNA Ligase Mixture 20 μl E. coli DNA Polymerase I (20 U/μl) 20 μl 5 × 2nd Strand Synthesis Buffer 300 μl T4 DNA Polymerase (1 U/μl) 40 μl RNase free dH2O 600 μl × 2 Control RNA (1 μg/μl)* 5 μl   *【Control RNA】 本试剂盒中的Control RNA是以pSPTet3质粒 (质粒中的SP6启动子下游插入长约1.4 kb的pBR322来源的DNA片段，其DNA片段上含有抗四环素基因) 为模板由SP6 RNA聚合酶经体外转录而得到的。Control RNA (约1.4 kb) 是带有30个A碱基的具有poly (A)+尾的RNA。以这种RNA为模板合成的双链cDNA插入到适当的质粒载体中，如果确实为全长的cDNA，那这种质粒便可获得四环素抗性。

■ 制品说明

以原核细胞或者真核细胞的mRNA为模板合成cDNA后再进行cDNA的克隆，是分子生物学研究中的一种重要手段。利用这一技术可以容易地进行基因的构造解析和目的蛋白质的表达研究等。 一般来说，cDNA的合成以及cDNA文库的利用方法是：在合成与目的mRNA互补的双链cDNA后，将双链cDNA与细菌或病毒来源的载体进行重组，再将重组体导入细菌或真核细胞内进行复制、扩增cDNA，然后再对cDNA进行解析，或者再进一步进行体外转录或体外翻译等。 本试剂盒主要以来自植物和动物的poly (A)+RNA合成双链DNA 。 本试剂盒主要是以Gubler-Hoffman法为基础构建的，其原理见图1、图2，简要说明如下： 1. 在PrimeScript RTase的作用下，利用Oligo(dT)18 Primer或者Random Primer合成cDNA的第一条链 。 2. 使用E. coli RNase H使DNA-RNA杂合体中的RNA链形成单链切口 (Nick) 。在E. coli DNA Polymerase I 与E. coli DNA Ligase的作用下，RNA链被DNA链置换，合成cDNA的第二条链。 3. 使用T4 DNA Polymerase使双链cDNA片段末端平滑。   ■ cDNA合成原理图

图1 使用Oligo(dT)18 Primer时的cDNA合成

图2 使用Random Primer时的cDNA合成

■ 保存

-20℃。

■ Troubleshooting

如果实验不能正常进行，请按照说明书内容确认实验操作，检验以下几点： 1. Control RNA的使用 本试剂盒中的Control RNA (pSP Tet3 Poly(A)+ mRNA) 可以用于对照实验，并确认1st Strand cDNA或2nd Strand cDNA的合成反应是否顺利进行。 2. mRNA的纯度检测 为了能够获得更高的cDNA合成效率，尽可能使用完整的mRNA是非常重要的。在进行cDNA合成反应前，可以通过测定260 nm和280 nm的吸光度 (A260/A280在1.8～2.1是理想值) ，或使用琼脂糖凝胶电泳法对RNA的纯度进行检测。 3. RNase的污染 实验时要注意一定不能在mRNA的样品中混入RNase。实验用的器具、试剂等应尽可能进行高温灭菌处理。操作过程要佩戴手套。

页面更新：2023-12-01 16:12:01

反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)酶试剂盒Takara Clontech

发表于2025年1月8日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

反转录试剂PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR037Q	PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)	20 Rxns	￥271
Takara	RR037A	PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)	200 Rxns	￥1,600 ￥650
Takara	RR037B (A × 4)	PrimeScript™ RT reagent Kit (Perfect Real Time)	200 Rxns × 4	￥6,080

*红字为促销价格，促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日 ，一次性订购RR037A≥10包，每包仅需600元。

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■ 制品内容 (Code No.: RR037A)

5X PrimeScript Buffer (for Real Time)*1 400 μl PrimeScript RT Enzyme Mix I*2 100 μl Oligo dT Primer (50 μM) 100 μl Random 6 mers (100 μM) 400 μl RNase Free dH2O 1 ml EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 1 ml   *1 含有dNTP Mixture 和 Mg2+。 *2 含有RNase Inhibitor。 *3 用于制作标准曲线时梯度稀释total RNA和cDNA。EASY Dilution (for Real Time PCR) 可以将其稀释至很低浓度也能够得到准确地稀释。本制品不影响反转录和PCR反应，用其稀释后的样品可直接使用。EASY Dilution (for Real Time PCR) 也可以单独购买（Code No. 9160/9160Q）。 注意：EASY Dilution请与本公司Real Time PCR试剂组合使用，对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。

■ 制品说明

本制品是Real Time RT-PCR用的理想反转录反应试剂。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase可以在较短时间内高效合成Real Time PCR用cDNA。操作简单，适合进行高通量分析。进行2 Step Real Time RT-PCR反应时，与TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)(Code No. RR820Q/A/B)*、TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B)* ， TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)* 、 或Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 试剂配合使用，能进行高性能的基因表达分析。 本制品提供了TB Green分析法和探针分析法各自适合的反应体系，可以根据分析方法选择体系。 *：Takara嵌合法Real Time PCR（qPCR）产品的名称从2017年12月下旬开始，将逐步变更为「TB Green系列」。产品Code、性能和原有产品相比没有变化，请继续放心使用。 产品名称将随新lot的产品逐步变更，产品网页或操作说明书可能会先于产品标签变更，望知悉！   ■ 保存 -20℃。   ■ 试剂盒特长 1. 可以快速、高效合成Real Time PCR用cDNA，是进行2 Step Real Time RT-PCR反应的理想试剂。 2. 含有Oligo dT Primer和Random 6 mers两种反转录引物，可根据实际情况区别使用。反转录反应可以使用Random 6 mers或Oligo dT Primer，也可以Oligo dT Primer和Random 6 mers同时使用。只扩增一种目的基因时，也可以使用Specific Primer作为反转录引物。 3. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法各自适合的反应体系，可以根据分析方法选择体系。     注意：以下是TB Green qPCR分析法和探针qPCR分析法进行反转录实验的区别     ① 用于反转录实验RT Primer Mix添加量。     ② 用于反转录实验total RNA的添加量。 4. Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线，建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA稀释到较低的浓度。如果用水或TE Buffer稀释时，由于模板浓度低不稳定，因而会缩小曲线范围，结果准确度降低。本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution (for Real Time PCR)，将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。   ■ 使用注意 1. 当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等)，然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。 2. 用PrimeScript RT Enzyme Mix I 时使用前要小心地离心收集到反应管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使Tip插入液面过深，否则会因Tip壁粘着造成损失。 3. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。     Technote：   Fast reverse transcription from mouse blood samples using   PrimeScript Reverse Transcriptase         Fast synthesis of cDNA templates for real-time RT-PCR

页面更新：2023-07-28 08:31:31