核酸染料SYBR Green II/in DMSO

核酸染料SYBR Green II/in DMSO

货号:BS359A

规格:100ul

品牌:Biosharp

Sybr Green II 核酸染料(10,000×DMSO

产品编号

产品名称

规格

BS359A

SYBR Green II10,000×DMSO

0.1ml

产品描述:

本品用DMSO溶解,因为DMSO熔点是18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解。

产品特点:

1.无毒性:属花箐类染料,容易生物降解,无致癌毒性。

2.灵敏度高:至少可检出20pg ssDNA或RNA,高于EB染色法25~100倍。

3.信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

4.操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。

5.适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等;可用于 ssDNA 或 RNA 染色。

6.使用方便:对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。 

7.经济:价格比银染便宜。

使用方法:

1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)

(1)制胶时加入SYBR Green II 核酸染料。冷却胶至50℃左右,每100mL胶中加入3~5μL  SYBR Green II 10,000× 储液,以此比例类推。

(2)按照常规方法进行电泳。

注意事项:此方法染色可以准确确定核酸片段分子量,染料用量相对较少。1mL染料大约可以做300块 100mL的胶。

由于SYBR Green II热稳定性较差,不能在热的胶溶液中直接添加,需要等待溶液冷却至50℃左右才能添加。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。

2.泡染法

(1) 按照常规方法进行电泳。

(2) 用pH 7.0~8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照10000﹕1的比例稀释SYBR Green II  10,000× 储液,混匀,制成1× 染色液。

(3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的1× 染色液浸没凝胶。用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10~30分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的1× 染色液轻轻地倒在胶板上,让其均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

注:用泡染法染色时,可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量较多。

保存方法:

2-8℃避光干燥可保存24个月。

货号 BS359A
规格 100ul
品牌 Biosharp
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2×SYBR Green PCR Mastermix

2×SYBR Green PCR Mastermix

货号:
SR1110

品牌:
Jinpan

产品简介
别名 实时荧光定量PCR试剂盒;Quantitative Real-time PCR Kit;Realtime PCR Kit;RT-PCR Kit
英文名称 2×SYBR Green PCR Mastermix
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
单位
规格 50T 200T

使用方法: 根据用量取 PCR 反应体系 1/2 体积该预混液,加入相同体积含引物和模板的水溶液混匀即可。总体积即 为 PCR 总体系,引物和模板用量可根据此体系计算。
产品简介: 本产品为应用SYBR Green Ⅰ染料进行Realtime PCR扩增反应的高效预混系统。该预混系统提供了经过优 化的缓冲液、dNTP、HotStart Taq DNA 聚合酶、SYBR Green I染料和MgCl2,使用者只需加入适量的引物、 模板和水,即可进行荧光定量PCR检测。 该预混系统中的优化缓冲液和 HotStart Taq DNA 聚合酶等可大大提高 PCR 产物的灵敏度和特异性。 Realtime PCR MasterMix 采用高效 HotStart Taq DNA 聚合酶,使 PCR 反应具有更高灵敏度和特异性。 本产品可用于荧光 PCR 检测,获得灵敏、准确且可靠的结果。可适合任意荧光定量 PCR 仪,如 ABI7000/7700/7900HT/7300/7500 Realtime PCR System、FTC2000、lightcycler 等。
产品特性: 高特异性:本产品采用热启动 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有扩增活性,可大大提高 PCR 产物的特 异性。 灵敏度:本产品包含的优化的缓冲液可检测低拷贝数的模板,且重复性好。 高适用性:本产品可适用于任意荧光定量 PCR 仪。

应用实例:模版:提取RNA,反转录成cDNA,模版稀释倍数102﹑103﹑104﹑105,设计的引物扩增的目的片段长度是125bp。

 

核酸染料SYBR Green I/in DMSO

核酸染料SYBR Green I/in DMSO

货号:BS358A

规格:100ul

品牌:Biosharp

SYBR Green I 核酸染料(10,000×DMSO

产品编号

产品名称

规格

BS358A

SYBR Green I   10,000×DMSO

0.1ml

BS358B

SYBR Green I   10,000×DMSO

0.5ml

产品描述:

本品用DMSO溶解,因为DMSO熔点是18.3℃,使用前请放置到室温充分溶解。

产品特点:

1.无毒性:花菁染料,无致癌性。

2.高敏性:紫外凝胶透射仪观测灵敏度盖于EB染色法5-20倍,用可见光透射仪比紫外光条件下的灵敏度比EB染色法高20-30倍。

3.信噪比高:样品荧光信号强,无背景信号。

4.操作简单:无须脱色或冲洗,即可用紫外凝胶透射仪观察或可见光透射仪观察

5.使用范围广:可适用于多种电泳分析,如琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。

6.使用方便:不影响其他修饰酶左右(如:Taq 酶、内切酶、T4连接酶、反转录酶等)。

7.经济:价格比银染便宜(例如:1ml稀释10倍,即使10000ul可以使用10000次)。

注意事项:

1、Sybr Green 核酸染料样品点染方法中,电泳不要超过 2 小时,以免核酸染料从 DNA/RNA 上分离出来,产生弥散状条带。

2、用点染方法染色时,条带稍有滞后现象,如果需要确定片段精确分子量(和 Marker 对比),建议用胶染法和泡染法。

3、常规用酒精沉淀核酸过程中,SYBR Green I 核酸染料可以全部从核酸上去掉。

4、DNA电泳请选择SYBR Green I 染料,RNA 电泳请选择SYBR Green II染料,两种染料不通用。

5、SYBR Green I 核酸染料对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染 色等使用过程中用聚丙烯类容器。

6、可以加Orange Red 作为标记. pH值在7.5-8.3之间,不要微波加热,加入热胶的温度低于50度

保存方法:

2-8℃避光干燥可保存24个月

货号 BS358A
规格 100ul
品牌 Biosharp
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SYBR Green I(10000×)

SYBR Green I(10000×)

货号:
SY1020

品牌:
Jinpan

产品简介
别名 SYBR Green I(10000×)
英文名称 SYBR Green I(10000×)
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
单位
规格 50ul 100ul 1ml

规格:50/100ul

保存:-20℃避光保存,有效期12个月。

产品简介:

采用琼脂糖电泳检测双链DNA时,SYBR GreenⅠ是最灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBR GreenⅠ复合物的量子产额均为0.8。由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。SYBR GreenⅠ的最低检出限:20pg DNA(254nm); 60pg DNA(300nm 紫外透射);此外,SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm 紫外透射),比EB灵敏20至100倍。   SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。

使用说明:

该产品使用方法同EB.    点染法:用于琼脂糖凝胶电泳:取原液1ul加入TE缓冲液或灭菌双蒸水1ml,再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1ml混匀,(此时溶液为1:2000稀释,即为工作液)电泳时取1-2ul工作液和5ul电泳样品混匀后静置5min后直接上样。 胶染法:常规配置琼脂糖凝胶100ml,加热至融化,待温度将至50-70℃(感觉不烫手)加入该原液10ul。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。

注意事项:

1. SYBR GreenⅠ应避光存放,原液保存于-20℃;建议分装冻存,短期可以4℃保存。

2. 胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNA marker稀释5-10倍后使用。

3. 在预染色方法中,电泳时间不要超过2小时,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。

4. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。

5. 在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

6. SYBR Green对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

SYBR Green II RNA

SYBR Green II RNA

货号:
SY1040

品牌:
Jinpan

产品简介
别名 SYBR Green II RNA
英文名称 SYBR Green II RNA
储存条件 -20°C,有效期2年
单位
规格 50ul 100ul 1ml

l Analyze small aliquots from RNA preparations before Northern blotting, start-site mapping or cDNA preparation

l Visualize the migration behavior of 5S rRNA species after high-resolution denaturing gradient electrophoresis (DGGE)

l Stain DNA in single-strand conformation polymorphism (SSCP)

l Stain DNA before amplification by PCR

Materials Contents

SYBR Green II stain is provided as a 10,000X concentrate in DMSO in the following sizes:

l 50 μL (SY1040-50)

l 500 μL (SY1040-500)

Storage

Upon receipt, store the dye frozen at -20°C, protected from light in a desiccator. When stored properly, the SYBR Green II stain stock solution in DMSO is stable for six months to one year.

注:SYBR Green II主要用于RNA和单链DNA电泳。是EB的替代品,无致癌性,超敏感性。用作常规电泳时,须将商品化的核酸MARKER作一定倍数的稀释(1/5-1/10),这样才能得到比较理想的结果。

SYBR Green I (PCR级,10000X)

SYBR Green I (PCR级,10000X)

货号:
SR4110

品牌:
Jinpan

产品简介
别名 SYBR Green I(PCR级,10000X)
英文名称 SYBR Green I(PCR级,10000X)
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
外观(性状) 液体
单位
规格 50ul 100ul 1ml

规格:50/100ul

保存:-20℃避光保存,有效期至少一年。

产品说明:

SYBR Green I 染料是一种直接与双链 DNA (dsDNA) 结合的荧光染料,是荧光定量PCR 最常用的DNA结合染料。在定量 PCR中,SYBR Green I可与双链DNA(dsDNA)非特异性结合后发出荧光,则可以通过检测反应体系中的SYBR Green I 荧光强度,达到检测PCR 产物扩增量的目的。游离状态下,SYBR  Green I发出微弱的荧光,一旦与dsDNA结合,其荧光增加1000倍,一个反应发出的全部荧光信号与出现的dsDNA量成比例,且会随扩增产物的增加而增加;所以通过检测PCR 反应液中的荧光信号强度,可以对目的基因进行准确定量,同时还可以测定扩增的目的DNA片段的熔解温度。

使用说明:

使用时,配置PCR反应混合液,将10000×SYBR Green I浓缩液加入到PCR反应体系,使终浓度为0.5× (0.2×到1×之间调整)。以上操作建议在冰上进行。

注:①  反应液配制方法和PCR 扩增条件请参照DNA聚合酶使用说明。

②  Realtime PCR 扩增仪的使用方法,请参照各仪器说明书。

注意事项:

使用浓度对荧光PCR结果的影响

SYBR Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SYBR Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低,这就意味着低拷贝的样品可能无法检出;而在高浓度时,将会抑制PCR反应,降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度,反应的终浓度为0.2×到1×之间。

镁离子浓度的影响

提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时,镁离子浓度比无SYBR Green I 的普通 PCR 反应高出0.5~3mM。