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Super-n-stain® YF594 Antibody Labeling Kits（YF594抗体标记试剂盒） 货号: S601109S/S601109M/S601109L 规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit

发表于由

Super-n-stain® YF594 Antibody Labeling Kits（YF594抗体标记试剂盒）

产品货号: S601109S/S601109M/S601109L

产品规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit

目录价（元）:950/1050/1150

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产品概述：
产品内容

组分

S6011S (5-20 μg)

S6011M (20-50 μg)

S6011L (50-100 μg)

A: Dye vial

1 vial

1 vial

1 vial

B: Super-n-stain® reaction buffer, 10 ×

1 vial of 15 μL

1 vial of 15 μL

1 vial of 30 μL

C: Super-n-stain® antibody storage buffer

1 vial of 60 μL

1 vial of 150 μL

1 vial of 300 μL

D: Ultrafiltration vial (MWCO=10K)

1 each

1 each

1 each

染料信息

Super-n-stain® Antibody Labeling Kit

货号

Label Dye

Ex (nm)

Em (nm)

1 × (5-20 μg)

1 × (20-50 μg)

1 × (50-100 μg)

Biotin

N/A

N/A

S601101S

S601101M

S601101L

FITC

494

518

S601102S

S601102M

S601102L

YF®350 SE

347

448

S601103S

S601103M

S601103L

YF®405S SE

404

431

S601104S

S601104M

S601104L

LS405 SE

408

452

S601105S

S601105M

S601105L

YF®488(6)-2 SE

490

515

S601106S

S601106M

S601106L

YF®532 SE

527

558

S601107S

S601107M

S601107L

YF®555 SE

555

565

S601121S

S601121M

S601121L

YF®568 SE

562

583

S601108S

S601108M

S601108L

YF®594 SE

590

617

S601109S

S601109M

S601109L

YF®640 SE

642

662

S601112S

S601112M

S601112L

YF®647A SE

650

665

S601113S

S601113M

S601113L

YF®660 SE

663

682

S601114S

S601114M

S601114L

YF®750 SE

750

777

S601120S

S601120M

S601120L


储存条件

-20℃保存，有效期见外包装。

产品应用
Super-n-stain® 抗体标记试剂盒包含您需要的利用本公司YF 染料或生物素（Biotin）迅速标记抗体的所有组分。标记过程只需将抗体和染料简单混合于试剂盒内提供的反应缓冲溶液中，进行短时间的孵育即可。Super-n-stain® 染料在标记结束时不再反应，因此无需进一步纯化步骤。标记后，约4-6分子染料与1分子抗体共价结合。Super-n-stain®是共价标记，所以用它标记的抗体可以用于多色荧光染色，而不会发生抗体间的染料转移现象。
Super-n-stain® 标记可以兼容NaN3、低浓度的甘油、Tris和甘氨酸。试剂盒里提供的微型超滤离心管可以在标记前快速去除不兼容的小分子抗体稳定剂。标准Super-n-stain® 标记步骤可以用于多于IgG (μg) 4倍的BSA或明胶样品。根据您希望标记的IgG量来选择试剂盒大小。优化标记步骤适用于稳定蛋白质过剩或腹水的IgG样品。在这种情况下，根据需要标记抗体样本的蛋白质总量（IgG + 稳定剂，或腹水中总蛋白量）来选择试剂盒大小。优化步骤也可用于标记IgG量低于最低范围的样品，通过添加稳定剂蛋白使总蛋白量达到试剂盒的标记范围。优化步骤不建议用于标记天然抗血清或杂交瘤细胞株培养上清，因为这些样本的抗体含量相对于总蛋白非常低。
当用荧光标记抗体直接进行免疫荧光时，您可能需要使用更高浓度的抗体来实现类似间接免疫荧光法检测（一抗加标记二抗）染色的强度。在我们的内部测试中发现，间接免疫荧光染色结果是直接免疫荧光染色信号的三倍左右。
标记二抗仍可以连接到使用Super-n-stain® 试剂盒标记的一抗上，因此如果多个来自同一物种的抗体用于多色免疫荧光染色法，二抗无法区分同一物种来源的未标记的一抗和使用Super-n-stain® 试剂盒标记的一抗。Super-n-stain®标记抗体可以用作传统间接免疫荧光法检测后的三级染色。UElandy 还提供生物素Super-n-stain® 标记试剂盒、二次检测使用的YF 染料标记的链霉亲和素或YF染料标记的单克隆生物素抗体。
我们还提供酶标记和荧光蛋白标记的 Super-n-stain®试剂盒，以及小配体标记试剂盒（请访问www.uelandy.com）。更多信息，请参见常见问题。


说明书：

Super-n-stain® YF594 Antibody Labeling Kits（YF594抗体标记试剂盒） 货号: S601109S/S601109M/S601109L 规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit UE-S601109S/S601109M/S601109L    
常见问题解答：

◆实验过程中没有纯化步骤，我如何将未标记上的荧光染料除去？
该问题描述了我们研发的关键因素，我们独特的染料、缓冲液组分以及完善的标记策略已经完美地解决了这个问题，具体机制涉及专利保护，不便透露。

◆Super-n-stain® 试剂盒可用于多色免疫标记吗，不同抗体间是否会发生染料转移？
Super-n-stain® 试剂盒抗体与染料是共价结合方式，不存在染料扩散和转移现象。详细信息请参照上面产品说明部分。

◆Super-n-stain® 试剂盒可用于标记抗体以外的蛋白吗？
该试剂盒是针对 IgG 抗体标记优化设计的，不推荐用于标记其它蛋白。Super-n-stain® 标记条件可能会导致 IgM 变性。

◆Super-n-stain® 试剂盒标记一抗和二抗的灵敏性是否一样？
直接免疫荧光检测信号会弱于间接检测，详细信息请参照上面产品说明部分。

◆用标记二抗的间接标记相比，直接标记复合物有哪些优势？
直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步骤，容许来自同一物种的多个抗体同时使用进行多色检测，可以使用来自同一物种的抗体进行动物组织染色，从而避免了二抗的交叉反应。

◆Super-n-stain® 试剂盒与 Invitrogen’s Zenon 抗体标记试剂盒相比，有哪些优势？
主要优势：
1. YF 染料与抗体共价结合避免了多重染色时染料转移和扩散现象；
2. Super-n-stain® 复合物在储液中可稳定保存几个月之久，而 Zenon 标记物必须在 30min 内使用；
3. Super-n-stain® 复合物体积更小些，因为染料直接与抗体结合，而 Zenon 复合物与抗体片段配合使用；
4. 无需进行 YF 染料与标记蛋白的比例优化，直接混合、染色即可；
5. 无需进行后染固定；
6.没有种属特异性

◆Super-n-stain® 试剂盒与 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗体标记试剂盒相比，有哪些优势？

Super-n-stain® 试剂盒使用荧光更亮、光稳定性更好的 YF 染料，试剂盒规格更灵活，可提供至单个抗体标记反应。


◆什么是 YF 染料？

YF 染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。

◆我应如何选择 Super-n-stain® 试剂盒？

每种 YF 染料，我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒，分别是：5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记，根据抗体规格，选择其中一种即可，含有稳定剂的抗体标记，请参考产品描述中的表 1。

◆若待标记抗体总量适用于两种 Super-n-stain® 试剂盒，我应如何选择？

例如：标记 50 μg 抗体，我应购买 50-100 μg 抗体标记试剂盒还是 20-50μg 的试剂盒？

遇到这种情况，两种规格都可以得到较好的结果，使用较小规格的效果更好。

◆如何选择染料与蛋白的比例获得较好的标记效果？

如果待标记的抗体量在试剂盒范围内，无需改变染料量或反应时间，因为 Super-n-stain® 试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。

◆我可以拆分试剂盒组分，以便多次使用吗？
不行，因为 Super-n-stain® 试剂盒已经优化至一个标记单位，我们不建议拆分试剂盒以标记多个抗体或多次使用。

◆抗体浓度是否影响标记效率？
Super-n-stain® 试剂盒较好的标记抗体浓度为 0.5-1 mg/mL，您可通过浓缩或稀释使待标记抗体达到上述浓度范围，小于或超过该浓度范围，会导致标记效率过低或过多。

◆使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号?
与供应商联系，确保抗体组分、浓度在容许范围内。

◆使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号怎么办？

与供应商联系，确保抗体组分、浓度在容许范围内。在直接标记前，应确定用于间接标记的一抗的敏感性和特异性。为了得到与间接标记相同的信号强度，直接标记时需要使用更高浓度的一抗，更多信息请参考产品应用部分。共价标记可能会影响某些抗体的反应活性。可以通过实验确定是否是这一因素的原因，即使用 Super-n-stain® 标记的一抗和荧光标记的二抗进行间接免疫染色，以确定 Super-n-stain® 标记后的一抗是否仍具有反应活性。如果有兼容 YF 染料的激发/发射波长的荧光读胶仪或扫描仪，可以通过 SDS-PAGE 电泳确定抗体是否标记上染料，取 0.1-0.5 μg 标记抗体进行变性 SDS-PAGE电泳，然后进行凝胶拍照，你应该可以观察到 IgG 的 55 kDa 的重链和 25 kDa 的轻链对应的两条荧光条带。

◆实验过程中没有纯化步骤，我如何将未标记上的荧光染料除去？
该问题描述了我们研发的关键因素，我们独特的染料、缓冲液组分以及完善的标记策略已经完美地解决了这个问题，具体机制涉及专利保护，不便透露。

◆Super-n-stain® 试剂盒可用于多色免疫标记吗，不同抗体间是否会发生染料转移？
Super-n-stain® 试剂盒抗体与染料是共价结合方式，不存在染料扩散和转移现象。详细信息请参照上面产品说明部分。

◆Super-n-stain® 试剂盒可用于标记抗体以外的蛋白吗？
该试剂盒是针对 IgG 抗体标记优化设计的，不推荐用于标记其它蛋白。Super-n-stain® 标记条件可能会导致 IgM 变性。

◆Super-n-stain® 试剂盒标记一抗和二抗的灵敏性是否一样？
直接免疫荧光检测信号会弱于间接检测，详细信息请参照上面产品说明部分。

◆用标记二抗的间接标记相比，直接标记复合物有哪些优势？
直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步骤，容许来自同一物种的多个抗体同时使用进行多色检测，可以使用来自同一物种的抗体进行动物组织染色，从而避免了二抗的交叉反应。

◆Super-n-stain® 试剂盒与 Invitrogen’s Zenon 抗体标记试剂盒相比，有哪些优势？
主要优势：
1. YF 染料与抗体共价结合避免了多重染色时染料转移和扩散现象；
2. Super-n-stain® 复合物在储液中可稳定保存几个月之久，而 Zenon 标记物必须在 30min 内使用；
3. Super-n-stain® 复合物体积更小些，因为染料直接与抗体结合，而 Zenon 复合物与抗体片段配合使用；
4. 无需进行 YF 染料与标记蛋白的比例优化，直接混合、染色即可；
5. 无需进行后染固定；
6.没有种属特异性

◆Super-n-stain® 试剂盒与 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗体标记试剂盒相比，有哪些优势？

Super-n-stain® 试剂盒使用荧光更亮、光稳定性更好的 YF 染料，试剂盒规格更灵活，可提供至单个抗体标记反应。


◆什么是 YF 染料？

YF 染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。

◆我应如何选择 Super-n-stain® 试剂盒？

每种 YF 染料，我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒，分别是：5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记，根据抗体规格，选择其中一种即可，含有稳定剂的抗体标记，请参考产品描述中的表 1。

◆若待标记抗体总量适用于两种 Super-n-stain® 试剂盒，我应如何选择？

例如：标记 50 μg 抗体，我应购买 50-100 μg 抗体标记试剂盒还是 20-50μg 的试剂盒？

遇到这种情况，两种规格都可以得到较好的结果，使用较小规格的效果更好。

◆如何选择染料与蛋白的比例获得较好的标记效果？

如果待标记的抗体量在试剂盒范围内，无需改变染料量或反应时间，因为 Super-n-stain® 试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。

◆我可以拆分试剂盒组分，以便多次使用吗？
不行，因为 Super-n-stain® 试剂盒已经优化至一个标记单位，我们不建议拆分试剂盒以标记多个抗体或多次使用。

◆抗体浓度是否影响标记效率？
Super-n-stain® 试剂盒较好的标记抗体浓度为 0.5-1 mg/mL，您可通过浓缩或稀释使待标记抗体达到上述浓度范围，小于或超过该浓度范围，会导致标记效率过低或过多。

◆使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号?
与供应商联系，确保抗体组分、浓度在容许范围内。

◆使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号怎么办？

与供应商联系，确保抗体组分、浓度在容许范围内。在直接标记前，应确定用于间接标记的一抗的敏感性和特异性。为了得到与间接标记相同的信号强度，直接标记时需要使用更高浓度的一抗，更多信息请参考产品应用部分。共价标记可能会影响某些抗体的反应活性。可以通过实验确定是否是这一因素的原因，即使用 Super-n-stain® 标记的一抗和荧光标记的二抗进行间接免疫染色，以确定 Super-n-stain® 标记后的一抗是否仍具有反应活性。如果有兼容 YF 染料的激发/发射波长的荧光读胶仪或扫描仪，可以通过 SDS-PAGE 电泳确定抗体是否标记上染料，取 0.1-0.5 μg 标记抗体进行变性 SDS-PAGE电泳，然后进行凝胶拍照，你应该可以观察到 IgG 的 55 kDa 的重链和 25 kDa 的轻链对应的两条荧光条带。


使用本产品的文献：

参考文献
1.Paraoxonase 2 decreases renal reactive oxygen species production, lowers blood pressure, and mediates dopamine D2 receptor-induced inhibition of NADPH oxidase
应用方向：polyclonal rabbit anti-PON2 antibody/  polyclonal rabbit anti-D2R antibody 

2.The Q loops of the human multidrug resistance transporter ABCB1 are necessary to couple drug binding to the ATP catalytic cycle
应用方向：Primary antibody 4E3

3.Increased Metabolite Levels of Glycolysis and Pentose Phosphate Pathway in Rabbit Atherosclerotic Arteries and Hypoxic Macrophage
应用方向：anti-Ki-67 antibody/anti-macrophage antibody / anti-SMC antibody

4.Mucosal immunoglobulins at respiratory surfaces mark an ancient association that predates the emergence of tetrapods
应用方向：rabbit anti-trout IgT / mouse anti-trout IgM / rabbit anti-Ich

5.Data ofrationalprocessoptimization for the production of a full IgG and its Fab fragment from hybridoma cells
应用方向：IgG

6.Adenoviral L4 33K forms ring-like oligomers and stimulates ATPase activity of IVa2: implications in viral genome packaging
应用方向：polyclonal anti-IVa2 and anti-33K antibodies

7.Principal cell activity induces spine relocation of adult-born interneurons in the olfactory bulb
应用方向：Anti-synaptophysin antibody

8.Enhancing proteasome-inhibitory activity and specificity of bortezomib by CD38 targeted nanoparticles in multiple myeloma
应用方向：anti-CD38 chitosan NPs

YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽（远红） 货号: YP0053S/YP0053L 规格: 50T/300T

发表于由

YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽（远红）

产品货号: YP0053S/YP0053L

产品规格: 50T/300T

目录价（元）:589/2063

推荐仪器：荧光显微镜

大包装询价


产品概述：

储存条件
-20℃干燥、避光保存，有效期见外包装。若配制成水溶液，应小量分装保存。

货号

名称

Abs/Em (nm)

规格

YP0059S

YF®488-Phalloidin

YF®488标记鬼笔环肽（绿色）

490/515

50T

YP0059L

300T

YP0060S

YF®555-Phalloidin

YF®555标记鬼笔环肽（橙红）

555/565

50T

YP0060L

300T

YP0052S

YF®594-Phalloidin

YF®594标记鬼笔环肽（红色）

590/617

50T

YP0052L

300T

YP0053S

YF®633-Phalloidin

YF®633标记鬼笔环肽（远红）

630/650

50T

YP0053L

300T

YP0055S

YF®680-Phalloidin

YF®680标记鬼笔环肽（远红）

681/698

50T

YP0055L

300T

YP0063S

Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽（橙红）

546/575

50T

YP0063L

300T


产品介绍
鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素。它是特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部，在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。在pH升高时，该硫醚被裂解，鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
YF®染料是我司开发的一系列新一代荧光染料，与其他荧光染料相比，在亮度，光稳定性和水溶性方面具有综合优势。荧光标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色F-肌动蛋白。在各种植物细胞或动物细胞中，标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力，平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体，鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显着变化。非特异性染色可以忽略不计，染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态，将聚合临界浓度降低至30倍。鬼笔毒肽类（Phallotoxins）可通过抑制细胞松弛素的解聚，碘化钾和升高的温度，稳定F-肌动蛋白。因为鬼笔环肽缀合物很小，大约直径12-15埃，分子量< 2000 Dal，多种肌动蛋白结合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是，鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能，标记甘油肌纤维仍然收缩，标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 本产品为冻干粉形式，微量不易观察，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。


说明书：

YF®633-Phalloidin YF®633标记鬼笔环肽（远红） 货号: YP0053S/YP0053L 规格: 50T/300T UE-YP0053S/YP0053L    
MSDS：
MSDS YP0053 YF®633-Phalloidin
常见问题解答：

◆为什么我拿到的是空管？

本产品为冻干粉形式，微量不易观察，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用。

◆鬼笔环肽染色细胞骨架过程中，能使用甲醇固定细胞吗？

甲醇会破坏Actin蛋白，因此不能使用含有甲醇的固定液，并且使用不含甲醇的甲醛。

◆为什么用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片，没有看到信号？
当细胞和组织经由二甲苯或丙酮之类的溶剂处理时（例如组织切片脱石蜡期间），它通过阻止鬼笔环肽结合的方式来影响F-actin。可以使用通常不用有机溶剂洗涤的冷冻切片代替石蜡切片，或者可以使用抗肌动蛋白抗体。

◆鬼笔环肽染料能重复利用吗？
正常情况下染色液在使用后，可能会影响染色效果，最好不要重复使用；我们的鬼笔环肽按说明书添加，浓度较低，这是染料不能重复利用的原因。

◆鬼笔环肽染色F-Actin, 有的染上，有的没染上，并且染色信号较弱怎么办？
（1）可能是染料浓度低或孵育时间不足，建议增加染料浓度或培养时间。
（2）可能是在错误的波长下分析细胞，建议重新检查过滤器设置是否正确。

◆不进行透化步骤，鬼笔环肽直接染色固定后的细胞可以吗？
荧光标记的phalloidins，只能用于在固定透化后的组织切片、细胞培养和无细胞实验中染色F-actin。

◆染色后，没有荧光信号怎么办？
（1）检查储液、工作液配制是否有误。
（2）固定及透化步骤尤为重要，使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定，使用新鲜配置的0.5% Triton X-100 进行透化。摸索最佳的固定及透化时间。
（3）摸索最佳染色工作液浓度及染色时间。

◆可以用于做流式细胞吗？
该产品主要是用于微丝的染色，一般用荧光显微镜观察结果，不推荐用流式检测。

◆可以用普通荧光显微镜观察吗？
普通的荧光显微镜也是可以检测的，激光共聚焦拍照效果会更好一些。

◆探针的浓度是多少？
请按照说明书的稀释比例进行使用，具体浓度信息未知。


使用本产品的文献：

Multifaceted Characterization of the Signatures and Efficacy of Mesenchymal Stem/Stromal Cells in Acquired Aplastic Anemia

  • Jiali Huo,
  • Leisheng Zhang,
  • Xiang Ren, 
  • Chengwen Li, 
  • Xingxin Li, 
  • Peiyuan Dong, 
  • Xuan Zheng, 
  • Jinbo Huang, 
  • Yingqi Shao, 
  • Meili Ge, 
  • Jing Zhang, 
  • Min Wang, 
  • Neng Nie, 
  • Peng Jin & 
  • Yizhou Zheng

Stem Cell Research & Therapy


参考文献：
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
应用方向：人体组织切片，心脏大鼠心肌细胞和密集生长的神经元培养物

2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向：组织切片、动物细胞、植物细胞

3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
应用方向：哺乳动物细胞：小鼠脾B细胞

4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向：组织切片

5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
应用方向：组织切片

6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
应用方向：植物细胞

7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
应用方向：哺乳动物细胞： 原代人类成纤维细胞

8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
应用方向：酿酒酵母菌细胞

YF®555 Tyramide（YF®555酪胺），200× 货号: YT0071S/YT0071L 规格: 10 μL/100 μL

发表于由

YF®555 Tyramide（YF®555酪胺），200×

产品货号: YT0071S/YT0071L

产品规格: 10 μL/100 μL

目录价（元）:438/3063

大包装询价


产品概述：

货号

产品名称

规格

YT0069S

YF®350 Tyramide（YF®350酪胺），200×

10 μL

YT0069L

100 μL

YT0070S

YF®488 Tyramide（YF®488酪胺），200×

10 μL

YT0070L

100 μL

YT0076S

YF®532 Tyramide（YF®532酪胺），200×

10 μL

YT0076L

100 μL

YT0071S

YF®555 Tyramide（YF®555酪胺），200×

10 μL

YT0071L

100 μL

YT0072S

YF®594 Tyramide（YF®594酪胺），200×

10 μL

YT0072L

100 μL

YT0073S

YF®640 Tyramide（YF®640酪胺），200×

10 μL

YT0073L

100 μL

YT0074S

YF®680 Tyramide（YF®680酪胺），200×

10 μL

YT0074L

100 μL

BT0075S

Biotin Tyramide（Biotin 酪胺），200×

10 μL

BT0075L

100 μL


产品参数
YF®350 Tyramide：347/448 nm
YF®488 Tyramide：490/515 nm
YF®532 Tyramide：527/558 nm
YF®555 Tyramide：555/565 nm
YF®594 Tyramide：590/617 nm
YF®640 Tyramide：642/662 nm
YF®680 Tyramide：681/698 nm

储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍

酪胺信号放大技术（Tyramide Signal Amplification）又称催化信号放大技术（Catalyzed Signal Amplification），是一类利用HRP对靶抗原进行高密度原位标记的酶学检测方法，其不但可以用于IF/IHC的信号放大，亦可用于Elisa、ISH等检测。
酪胺信号放大技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪胺的信号放大技术能够提供极强的灵敏度、检测极微量的目的抗原。酪胺信号放大技术极大的降低抗体的用量，节约抗体。酪胺信号放大试剂盒可与传统染色方法结合使用以多色成像，也可以顺序进行两个或更多个酪胺反应以标记一个样品上的不同靶标。

注意事项
1. 与荧光二抗相比，TSA试剂盒显示出更高的灵敏度和更强的信号。因此，实验时一抗的使用浓度较低，这样可以降低非特异性结合带来的背景荧光，我们建议梯度设置一抗浓度以找到最佳浓度。
2. 如果需要考虑背景荧光，建议设置未与一抗孵育的阴性对照。确保该阴性对照在孵育和洗涤过程中没有被阳性样品中的试剂交叉污染。对于组织样品，我们还建议对未染色的对照（不添加抗体或酪酰胺）进行成像，以确定组织自发荧光对背景的影响。
3. 建议使用5 μg/mL的HRP结合物，降低浓度可能会影响信号强度和灵敏度。
4. 建议1 : 200稀释YF®/Biotin – Tyramide。较高的浓度可能会导致信号过强或背景高，可以从1 : 100到1 : 1000摸索以找到最佳浓度。
5. 可以在每个酪酰胺反应后通过进行HRP淬灭或抗体剥离，依次使用多个酪酰胺扩增试剂盒来标记同一样品上的不同靶标。


说明书：

YF®555 Tyramide（YF®555酪胺），200× 货号: YT0071S/YT0071L 规格: 10 μL/100 μL UE-YT0071S/YT0071L    
MSDS：
MSDS YT0071S YF®555 Tyramide, 200×

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒（绿色荧光） 货号: C6019S/C6019M/C6019L 规格: 5T/20T/50T

发表于由

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒（绿色荧光）

产品货号: C6019S/C6019M/C6019L

产品规格: 5T/20T/50T

目录价（元）:431/1326/2947

推荐仪器：流式细胞仪

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产品概述：
储存条件
-20℃ 避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。 

组分

规格

5T

20T

50T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

100 µL

0.4 mL

1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

25 µL

100 µL

250 µL

-20℃，避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

500 µL

2×1 mL

5 mL

2-8℃

D. CuSO4

200 µL

0.8 mL

2× 1 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

15 mg

60 mg

150 mg

2-8℃

规格：上述反应次数针对6孔板培养的细胞，不同容器的具体用量可参考附表1。
荧光光谱数据：YF® 488 Azide：495/519 nm；YF® 555 Azide：555/565 nm；
YF®594 Azide：590/617 nm；YF® 647A Azide：650/670 nm.

产品介绍
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 BrdU 法。EdU 法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU （5-乙炔基-2’-脱氧尿苷）是一种嘧啶类似物，在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 法检测基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应，形成共价键。 
本试剂盒中，EdU 含有炔烃，YF®488/555/647A Azide 染料含有叠氮化合物。点击法的 EdU 标记增殖快速有效，易于使用。BrdU 方法需要 DNA 变性（如酸变性、热变性或者用 DNase 消化）暴露出 BrdU，方便 BrdU 抗体结合；而 EdU 法只需标准化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促渗就可以使检测试剂进入细胞，只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分，可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书：

YF®488 Click-iT EdU 流式检测试剂盒（绿色荧光） 货号: C6019S/C6019M/C6019L 规格: 5T/20T/50T UE-C6019S/C6019M/C6019L    
常见问题解答：

◆YF®488/555/594/647有什么区别？

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同，检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同，可根据偏好或需求进行选择。

◆EdU试剂盒中，固定后3% BSA in PBS的作用是什么？
清洗步骤中，BSA可以终止掉未反应的甲醛。

◆能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测？
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记，但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型，检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

◆质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗？检测顺序是什么？
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光，故染色后无法直接检测GFP，建议使用GFP抗体间接检测。

◆观测到较高的本底干扰，这是什么原因所致？如何减少本底干扰？
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性，生物体内几乎不可能有副反应发生，所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时，也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照，以排除自发荧光干扰。此外，您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应，验证Click反应信号的特异性。

◆为什么标记样品无信号或特异性信号非常低？如何提高信号？ 
1.请保证试剂使用时为无色的状态，不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液；
2.为确保Click反应试剂能够到达核内，细胞需要充分地固定和通透；
3.由于铜离子能结合到部分试剂上，这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前，不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂（例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等），对某些含有这些物质的实验样品来说，进行Click反应前，可能需要增加额外的洗涤步骤；
4.当铜离子在合适的化合价时，Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育，可更有效地提高标记效率。

◆如何对细胞核进行复染？
试剂盒中配有Hoechst 33342，可以在Click反应后用于细胞核的染色，也可选择使用DAPI。

◆可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子，可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

发表于由

YF®568 free acid（羧酸）

产品货号: YH0004

产品规格: 5 mg

目录价（元）:3200

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产品概述：

货号

名称

规格

Absmax/Em

Extinction coefficient(ε)

MW

YH0011

YF®488(5) free acid（羧酸）

5 mg

490/513

83,000

737.0

YH0002

YF®488(6) free acid（羧酸）

5 mg

491/512

73,000

737.0

YH0010

YF®532 free acid（羧酸）

5 mg

523/545

81,000

625.1

YH0016

YF®555 free acid（羧酸）

5 mg

550/561

150,000

1061.1

YH0004

YF®568 free acid（羧酸）

5 mg

573/595

88,000

693.7

YH0008

YF®594 free acid（羧酸）

5 mg

585/609

92,000

722.0

YH0006

YF®640 free acid（羧酸）

5 mg

641/658

105,000

847.0

YH0015

YF®647A free acid（羧酸）

5 mg

648/664

240,000

1263.0

YH0017

YF®647C free acid（羧酸）

5 mg

648/663

240,000

1386.0

YH0007

YF®660 free acid（羧酸）

5 mg

661/679

100,000

903.1

YH0003

YF®680 free acid（羧酸）

1 mg

679/700

128,114

927.1

YH0057

YF®750 free acid（羧酸）

1 mg

747/770

250,000

1290.0

名称

光谱图（溶解于水所测）

效能等同于

YF®488(5) free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

FITC, Oregon Green 488, FAM, Cy2

YF®488(6) free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

FITC, Oregon Green 488, FAM, Cy2

YF®532 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 532, Atto 532

YF®555 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 555, Cy3, Tetramethylrhodamine

YF®568 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 568, Lissamine rhodamine B, ROX

YF®594 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 594, Texas Red Dye, Cy3, DyLight 594

YF®640 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 647, Cy5, ATTO 647

YF®647A free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 647, Cy5, DyLight 649

YF®647C free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 647, Cy5, DyLight 649

YF®660 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

CF®660R

YF®680 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Alexa Fluor 680, Cy5.5, IR Dye 680

YF®750 free acid（羧酸）

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg

Andy Fluor 750, Cy7, DyLight 750


储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍

YF®染料是新一代罗丹明&花菁类染料，与其他荧光染料相比，在亮度，光稳定性和水溶性方面具有综合优势, 我司提供了不同的染料波长进行选择。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

YF®568 free acid（羧酸） 货号: YH0004 规格: 5 mg UE-YH0004    
MSDS：
MSDS YF® dye free acid

YF®555 TUNEL 细胞凋亡试剂盒（橙红色荧光） 货号: T6039S/T6039L 规格: 20T/50T

发表于由

YF®555 TUNEL 细胞凋亡试剂盒（橙红色荧光）

产品货号: T6039S/T6039L

产品规格: 20T/50T

目录价（元）:1105/2211

推荐仪器：荧光显微镜（主推）、流式细胞仪

大包装询价


产品概述：

产品货号和产品规格：

产品货号

产品名称

Ex/Em (nm)

产品规格

T6013S

YF®488 TUNEL细胞凋亡试剂盒

（绿色荧光）

490/515

20T

T6013L

50T

T6039S

YF®555 TUNEL细胞凋亡试剂盒

（橙红色荧光）

555/565

20T

T6039L

50T

T6014S

YF®594 TUNEL细胞凋亡试剂盒

（红色荧光）

590/617

20T

T6014L

50T

T6063S

YF®640 TUNEL细胞凋亡试剂盒

（远红荧光）

642/662

20T

T6063L

50T

T6067S

Cy3 TUNEL细胞凋亡试剂盒

555/565

20T

T6067L

50T

产品内容：

                        规格

组分

20T

50T

A. TUNEL Equilibration Buffer

2×1 mL

5 mL

B.YF®488/555/594/640/Cy3 TUNEL Reaction Buffer

1 mL

2 × 1.25 mL

C. TdT Enzyme

20 μL

50 μL

D. Proteinase K (2 mg/mL)

40 μL

100 μL

E. DNase I (2 U/μL)

5 μL

13 μL

F. 10 × DNase I Buffer

100 μL

260 μL


储存条件
-20℃保存，组分B需避光，避免反复冻融。有效期见外包装。

产品介绍

细胞发生凋亡时, 会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA，产生180 bp-200 bp的 DNA 片段，表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现的特异的梯状Ladder图谱。基因组DNA双链或单链断裂时会出现产生大量的粘性3′-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的催化作用下，与YF®/Cy-dUTP结合，从而通过荧光显微镜或流式细胞仪直接进行凋亡细胞的检测，这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（Terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL）。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3′-OH形成，很少能够被染色。Tunel法可以对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色，能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征，可检测出极少量的凋亡细胞，因而在细胞凋亡的研究中广泛采用。
本试剂盒应用范围广，可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞，而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的 DNA 链断裂的细胞。本试剂盒检测细胞凋亡，耗时短，只需一步染色反应，洗涤后即可检测。


注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 组分A和B使用时请佩戴口罩、手套，如接触皮肤，请立即用大量水冲洗。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

YF®555 TUNEL 细胞凋亡试剂盒（橙红色荧光） 货号: T6039S/T6039L 规格: 20T/50T UE-T6039S/T6039L    
MSDS：
MSDS T6013 6039 6014 6063 6067 YF®488 555 594 640 Cy3 TUNEL Apoptosis Kit
常见问题解答：

◆为什么出现了一些非特异标记？

1. 有些细胞或组织，比如平滑肌核酸酶或聚合酶活性水平较高，使得DNA全部被切断，易导致假阳性。建议：取出细胞或组织后要立即固定并充分固定，以阻止这些酶的活性，同时设置阴性对照。
2. 内源性过氧化物酶影响，建议：对于肝脏、肾脏等血细胞含量多的组织，适当延长封闭时间和升高过氧化氢的浓度。
3. 固定液浓度过高或过低，导致组织中心部分固定效果不佳，而使得中心部细胞自溶、DNA链出现不规则断裂，产生假阳性。建议：推荐使用4%多聚甲醛。
4. TdT 酶反应时间过长或Tunel反应过程中反应液发生蒸发或渗漏，细胞或组织表面不能保持湿润。注意控制反应时间，并确保TdT 酶反应液能很好地覆盖样品。
5. 石蜡、脂肪、血液、体液等都较易与染料结合，所以组织切片制作时要保持干净、脱蜡要彻底。
6. 有些试剂或细胞存在自发荧光，选择染料时要避开自发荧光的颜色。

◆为什么没有染上荧光？
1. 固定不充分。固定液首选4%多聚甲醛，现用现配。不建议使用乙醇，乙醇固定液对组织的渗透力较弱，影响TUNEL标记效率.
2. 细胞膜和核膜的通透不充分，TdT酶未能到达核内。细胞与冰冻切片，可用0.2% Triton X-100溶液通透5-30min，石蜡切片推荐使用蛋白酶K，37℃通透30 min；不同的细胞和组织所需要的通透时间略有不同，时间太长容易脱片，适当调整。
3. 延长标记时间至2h，并适当增加TdT酶及dUTP的用量。
4. 确定实验对象细胞有凋亡。准备一份DNase I处理的阳性对照，验证TdT酶反应是否正确进行。

◆如何对细胞核进行复染？
可在TUNEL反应结束后对细胞核进行染色。

◆为什么荧光背景高？
1. 支原体污染：可以使用支原体染色检测试剂盒验证。
2. TdT 酶反应时间过长，可以用试剂盒提供的TdT酶稀释液将TdT酶稀释2-5倍后再按照说明书操作，稀释后的TdT酶仅供当日使用。
3. 处于高速分裂和增殖状态中的细胞，有时也会出现细胞核中的DNA 断裂。建议：在非高增殖期取样检测；
4. 有些试剂或细胞存在自发荧光，选择染料时要避开自发荧光的颜色。
5. DAB 孵育时间过长，减少DAB 染色时间。
6. Biotin-X-dUTP 的非特异性结合，在TdT 酶反应之后，再用含0.1% Triton X-100 和1 mg/ml BSA 的PBS 洗三次。

◆标记率低？
1. 乙醇、甲醇或甲醛（市面上购买的甲醛大多含有甲醇）固定的样品标记效率较低（因为在固定时染色质未能与蛋白质交联，而在操作中丢失），采用推荐的固定液。
2. 固定时间过长，导致交联程度过高，减少固定时间。
3. 贴壁细胞如果使用药物诱导凋亡，会细胞皱缩，贴壁黏附力降低，导致凋亡细胞容易脱落。建议：在凋亡诱导结束后，可以对多孔板进行1000g离心5min，然后再吸出培养基并用PBS洗涤。如果没有适合的离心机，请注意操作轻缓，防止发生凋亡的细胞在洗涤时被洗去。后续整个操作也需要轻缓。

◆在蛋白酶K中消化组织样品多久？
大部分组织样品需要充分消化15分钟。最佳的培养时间根据组织类型和厚度而不同。脑组织比其他组织需要更长的蛋白酶处理时间。 

◆实验的组织切片应该多厚？
老鼠肠、肾脏、肝脏、心脏和结肠厚度5–20 µm。

YF®488(6)-X SE（YF®488(6)-X琥珀酰亚胺酯） 货号: YS0020 规格: 1mg

发表于由

YF®488(6)-X SE（YF®488(6)-X琥珀酰亚胺酯）

产品货号: YS0020

产品规格: 1mg

目录价（元）:2400

大包装询价


产品概述：
 储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装。

货号

名称

Absmax/Em

A280/Amax

or Cf (protein)

Extinction coefficient(ε)

Optimal DOL(IgG)

MW

YS0023

YF®350 SE（YF®350 琥珀酰亚胺酯）

347/448

0.14

18,000

4-6

700

YS0033

YF®405S SE（YF®405S琥珀酰亚胺酯）

404/431

0.7

33,000

5-10

1028

YS0019

YF®488(6)-2 SE（YF®488(6)-2琥珀酰亚胺酯）

490/515

0.1

70,000

7-9

879

YS0020

YF®488(6)-X SE（YF®488(6)-X琥珀酰亚胺酯）

490/515

0.1

70,000

7-9

745

YS0030

YF®488(5) SE（YF®488(5) 琥珀酰亚胺酯）

490/515

0.1

70,000

7-9

834

YS0032

YF®488(5)-1 SE（YF®488(5)-1 琥珀酰亚胺酯）

490/515

0.1

70,000

7-9

879

YS0029

YF®532 SE（YF®532 琥珀酰亚胺酯）

525/554

0.09

81,000

4-7

722

YS0036

YF®555 SE（YF®555琥珀酰亚胺酯）

555/565

0.08

150,000

3-6

1077

YS0022

YF®568 SE（YF®568 琥珀酰亚胺酯）

575/598

0.46

88,000

5-6

790

YS0027

YF®594 SE（YF®594琥珀酰亚胺酯）

590/617

0.56

92,000

4-7

921

YS0024

YF®640 SE（YF®640琥珀酰亚胺酯）

642/662

0.37

105,000

4-7

944.1

YS0064

YF®640-4 SE（YF®640-4琥珀酰亚胺酯）

642/662

0.37

105000

4-7

1191.4

YS0065

YF®640-5 SE（YF®640-5琥珀酰亚胺酯）

642/662

0.37

105000

4-7

1367.6

YS0035

YF®647A SE（YF®647A琥珀酰亚胺酯）

650/665

0.03

240,000

3-6

1258

YS0025

YF®660 SE（YF®660琥珀酰亚胺酯）

663/682

0.51

100,000

4-7

1099.4

YS0021

YF®680 SE（YF®680琥珀酰亚胺酯）

680/701

0.32

140,000

5-6

1124.4

YS0056

YF®750 SE（YF®750琥珀酰亚胺酯）

750/777

0.03

250,000

2-5

1285

产品介绍

YF® SE (or NHS ester)是我司生产的具有氨基反应活性的一类荧光染料。该类染料的SE基团可以与氨基基团反应生产稳定的酰胺键。相比于市面上其他同类染料，YF®是稳定性更强、水溶性更好、荧光强度更优的新一代荧光染料。
我司还提供小批量抗体标记试剂盒Super-n-stain® Antibody Labeling Kits（S6011），可在30 min内标记5-100 μg抗体，而无需纯化步骤，简单方便。

注意事项
1. 标记的蛋白如需长期储存，推荐加入5-10 mg/mL BSA和0.01-0.03% NaN3，以防止蛋白变性和微生物滋生。放置于4℃避光保存。若加入了终浓度为50%的甘油，可放-20℃保存。可稳定保存一年以上。
2. 操作过程注意避光，搅拌速度应适当以避免产生气泡。
3. 层析柱装柱时，尽量使柱体均匀，柱面平整，无气泡、裂隙。
4. 上样时注意，当柱顶缓冲液与凝胶平面相切时再加样品，洗脱时，当样品走至与凝胶平面相切时再加洗脱液。
5. 影响标记效率的其他因素还包括：温度、反应时间、pH、荧光染料与蛋白的量等，需注意控制。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套。
说明书：

YF®488(6)-X SE（YF®488(6)-X琥珀酰亚胺酯） 货号: YS0020 规格: 1mg UE-YS0020    
MSDS：
MSDS YF® Dye Succinimidyl Ester(SE)

YF®594 Azide （YF®594叠氮化物） 货号: YA0038 规格: 0.5 mg

发表于由

YF®594 Azide （YF®594叠氮化物）

产品货号: YA0038

产品规格: 0.5 mg

目录价（元）:2400

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产品概述：

货号

名称

规格

Ex/Em

Extinction

coefficient(ε)

MW

效能等同于

YA0039

YF®488(5) Azide（YF®488(5)叠氮化物）

0.5 mg

490/515 nm

80, 000

861.0

Alexa Fluor 488, DyLight 488, FITC, FAM, Cy2

YA0042

YF®555 Azide

（YF®555叠氮化物）

0.5 mg

555/565 nm

155, 000

1062.0

Alexa Fluor 555, Cy3,

Tetramethylrhodamine

YA0037

YF®568 Azide

（YF®568叠氮化物）

0.5 mg

562/583 nm

100, 000

1055.0

Alexa Fluor 568, Lissamine rhodamine B, ROX

YA0038

YF®594 Azide

（YF®594叠氮化物）

0.5 mg

590/617 nm

92, 000

905.1

Alexa FLuor 594, Texas Red Dye, Cy3, DyLight 594

YA0041

YF®647A Azide （YF®647A叠氮化物）

0.5 mg

650/665 nm

240, 000

1328.9

Alexa Fluor 647


产品参数
溶解性：可溶于DMSO或水

储存条件
-20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍
YF® Dye Azide可通过铜(I)催化的点击反应与炔类发生加成反应。YF® Dye Azide可用于流式细胞仪、荧光显微镜等。

注意事项
1. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

YF®594 Azide （YF®594叠氮化物） 货号: YA0038 规格: 0.5 mg UE-YA0038    
MSDS：
MSDS YF® Dye Azide

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光） 货号: C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL 规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

发表于由

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光）

产品货号: C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL

产品规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T

目录价（元）:212/811/1621/2653

推荐仪器：荧光显微镜、流式细胞仪

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产品概述：

产品货号及规格：

货号

产品名称

规格

C6043S

YF®488 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（绿色荧光）

2-20T

C6043M

10-100T

C6043L

50-500T

C6043XL

100-1000T

C6044S

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光）

2-20T

C6044M

10-100T

C6044L

50-500T

C6044XL

100-1000T

C6045S

YF®594 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（红色荧光）

2-20T

C6045M

10-100T

C6045L

50-500T

C6045XL

100-1000T

C6046S

YF®647A Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（远红荧光）

2-20T

C6046M

10-100T

C6046L

50-500T

C6046XL

100-1000T

产品内容：

组分

2-20T

10-100T

50-500T

100-1000T

开封后保存温度

稳定性

A. 10 mM EdU

40 µL

200 µL

1 mL

2× 1 mL

-20℃

开封后按指定温度保存可有效放置一年

B. YF® 488/555/594/647A Azide

10 µL

50 µL

250 µL

500 µL

-20℃，避光

C. 10× Click-iT EdU反应缓冲液

200 µL

1 mL

5 mL

10 mL

2-8℃

D. CuSO4

100 µL

500 µL

2× 1.25 mL

5 mL

2-8℃

E. Click-iT EdU缓冲液添加物

6 mg

30 mg

150 mg

2 × 150 mg

2-8℃

F. Hoechst 33342

5 µL

25 µL

125 µL

250 µL

2-8℃

规格：如果用于荧光显微镜检测，所能使用次数为上述各个规格的最大使用次数（针对96孔板培养的细胞），如C4043S可检测20个孔的样品（不同容器的具体用量可参考附表1）；如果用于流式检测，所能使用次数为上述各个规格的最小使用次数，如C4043S可检测2个样品。
荧光光谱数据：YF® 488 Azide：495/519 nm；YF® 555 Azide：555/565 nm；YF®594 Azide：590/617 nm

  YF® 647A Azide：650/670 nm；Hoechst 33342：350/461 nm（bound to DNA）

储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装。开封后，保存温度详见说明书。 

产品介绍

细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。检测细胞增殖最精确的方法是 

BrdU法。EdU法检测试剂盒是BrdU法的革命性突破。EdU（5-乙炔基-2’-脱氧尿苷）是一种嘧啶类似物，在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测基于“点击”反应，一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃作用发生共价反应，形成共价键。

本试剂盒中，EdU含有炔烃，YF® 488/555/594/647A Azide染料含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效，易于使用。BrdU方法需要DNA变性（如酸变性、热变性或者用DNase消化）暴露出BrdU，从而方便BrdU抗体结合；而EdU法只需标准化的多聚甲醛固定和Triton X-100促渗就可以使检测试剂进入细胞，只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。

本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组分，可以用于体外培养细胞的增殖检测。


说明书：

YF®555 Click-iT EdU 通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光） 货号: C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL 规格: 2-20T/10-100T/50-500T/100-1000T UE-C6044S/C6044M/C6044L/C6044XL    
MSDS：
MSDS C6044 YF®555 Click-iT EdU Universal Cell Proliferation Detection Kit
常见问题解答：

◆YF®488/555/594/647有什么区别？

主要就是检测EDU的物质带的荧光基团不同，检测时发射荧光的颜色不同。实验效果相同，可根据偏好或需求进行选择。

◆EdU试剂盒中，固定后3% BSA in PBS的作用是什么？
清洗步骤中，BSA可以终止掉未反应的甲醛。

◆能否在活细胞中进行Click-iT EdU检测？
不可以。虽然EdU是对活细胞进行代谢标记，但是叠氮化物检测试剂和缓冲液组分是细胞非透过型，检测信号时的Click反应必须在固定和通透的样品上进行。

◆质粒转染表达的荧光蛋白检测与Click反应兼容吗？检测顺序是什么？
本产品会影响GFP、RFP、mCherry等荧光蛋白的荧光，故染色后无法直接检测GFP，建议使用GFP抗体间接检测。

◆观测到较高的本底干扰，这是什么原因所致？如何减少本底干扰？
叠氮化物和炔烃类间Click反应非常有选择性，生物体内几乎不可能有副反应发生，所以本底较高一般是由洗涤不充分造成的。减少本底干扰的最佳方法是增加BSA洗涤的次数。同时，也可在同样的检测条件下设置一组同等处理的无染料或无Click反应对照，以排除自发荧光干扰。此外，您还可在无EdU 体系中进行完整的Click反应，验证Click反应信号的特异性。

◆为什么标记样品无信号或特异性信号非常低？如何提高信号？ 
1.请保证试剂使用时为无色的状态，不要使用已经变黄的添加剂或缓冲液；
2.为确保Click反应试剂能够到达核内，细胞需要充分地固定和通透；
3.由于铜离子能结合到部分试剂上，这会导致催化Click反应的有效浓度降低。所以在Click反应前，不要在任何缓冲液或试剂中引入金属螯合剂（例如EDTA、EGTA、柠檬酸盐等），对某些含有这些物质的实验样品来说，进行Click反应前，可能需要增加额外的洗涤步骤；
4.当铜离子在合适的化合价时，Click反应才有效。Click反应中用到的铜离子为二价铜(Cu2+)。
5.延长Click反应的时间至超过30分钟也并不会提高信号。建议使用新鲜的Click反应试剂再次进行30分钟的孵育，可更有效地提高标记效率。

◆如何对细胞核进行复染？
试剂盒中配有Hoechst 33342，可以在Click反应后用于细胞核的染色，也可选择使用DAPI。

◆可以用于检测植物细胞核内的DNA复制吗? 
可以。EdU是小分子，可以穿透植物细胞的细胞壁。

YF®647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: Y6026S/Y6026M/Y6026L 规格: 10T/50T/100T

发表于由

YF®647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒

产品货号: Y6026S/Y6026M/Y6026L

产品规格: 10T/50T/100T

目录价（元）:264/995/1474

推荐仪器：流式细胞仪（主推）、荧光显微镜

大包装询价


产品概述：
储存条件
4℃ 避光冷藏，请勿冻存。有效期见外包装。 

组分                   

规格

 Y6026S（10T）

 Y6026M（50T）

 Y6026L（100T）

A. 1×Annexin V 结合缓冲液

10 mL

50 mL

50 mL×2

B. YF®647A-Annexin V

50 μL

250 μL

500 μL

C. PI

100 μL

500 μL

1 mL


储存条件
4℃避光冷藏，请勿冻存。有效期见外包装。

光谱特性
YF®647A-Annexin V：Ex/Em = 650/665 nm
PI：Ex/Em = 535/617 nm (with DNA)

产品介绍

YF®647A-Annexin V和PI凋亡试剂盒提供了一种快速简便的方法，通过标记早期凋亡细胞（远红）和坏死或晚期凋亡的细胞（红色），用于检测细胞凋亡水平。产品可以使用流式细胞仪或其它荧光检测设备进行检测。
Annexin V（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，可于磷脂酰丝氨酸（PS）选择性结合。磷脂酰丝氨酸（PS）主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面，暴露在细胞外环境中。此时，使用远红荧光探针YF®647A标记的Annexin V，即YF®647A-Annexin V，与外翻的磷脂酰丝氨酸（PS）结合，就可用流式细胞仪或荧光显微镜直接检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。对于坏死或晚期凋亡的细胞，由于细胞完整性已经被破坏，YF®647A-Annexin V则可以进入胞浆与处于磷脂层内侧的PS结合，从而也使坏死细胞呈现远红外荧光。
碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种DNA结合染料，它可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞的细胞核。PI可以由488，532或546 nm的激光激发，呈现红色荧光。

注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. 为降低细胞凋亡进程，孵育过程可在冰上操作，但孵育时间至少延长至30 min。
3. 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后 1 h之内进行分析。
4. 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI 摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与 YF®647A-Annexin V的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用 EDTA，EDTA 会影响 Annexin V 与 PS 的结合。
5. 贴壁细胞用胰蛋白酶消化后，建议在最佳培养条件和培养基中恢复约30 min后染色，避免假阳性。
6. 为了避免洗涤细胞时损失细胞，在吸液时可以用大的 Tip 头套上小的 Tip 头吸液。
7. 染料的最佳使用浓度由具体实验要求确定。
8. 荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


说明书：

YF®647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: Y6026S/Y6026M/Y6026L 规格: 10T/50T/100T UE-Y6026S/Y6026M/Y6026L    
MSDS：
MSDS Y6026 YF®647A-Annexin V and PI Apoptosis Kit
常见问题解答：

◆为何染色结果显示细胞凋亡率过高？

1. 凋亡时间处理过长，使细胞全部死亡。建议重新摸索细胞凋亡条件，使细胞处于不同的凋亡状态。
2. 对于贴壁细胞，胰蛋白酶消化时间过长或机械刮擦细胞会暂时破坏质膜，使Annexin V能够与细胞膜胞内面上的磷脂酰丝氨酸结合，导致假阳性染色。建议在胰蛋白酶消化或机械刮擦细胞后，让细胞在最佳细胞培养条件和培养基中培养约30分钟，以恢复其膜完整性。

◆实验结果使用什么仪器观察？
实验结果可以通过流式细胞仪和荧光显微镜进行观察，但更推荐使用流式细胞仪。因为正常的细胞和凋亡的细胞膜上都有磷脂酰丝氨酸（PS），只是凋亡细胞膜外更多，可以结合更多的Annexin V，流式细胞仪更灵敏，可以区分出微小差异，将正常细胞与凋亡细胞分成不同的两群，但如果用荧光显微镜，可能观察不到这一差别，尤其是贴壁细胞。若要在成像测定中检测细胞凋亡，推荐使用SuperView™ 488 Caspase-3 Assay Kit for Live Cells。

◆流式细胞仪检测细胞凋亡，结果图中的各个象限代表什么状态的细胞？
左上角：Annexin V-/PI+，机械损伤细胞；右上角: AnnexinV+/PI+，晚期凋亡细胞或坏死；右下角：AnnexinV+/PI-，早期凋亡细胞；左下角：AnnexinV-/PI-，正常细胞。

◆这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗？
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸，包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA，由于RNA的干扰，用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时，凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 如果需要进行细胞周期检测，推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit（C6031）

◆各象限代表的细胞状态问题？
Q1：(AnnexinV-染料)-/PI+，此区域的细胞为坏死细胞。也可能有少数的晚期凋亡细胞在其中，甚至机械损伤的细胞也包含其中。Annexin V-/PI+越多，实验结果越不可信，建议实验中尽量控制这一象限细胞比例。
Q2: (AnnexinV+染料)+/PI+，此区域的细胞为晚期凋亡细胞或坏死。
Q3：(AnnexinV-染料)+/PI-，此区域的细胞为早期凋亡细胞。
Q4：(AnnexinV-染料)-/PI-，此区域的细胞为活细胞。

YF®647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: Y6026S/Y6026M/Y6026L 规格: 10T/50T/100T


◆假阳性问题？

1. 消化液中含有EDTA或消化时间过长引起的假阳性。Annexin V和PS的结合需要Ca2+，而EDTA是Ca2+螯合剂，使用含有EDTA的胰酶会造成假阴性。其次消化时间不宜过长，吹打细胞要轻柔，因为胰酶的过度消化和机械损伤都会引起细胞膜的损伤，造成假阳性。细胞消化下来后，建议在培养箱中在孵育30min，使细胞膜恢复完整性，避免假阳性，或者将细胞报讯在含2% BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
2. 如果样品来源于血液，必须去除血液中的血小板，因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，干扰实验结果。建议：可以含有EDTA的缓冲液200g离心去除血小板， 最后细胞多洗几遍，减小EDTA螯合钙离子产生的影响。
3. 神经细胞膜容易破坏外翻，导致假阳性，所以Annexin V/PI 双染法流式检测细胞凋亡不适用于神经细胞。
4. 诱导时间过长。一般情况下诱导几个小时就可以出现早期凋亡，因此通常不需要处理大于48小时以上，诱导时间过长会使营养物质耗尽，导致细胞状态差，假阳性结果偏高。

◆荧光染料选择的问题？
1. 实验样本是否带荧光，因为感染病毒或质粒转染的细胞往往带GFP荧光，GFP与YF488/FITC通道重叠，不能选择YF488/FITC标记的Annexin V，此时如果只有488 nm一根激光管可以用PE标记Annexin V，用7-AAD代替PI，若有633 nm激光管，可以改用YF647 Annexin V代替YF488。
2. 如果流式细胞仪带有488 nm和633 nm两个或以上激光管，首先考虑用APC或YF647标记 Annexin V，因为它和PI通道几乎不用考虑光重叠问题，可以减少调节补偿的烦恼，如果只有488 nm激光管则可选择YF488/FITC标记的Annexin V。
3. 处理因素是否带有荧光，本实验室就碰到过一个促凋亡药物Doxorubicin本身发红色荧光，对PI通道的检测造成严重干扰，而且浓度越大干扰越明显。这时建议选用A6079或Y6102 。

◆圈门问题？
1.要特别注意在FSC/SSC圈门时，所选细胞范围会对结果造成较大影响，所以在分析数据时，要把所有细胞都圈进FSC/SSC的门内，这样实验结果才会更可信。如图，使细胞群大概位于对角线上，并且细胞群较集中，群内细胞比例要在80%以上，如果细胞全部圈入，细胞比例才50%或者更低，说明细胞被压在了坐标轴上，这时要重新调节FSC和SSC。
2.贴壁细胞做Annexin V凋亡检测，通常分群不太规则，这时我们可以根据不加药细胞来画不规则的十字门。如上面图形的设门方式：
YF®647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: Y6026S/Y6026M/Y6026L 规格: 10T/50T/100TYF®647A-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒 货号: Y6026S/Y6026M/Y6026L 规格: 10T/50T/100T

◆免疫染色与凋亡染色顺序问题?
Annexin V凋亡染色可以和抗体一起对细胞进行染色吗？
可以，但建议Annexin V和其它抗体分开染色。例如Annexin V、PI和CD3、CD8同时标记淋巴细胞，可以先在PBS中标记CD3/CD8后洗去，再在Binding buffer（含钙离子）中标记Annexin V。

◆这款试剂盒可同时检测出凋亡率和细胞周期分布吗？
不可以。检测细胞凋亡时PI结合的是核酸，包括DNA和RNA。而PI用于检测细胞周期时需要只结合DNA，由于RNA的干扰，用细胞凋亡检测试剂盒测出来的细胞周期不准。同时，凋亡检测与周期检测时PI的工作浓度以及样本处理都不一样。 若果需要进行细胞周期检测，推荐Cell Cycle and Apoptosis Kit（C6031）

◆固定、冷冻、切片或解离的组织，还可以做流式细胞分析吗？
不建议做流式细胞分析。因为流式细胞分析要求细胞分散、单个，活性好，这些状态下的样本外膜上的PS及膜的完整性都受到了影响，因此无法依赖膜的完整性区分健康细胞和凋亡细胞。组织在冻存、复温的过程中会有大量的细胞死亡，同时经过这一过程的组织在分离成单个细胞的时候会形成许多细胞碎片，不宜上流式检测，所以用于流式检测的标本最好是新鲜标本，即取材后立即检测，效果最好。 液氮保存的◆组织块，可以将组织标本进行切片，然后做原位染色，观察组织细胞的凋亡。

◆Annexin V可以用在植物和细菌中吗？
Annexin V也可以用在植物和细菌中检测凋亡，具体实验步骤可参考相关文献。