细菌，支原体，真菌–细胞培养的最大威胁及解决方法

在科研实验中，微生物污染是细胞培养过程中面临的一项长期的严重威胁。侵入的支原体、细菌、酵母菌和真菌可以直接杀死您宝贵的细胞或者彻底改变培养细胞的特性，导致不准确的实验结果，既耗费时间又浪费资源。InvivoGen可以提供多种特异性的产品帮助您在科研实验中预防、检测和去除微生物污染。

# 高效、快速的抗微生物试剂

# 选择性强，对真核细胞无毒副作用

# 适用于细胞系，干细胞，原代细胞培养

保护您的细胞不受污染，从这里开始

*既能作用于支原体，也作用于其他类型的微生物。

为了保护细胞不受微生物的污染，首先要确保环境的无菌，用无菌的监测技术定期检测要培养的细胞和培养

试剂是否有微生物污染。某些特殊情况下（如原代细胞），可在培养基中添加抗生素避免污染。污染必须今早发现。细菌和真菌的污染通常可以通过光学显微镜和肉眼观察到，严重时，培养基会变浑浊。然而，裸眼看不到支原体污染，甚至也无法通过光学显微镜检测。因此，支原体污染可能被长期忽视并且只能借助专门的技术和手段来检测。当怀疑有微生物污染时，建议使用无假阳性、结果清晰可辨的检测方法。一旦发现有微生物污染，请立即隔离或者挽救已污染细胞并避免污染扩散。

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支原体的特征及污染对细胞功能的主要影响

支原体是最小和最简单的自我复制生命体。由于支原体体积小（100 nm），缺乏刚性的细胞壁，因此肉眼无法检测到支原体，它们可以透过一般过滤膜，并对很多抗生素都具有抵抗力。支原体污染是细胞培养中的一个主要问题，不止影响实验结果的有效性，更会影响细胞工程制药的质量和安全性。

支原体的特征：

支原体属于柔膜菌纲，其成员特征为缺乏细胞壁以及拥有多变的形态。支原体对包括原代细胞在内的所有真核细胞类型具有高度传染性。成百上千的支原体可以附着在一个细胞上，与细胞膜融合、繁殖，最终数量可以超过培养细胞1000倍。支原体可以彻底改变细胞特性和扭曲研究结果。而支原体脂蛋白可被Toll样受体2（TLR2）识别并激活免疫细胞。支原体没有细胞壁的特点使它们对常用的抗生素（如青霉素和链霉素）产生抗性。此外，它们的尺寸微小（~100nm），能够穿透过0.2μm的标准过滤膜。因此，我们需要采取预防措施来防止细胞培养物受到污染。

支原体污染对细胞功能的主要影响：

支原体与宿主细胞竞争营养素和代谢物前体。因此，它们能改变许多细胞功能，影响到细胞代谢和细胞生长，最终导致细胞死亡。通过对受污染的人源细胞进行微阵列分析，科学家发现支原体严重影响数百个基因的表达，当中包括受体、离子通道、生长因子和致癌基因。一旦与宿主细胞膜粘附或融合，支原体可以通过干扰信号级联和细胞因子产生，进一步损害细胞。这些有害效应会强烈干扰实验数据，导致研究结果无效，特别是当涉及表达TLR2的免疫细胞时，如巨噬细胞。

检测支原体的 5 大原因：

1.珍贵细胞系的损失

2.对数据可靠性和再现性的严重影响

3.大多数学术期刊都要求进行测试

4.全球高达35%的污染率，包括细胞库

5.时间和金钱的损失

如需了解更多或咨询相关产品，请联系Invivogen代理商-上海金畔生物

清除支原体

Plasmocin™和Plasmocure™ 可以广泛、快速地消除支原体污染物。

InvivoGen在过去40多年一直致力为科学界开发抗支原体的解决方案。Plasmocin™和Plasmocure™是独特的二合一抗支原体试剂，结合了两组来自不同家族的抗生素。它们作用迅速且几乎没有细胞毒性，让您能够保留珍贵的细胞系和实验数据 。

预防和清除支原体的试剂

Plasmocin™

• 适合去除广泛常见支原体菌株

• 快速：有效在2 周内拯救细胞培养物

• 安全：对哺乳动物细胞只有极小毒性

• 两种选择：预防用及治疗用

Plasmocin™是一种常用的支原体去除剂7-11，对所有胞外和胞内的常见支原体菌株都有效。为了达到最高效率，Plasmocin™含有两种抗生素：第一种阻止蛋白质合成，第二种阻止DNA复制。另外还有一种成分被转运到细胞内，确保受治疗后的细胞培养不会再次受到感染。因此，Plasmocin™在根除支原体和防止耐药菌株产生方面比市场上其他试剂更有效。

- Plasmocin™ prophylactic工作浓度经过优化，可定期用于预防支原体污染。

- Plasmocin™ treatment 能够在2周内去除支原体污染

清除支原体的备选试剂

Plasmocure™

• 适合用于带有PlasmocinTM抗药性支原体

• 快速：于2周内拯救细胞培养

• 安全：对哺乳动物细胞毒性低

• 可靠：支原体再生率极低

Plasmocure™是一种作为第二防线的抗支原体试剂，能有效地消除对Plasmocin™产生抗性的支原体12。它结合了两种抗生素，通过不同于Plasmocin™的机制治疗支原体。第一种抗生素与核糖体的50S亚基结合并

阻断肽基转移酶的活性。第二种抗生素结合到异亮氨酸-tRNA合成酶，阻止异亮氨酸并入支原体蛋白。这些特异性靶点在真核细胞中都不存在，确保Plasmocure™的低细胞毒性。

使用Plasmocure™治疗两周通常足以完全消除支原体。如果两周后没有完成支原体清除，可以再给药处理一周。清除过程可能出现细胞生长缓慢的情况，但当支原体被清除后，细胞系将会完全恢复。

去除支原体污染的小提示

1.最佳的处理浓度

我们建议按说明书的方案，使用 3 种浓度测试，以及一个不经任何处理的实验条件。

2.备用的细胞

保留没有处理过的培养物复制品和/或冻存品：

· 验证治疗效果

· 如有必要，以新的治疗条件重新测试。

3.替代的试剂

假若PlasmocinTM 未有达到预期功效，可尝试使用 PlasmocureTM （反之亦然）。

4.定期测试

 使用MycoStripTM或PlasmoTestTM尽早进行支原体检测，以及时去除污染。我们建议每约2-3 周为您

的细胞培养物测试一次。

如需了解更多详情，请咨询Invivogen代理商-上海金畔生物

支原体预防和去除试剂