Btk inhibitor 2
| 别名 | BGB-3111 analog |
| CAS | 1558036-85-3 |
| 分子式 | C24H25N5O3 |
| 分子量 | 431.49 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| SMILES | O=C(C1=C(N)N([C@H]2CN(C(C=C)=O)CCC2)N=C1C3=CC=C(OC4=CC=CC=C4)C=C3)N |
| 靶点 | Btk |
| 规格 | 5mg 10mg |
BMS-935177
| CAS | 1231889-53-4 |
| 分子式 | C31H26N4O3 |
| 分子量 | 502.56 |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | BMS-935177是一种有效的、可逆的BTK抑制剂，IC50为2.8 nM，具有良好的激酶选择性。它对BTK比对其他激酶如TEC, BMX, ITK, and TXK更有效力，选择性是其5-67倍。[1] |
| IC50 | BTK(Cell-free assay):2.8 nM; BLK(Cell-free assay):20 nM; BMX(Cell-free assay):24 nM[1] |
| In Vitro | BMS-935177对BTK的选择性比对SRC激酶家族成员高50倍以上。在Ramos B细胞中，BMS-935177抑制钙流动；在受到anti-IgM和anti-IgG刺激的外周血b淋巴细胞中，BMS-935177抑制CD69的细胞表面表达。但在受到CD40受体和配体刺激的B细胞中，BMS-935177对CD69的表达无影响。在PBMCs中，BMS-935177可有效地抑制TNF-α的生成，IC50为14 nM[1]。 |
| In Vivo | 在多种检测物种中，BMS-935177的血浆蛋白结合率高，在人体中，游离药物比率小于1%。在临床前检测中，无论是悬浮物还是溶液形式给药，BMS-935177具有良好的口服活性，尽管其水溶性差。以溶液形式给药，BMS-935177在大鼠、小鼠、狗、和食蟹猴中的口服生物利用度为84%-100%，而在单次静脉注射给药实验中，具有较低的体内清除率。在小鼠和大鼠中静脉注射2 mg/kg的剂量，BMS-935177的T1/2分别为4 h和5.1 h[1]。 |
| SMILES | O=C(C1=CC=C(C2=CC=CC(N3C=NC4=C(C=CC=C4)C3=O)=C2C)C5=C1NC6=C5C=CC(C(C)(O)C)=C6)N |
| 靶点 | Btk |
| 数据来源文献 | [1] De Lucca GV, et al. J Med Chem. 2016, 59(17):7915-35. |
| 规格 | 2mg 5mg 10mg |
BMS-935177是一种有效的、可逆的BTK抑制剂。
LFM-A13
| 别名 | (2Z)-2-氰基-N-(2,5-二溴苯 |
| CAS | 244240-24-2 |
| 分子式 | C11H8Br2N2O2 |
| 分子量 | 360 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | LFM-A13 是一种有效的 BTK，JAK2，PLK 抑制剂，可抑制 BTK，Plx1 和 PLK3 的活性，IC50 分别为 2.5 μM，10 μM 和 61 μM。[1-4] |
| In Vitro | LFM-A13有效抑制Plx1，IC50为10μM;也抑制BRK，BMX，FYN，IC50分别为267,281,240和215μM[4]。LFM-A13显著抑制BTK活性，IC50为6.2±0.3μg/ mL（= 17.2±0.8μM）。计算的BTK，JAK1，JAK3，IRK，EGFR和HCK的LFM-A13的Kis为1.4,110,148,31.6,166和214μM。 LFM-A13（200μM）显著增加ALL-1细胞对神经酰胺诱导的细胞凋亡的化学敏感性[1]。 LFM-A13（100μM）抑制Epo诱导的R10细胞中EpoR，Jak2，Btk，Stat5和Erk1/2的磷酸化。 LFM-A13（100μM）抑制Jak2，Tec和Btk的自磷酸化，而不是COS细胞中的Lyn激酶自磷酸化[2]。 |
| In Vivo | LFM-A13（50mg/kg，每周三次，ip）减弱小鼠中DMBA诱导的乳腺肿瘤发生。 LFM-A13单独或与紫杉醇组合显示出对BMBB/c小鼠中DMBA诱导的乳腺肿瘤发生率，平均肿瘤数量，平均肿瘤重量和大小的显著影响。 LFM-A13（50 mg/kg，每周三次，腹腔注射）显著降低PLK1，cyclin D1，CDK-4，P53和Bcl-2的表达，但增加小鼠p21，IκB，Bax和caspase 3的表达。 [3]。 LFM-A13（200 mg/kg）不会对大鼠造成血液学毒性。 LFM-A13（10或50mg/kg，ip）在乳腺癌的MMTV/Neu转基因小鼠模型中表现出剂量依赖性的抗肿瘤作用[4]。 |
| 激酶实验 | 将纯化的His6-Plx1（250ng）加入到含有1x激酶缓冲液（10mM Tris-HCl，pH7.5,10mM MgCl2和1mM TT），25μM冷ATP和1μCi的20μL反应混合物中[ γ-32P] ATP在不同浓度的LFM-A13存在下，范围为5μg/ mL（13.9μM）至100μg/ mL（278μM）。将反应混合物在室温下温育15-30分钟，并通过加入2×SDS-PAGE还原样品缓冲液终止自磷酸化。在冷ATP存在下进行平行实验。然后使用市售的抗Plk抗体对激酶反应进行免疫印迹。免疫印迹证实每个反应中存在相同量的Plx1蛋白。此外，我们还检测了LFM-A13对Plx1对底物磷酸化的影响。简而言之，首先将250ng纯化的Plx1与不同浓度的LFM-A13在室温下孵育1小时。孵育1小时后，将含有反应混合物的试管置于冰上，加入底物，GST-Cdc25肽（254-316）（200ng），激酶缓冲液和[γ-32P] ATP并激活反应允许在室温下进行15分钟。用抗Cdc25抗体的免疫印迹用于证实在每种反应混合物中存在等量的底物肽。在测定中使用抗Plk抗体，谷胱甘肽-S-转移酶（GST）和ECL试剂盒的多克隆抗体。 LFM-A13的人PLK3抑制模式在滴定实验中使用增加浓度的[γ-32P] ATP和纯化的N-末端His6-标记的重组人PLK3，残基19-301，在Sf21昆虫细胞中由杆状病毒表达来检测。简言之，在25μL的最终反应体积中，将PLK3（h）（5-10mU）与8mM MOPS，pH 7.0,0.2mM EDTA，2mg/mL酪蛋白，10mM乙酸镁和[γ]一起温育。 -32P-ATP]（比活度约为500cpm/pmol，根据需要浓缩）。通过添加MgATP混合物引发反应。在室温下孵育40分钟后，通过加入5μL的3％磷酸溶液终止反应。然后将10微升反应物点在P30滤垫上，在75mM磷酸中洗涤3次，每次5分钟，在甲醇中洗涤一次，然后干燥并闪烁计数。 LFM-A13的PLK3的Ki由底物的磷酸化强度（1/v）与抑制剂（i）的浓度（即LFM-A13）的倒数图计算[4]。 |
| SMILES | BrC1=C(NC(/C(C#N)=C(C)O)=O)C=C(Br)C=C1 |
| 靶点 | Btk |
| 动物实验 | 将荷瘤小鼠随机分配给载体对照组或治疗组。肿瘤生长通过每周三天用三维卡尺测量肿瘤来确定，并表示为立方毫米（mm 3）的肿瘤体积。使用长椭球体的体积公式计算肿瘤体积，V = 4/3×3.14×长度/ 2×宽度/ 2×深度/ 2。由于第0天转基因肿瘤体积的大的异质性，将每只小鼠的肿瘤生长标准化为该特定肿瘤的起始体积。因此，每只小鼠也作为其自身对照，并且产生肿瘤生长曲线以显示肿瘤体积的变化率。每周两次腹膜内注射LFM-A13（10或50mg/kg），每周连续5天。在第1,3,5,8,10和12天以6.7mg/kg的剂量水平腹膜内施用紫杉醇。吉西他滨在第1,8和15天以33.7mg/kg的剂量水平施用。将大鼠[4] Lewis大鼠保持在含有高压灭菌食物，水和寝具的微量过滤笼中。以多剂量水平静脉内注射LFM-A13治疗Lewis大鼠。 LFM-A13以含有10％DMSO作为载体的0.5mL推注给药。在第7天选择性地处死动物以通过评估多个器官中毒性病变的存在来确定LFM-A13的毒性。在用氯胺酮：甲苯噻嗪麻醉后通过心内穿刺收集血液并立即肝素化。使用HESKA Vet ABC-Diff血液学分析仪测定血细胞计数（红细胞[RBC]，白细胞[WBC]和血小板[Plt]）。在通过手动差异计数确定嗜中性粒细胞和淋巴细胞的百分比后，从WBC值计算绝对中性粒细胞计数（ANC）和绝对淋巴细胞计数（ALC）。对于载体对照和LFM-A13处理合并实验室参数的值，并且对于每个参数，使用学生t检验（载体与LFM-A13处理，不等方差，双尾）评估平均值之间的差异的统计学显著性。计算在Excel电子表格中执行。为了确定显著效果，使用Bonferroni方法调整p值以控制随机变化。对于组织病理学研究，将福尔马林固定组织脱水并通过常规方法包埋在石蜡中。制备具有固定的4-5微米组织切片的载玻片，并用苏木精和曙红染色。 |
| 数据来源文献 | [1]. Mahajan S, et al. Rational design and synthesis of a novel anti-leukemic agent targeting Bruton’s tyrosine kinase (BTK), LFM-A13 [alpha-cyano-beta-hydroxy-beta-methyl-N-(2, 5-dibromophenyl)propenamide]. J Biol Chem. 1999 Apr 2;274(14):9587-99. [2]. van den Akker E, et al. The Btk inhibitor LFM-A13 is a potent inhibitor of Jak2 kinase activity. Biol Chem. 2004 May;385(5):409-13. [3]. “Sahin K, et al. LFM-A13, a potent inhibitor of polo-like kinase, inhibits breast carcinogenesis by suppressing proliferation activity and inducing apoptosis in breast tumors of mice. Invest New Drugs. 2017 Nov 15.” [4]. Uckun FM, et al. Anti-breast cancer activity of LFM-A13, a potent inhibitor of Polo-like kinase (PLK). Bioorg Med Chem. 2007 Jan 15;15(2):800-14. Epub 2006 Oct 26. |
| 规格 | 5mg 10mM*1mL in DMSO 10mg 50mg |
LFM-A13 是一种有效的 BTK，JAK2，PLK 抑制剂。
Spebrutinib
| MDL | MFCD25976876 |
| 别名 | CC-292; AVL-292; ?LMK-435 |
| CAS | 1202757-89-8 |
| 分子式 | C22H22FN5O3 |
| 分子量 | 423.44 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | Spebrutinib 是共价，高选择性和口服活性的 Btk 抑制剂，IC50 为0.5 nM。[1] |
| In Vitro | 大量分析显示，Ramos细胞中Spebrutinib剂量反应的Btk占有率EC50（EC50 = 6 nM）与Spebrutinib对Btk激酶抑制的细胞EC50直接相关（EC50 = 8 nM）。此外，Spebrutinib抑制Ramos细胞中90％Btk活性的浓度为35 nM，而90％Btk占据所需的Spebrutinib浓度为39 nM [1]。 |
| SMILES | COCCOC1=CC=C(NC2=NC=C(F)C(NC3=CC=CC(NC(C=C)=O)=C3)=N2)C=C1 |
| 靶点 | Btk |
| 细胞实验 | 将细胞在无血清RPMI培养基中孵育1-1.5小时。将分离的人B细胞与Spebrutinib一起孵育，终浓度为0.001,0.01,0.1和1μM。将Ramos细胞与0.1nM-3μMSpebrutinib一起温育。然后将细胞在化合物存在下于37℃温育1小时。孵育后，将细胞离心并重悬于100μL无血清RPMI中，并加入5μg/mLα-人IgM刺激BCR。将样品离心，在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中洗涤，并在100μL细胞提取缓冲液加1:10（v/v）PhosSTOP磷酸酶抑制剂和1:10（v/v）完全蛋白酶抑制剂中裂解[1]。 |
| 数据来源文献 | [1]. Evans EK, et al. Inhibition of Btk with CC-292 provides early pharmacodynamic assessment of activity in mice and humans. J Pharmacol Exp Ther. 2013 Aug;346(2):219-28. |
| 规格 | 5mg 10mg 50mg |
Spebrutinib是高选择性的 Btk 抑制剂。
CGI1746
| 别名 | N-[3-[4,5-二氢-4-甲基-6-[[4-(4-吗啉基羰基)苯基]氨基]-5-氧代-2-吡嗪基]-2-甲基苯基]-4-(叔丁基)苯甲酰胺 |
| CAS | 910232-84-7 |
| 分子式 | C34H37N5O4 |
| 分子量 | 579.69 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥96% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | CGI-1746 是一种有效的，高选择性的 Btk 抑制剂，IC50 值为 1.9 nM[1-2]。 |
| IC50 | 1.9 nM (Btk)[1-2] |
| In Vitro | CGI1746特异于Btk，选择性比Tec和Src家族激酶高1,000倍。在无ATP竞争结合测定中，Btk的解离常数为1.5nM。 CGI1746以新的结合模式抑制Btk活性，其稳定非活性的非磷酸化酶构象。 CGI1746抑制酶活化所必需的自身和转磷酸化步骤。 CGI1746完全抑制抗IgM诱导的鼠和人B细胞增殖，IC50分别为134 nM和42 nM，但对抗CD3和抗CD28诱导的T细胞增殖没有影响。 CGI1746有效抑制从四个人供体的扁桃体中分离的CD27 + IgG + B细胞的增殖，平均IC50为112nM。在巨噬细胞中，CGI1746消除了FcγRIII诱导的TNFα，IL-1β和IL-6的产生。 CGI1746有效抑制TNFα，IL-1β，并且在较小程度上抑制用固定化或可溶性免疫复合物刺激的人单核细胞中的IL-6（IC50高3到8倍）[1]。在相同的药物浓度下，CGI-1746不会杀死细胞以及不可逆的BTK抑制剂。 CGI-1746显著降低BTK-A和BTK-C蛋白的磷酸化，表明以与BTK-A类似的方式抑制BTK-C同种型的自磷酸化。 CGI-1746不会以与依鲁替尼或AVL-292相同的浓度杀死LNCaP或DU145前列腺癌细胞，但它在SH3结构域中对酪氨酸233的BTK磷酸化具有相似的抑制作用[2]。 |
| In Vivo | CGI1746消除B细胞依赖性关节炎。 CGI1746治疗（100mg/kg，sc，每日两次给药）导致总体临床关节炎评分的显著抑制（97％）。在被动抗胶原II抗体诱导的关节炎（CAIA）模型中，CGI1746处理在mRNA和蛋白质水平上显著降低TNFα，IL-1β和IL-6以及MCP1和MIP-1α。 CGI1746显示出与TNFα阻断相当的功效，并显著降低了已建立关节炎的小鼠或大鼠的临床评分以及关节炎症[1]。 |
| SMILES | O=C(C1=CC=C(C=C1)C(C)(C)C)NC2=CC=CC(C(N=C3NC4=CC=C(C=C4)C(N5CCOCC5)=O)=CN(C3=O)C)=C2C |
| 靶点 | Btk |
| 细胞实验 | 将每孔5×103个DU145细胞或104个LNCaP细胞在96孔板上生长24小时，用1至30μMBTK抑制剂处理。 72小时后用2.5％甲醛固定细胞，并用Hoechst 33342染色。用DMSO处理对照细胞。使用具有20X物镜的IN Cell Analyzer 2200高内容成像系统获取细胞图像。每个实验的每个单孔成像至少9个视野。使用IN Cell Investigator 3.4高含量图像分析软件确定细胞数并进行统计。每个实验重复3次，数据表示为平均值±SD。 |
| 数据来源文献 | [1]. Di Paolo, Julie A. et al. Specific Btk inhibition suppresses B cell- and myeloid cell-mediated arthritis. Nature Chemical Biology (2011), 7(1), 41-50 [2]. Kokabee L, et al. Bruton’s tyrosine kinase is a potential therapeutic target in prostate cancer. Cancer Biol Ther. 2015;16(11):1604-15. |
| 规格 | 5mg 10mM*1mL in DMSO 10mg 50mg |
CGI-1746 是一种有效的，高选择性的 Btk 抑制剂。