上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

一步法RT-PCR试剂盒PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	RR055A	PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2	50 Rxns	￥1,350 ￥515
Takara	RR055B (A × 4)	PrimeScript™ One Step RT-PCR Kit Ver.2	50 Rxns × 4	￥4,858

■ 制品内容 (Code No.: RR055A)

PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 100 μl 2 × 1 Step Buffer 625 μl ×2 Control F-1 Primer (20 μM)*1 20 μl Control R-1 Primer (20 μM)*2 20 μl Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl RNase Free dH2O 625 μl ×2   *1 Positive Control RNA用上游引物。 *2 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，RT-PCR方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 本试剂盒采用了一步 (One Step) RT-PCR法。RNA→cDNA→PCR反应操作在同一反应体系中连续进行，反应中途不需添加任何试剂，降低污染风险。反转录反应使用了Takara Bio公司特别开发的新型反转录酶PrimeScript RTase。该反转录酶对具有复杂二级结构的RNA模板也具有很强的延伸能力；PCR反应使用了扩增性能优越的Hot Start型DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS，大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。在本试剂盒中，已将PrimeScript RTase、TaKaRa Ex Taq HS、RNase Inhibitor以及One Step RT-PCR用稳定剂等配制成了Premix型的PrimeScript 1 step Enzyme Mix；同时把反应用Buffer、dNTP以及One Step Enhancer Solution配制成了Premix型的2×1 Step Buffer的形式，使实验操作时的反应液配制更为简单方便。使用本试剂盒可进行高效的RT-PCR扩增。反转录温度可以设定为50℃，能够有效抑制非特异性扩增。另外，本试剂盒可减少由于错配和引物二聚体造成的非特异性反应。 本试剂盒中含有进行One Step RT-PCR反应用的全部试剂，可以方便有效地对RNA进行扩增分析。

■ 各种引物的序列

引物名称 各引物序列 Control F-1 Primer        5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′ Control R-1 Primer        5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 原 理

PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2可在同一反应管中连续进行由PrimeScript RTase将RNA反转录为cDNA，再由TaKaRa Ex Taq HS扩增此cDNA的RT-PCR反应。

图1. PrimeScript One Step RT-PCR Kit Ver.2原理图

■ 保存

-20℃。

■ 注意事项

1. 当同时需要进行数次RT-PCR反应时，应先配制至少10次量各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。

2. 使用PrimeScript 1 Step Enzyme Mix时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。

3. 2×1 Step Buffer使用前用vortex充分混匀，离心后使用。 4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放回-20℃中保存。 5. 为了防止Positive Control RNA分解，应尽量避免反复冻融。有条件的实验室最好保存于-70℃～-80℃。 6. 分装试剂时务必使用新的枪头，以防止样品间污染。 7. 使用本试剂盒进行反转录反应时必须使用特异性的反转录引物，Random Primer、Oligo dT Primer不能使用。

页面更新：2023-11-01 16:22:11

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	R022A	PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns	￥1,392
Takara	R022B (A × 4)	PrimeScript™ High Fidelity RT-PCR Kit	50 Rxns × 4	￥5,012

■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量*1)

PrimeScript RTase (for 2 step) 25 μl 5×PrimeScript Buffer 200 μl RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl dNTP Mixture (10 mM each) 50 μl Oligo dT Primer (2.5 μM) 50 μl Random 6 mers (20 μM) 50 μl PrimeSTAR Max Premix (2×) 625 μl × 2 Control F-1 Primer*2 (20 μM) 10 μl Control R-1 Primer*3 (20 μM) 10 μl Positive Control RNA (2×105 copies/μl) 20 μl RNase Free dH2O 1 ml     *1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl，2 Step RT-PCR时可使用50次。 *2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。   Limited Use Label License: [M54]

■ 制品说明

PCR (Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR)，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。 PrimeScript High Fidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。 本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase，PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶，模板浓度适用范围广，可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。 2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程，2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点: 1. 能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。 2. 在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。 3. 反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用。 本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且，也可以进行1 Step RT-PCR反应。   ■ 保存 -20℃。 注意：PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后，已确认其活性没有发生改变，但要注意尽量避免冻融次数过多。

■ 试剂盒特点

使用2 Step RT-PCR标准操作流程时

RNA模板   适用于所有RNA        扩增片段大小   6 kb产物        反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度在42℃)        DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)        RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有) 1st strand cDNA合成用引物   Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择

使用1 Step RT-PCR操作流程时

RNA模板   适用于所有RNA        扩增片段大小   6 kb产物        反转录酶   PrimeScript RTase (反应温度50℃)        DNA Polymerase   PrimeSTAR Max DNA Polymerase (2×premix)        RNase Inhibitor   必须使用 (Kit中含有) 1st strand cDNA合成用引物   使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物)   (不可使用Random 6 mers及Oligo dT Primer)        操 作   在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应

页面更新：2023-11-01 16:22:53