2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上样缓冲液 (含DTT)

2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上样缓冲液 (含DTT)

货号:
P1325

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 Tris-Tricine-SDS-PAGE Loading buffer,2×(with DTT)
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
单位
规格 5ml 10ml

产品简介:

本产品适用于Tricine-SDS-PAGE电泳时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,考马斯亮蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。考马斯亮蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

使用说明:    1.请按每20微升蛋白样品加入20微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。    2.混匀后,100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。    3.冷却至室温后,离心数秒后,混匀再离心30秒取上清直接上样即可。

注意事项:    本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2×Taq PCR MasterMix for PAGE(含染料)

2×Taq PCR MasterMix for PAGE(含染料)

货号:BL631A

规格:1ml

品牌:biosharp

商品详情:

 

2×Taq PCR Master Mix for PAGE(含染料)

产品编号

产品名称

规格

BL631A

2×Taq   PCR Master Mix for PAGE(含染料)

1 ml

BL631B

2×Taq   PCR Master Mix for PAGE(含染料)

5×1 ml

 

产品简介:

本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPsMg2+以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物,使用时只需再加入模板和引物并用水补足体系至反应浓度为,即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出“A”碱基,可直接克隆于T载体中。本产品经过特殊优化处理,针对丙烯酰胺凝胶电泳背景更低,观察效果更好。

 

产品特点:

直接上样:含染料PCR产物可直接上样进行凝胶电泳分析;

高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性;

无基因组污染:扩增产物纯度高;

高效扩增:优化的缓冲体系发挥更强的扩增性能;

重复性好:体系预混合,减小加样误差,降低污染机会;

批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测。

 

使用说明:

1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。

2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:


20μl反应体系

2×Master   Mix

10   μl

上游引物(10μM

0.4-1   μl

下游引物(10μM

0.4-1   μl

模板

×   μl*

补至20μl

*:模板量:10ng-1ug 基因组DNA1-30ng 质粒。

注:以上为常规PCR体系,仅供参考,实际操作可根据具体情况适当调整反应体系。

 

3、快甩离心将反应液收集到管底。

4PCR仪上执行以下程序:

 

 

 

步骤

温度

时间

循环数

预变性

94

2 min

1

变性

94

30 sec

25-35*

退火

55℃-65℃*

30 sec

延伸

72

60s/kb

最后延伸

72

5-10 min

1

注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,根据比例放大或缩小体系,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

5、电泳检测:含染料的2×PCR Master Mix for PAGE可以直接上样。

 

注意事项:

1、   需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。

2、   应根据实验目的选择合适循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。

3、   根据引物 Tm 值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不出来。

4、   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20保存两年有效;4℃可稳定贮存6个月。经常使用时,一旦融化后请4贮存,尽量避免反复冻融。

注:如保存温度长期低于-30℃或遇干冰急冻,本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。

货号 BL631A
规格 1ml
品牌 biosharp
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4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)

4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)

货号:
S1051

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 SDS-PAGE Separating Gel Buffer,4×(pH 8.8)
储存条件 RT,有效期1年
规格 100ml 500ml
本试剂是由Tris和SDS混合而成的,主要用于SDS-PAGE凝胶(变性聚丙烯酰胺凝胶)制备实验。配制分离胶时,10ml制胶体系中加入2.5ml(4倍稀释)。
组分                              浓度
Tris-HCl(pH=8.8)    1.5mol/L
SDS                              0.4%(W/V)

注意事项:若有白色沉淀析出,可置于37℃水浴,析出溶解后再使用。

6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

货号:BL563B

规格:125块/盒

品牌:BL563B

SDS-PAGE Colorful Gel Fast Preparation Kit, with dye

SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL563B

6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

125块

BL564B

8% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

125块

BL565B

10% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

125块

BL566B

12% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

125块

BL567B

15% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

125块

 

产品简介:

蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者将蛋白样品进行浓缩,后者则根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同分离不同大小的蛋白质。为简化制备SDS-PAGE凝胶的操作步骤,本产品提供了快速制备浓缩胶和分离胶的预混溶液,配胶过程无需计算所需溶液量,无需稀释;无需额外添加TEMED;只需加入改良型促凝剂即可凝胶,可快速灌制多块凝胶,使制胶过程更加便捷。试剂盒中配备了彩色上层胶缓冲液,加入浓缩胶后,点样孔易辨,点样方便;更易区分含不同样品;所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续实验。

本试剂盒可制备125块SDS-PAGE凝胶,具体可以配制的数量与凝胶的厚度及凝胶的尺寸有关。

产品组份:

组分

规格

彩色上层胶缓冲液

80 mL

上层胶溶液

80 mL

下层胶缓冲液

250 mL

下层胶溶液

250 mL

改良型促凝剂

10 mL

 

使用方法:

一.分离胶制备:(以配置一块mini胶为例0.75/1.0/1.5 mm)

1、等体积吸取下层胶溶液和下层胶缓冲液,混匀,即各吸取2/2.7/4 mL。

2、对应加入40/60/80 μL的促凝剂,混匀。

3、将配置好的溶液,注入制胶玻璃板中(备注:此溶液配置为过量,留少许于小量杯中,以判断凝胶状态),加入适量水或醇覆盖于下层胶之上,待下层胶凝固后,倒去上层水或醇,用滤纸吸去多余的水或醇(备注:当水或醇和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固,大约15 min左右,以具体实际情况为准)。

二.浓缩胶制备:

1、等体积吸取上层胶溶液和上层胶缓冲液混匀,即各吸取0.5/0.75/1 mL。

2、对应加入10/15/20 μL的促凝剂,混匀。

3、将配置好的溶液,注入制胶玻璃板中,插入梳子,待上层胶凝固后拔取梳子(大约15 min左右,以具体实际情况为准),便可进行上样电泳。

 

注意事项:

1、请根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,具体可参考下表

 

SDS-PAGE分离胶浓度

最佳分离范围

6%

50-150kD

8%

30-90kD

10%

20-80kD

12%

12-60kD

15%

10-40kD

 

2、改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。

3、本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED。

4、配胶溶液中含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

5、由于颜料的理化性,使用前请摇匀。

6、当室温过高时,建议促凝剂用量减半或酌情减少(如推荐使用量的1/4等),避免胶凝过快。

7、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

改良型促凝剂需-20℃保存,其他成分可保存于4℃,有效期一年。

货号 BL563B
规格 125块/盒
品牌 BL563B
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6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

货号:BL563A

规格:30-50块

品牌:Jinpan

6% SDS-PAGE Gel Fast Preparation Kit, with dye

6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

产品编号

产品名称

规格

BL563A

6% SDS-PAGE彩色凝胶快速制备试剂盒

30-50

 

产品简介

蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者将蛋白样品进行浓缩,后者则根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同分离不同大小的蛋白质。 为简化制备SDS-PAGE凝胶的操作步骤,本产品提供了快速制备浓缩胶和分离胶的预混溶液,配胶过程无需计算所需溶液量,无需稀释;无需额外添加TEMED;只需加入改良型促凝剂即可凝胶,可快速灌制多块凝胶,使制胶过程更加便捷。试剂盒中配备了红色染料,加入浓缩胶后,点样孔易辨,点样方便;更易区分含不同样品;所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续实验。

本试剂盒可制备30-506% SDS-PAGE凝胶,具体可以配制的数量与凝胶的厚度及凝胶的尺寸有关。

 

产品组成:

组分

规格

6%分离胶溶液

100ml

6%分离胶缓冲液

100ml

浓缩胶溶液

40ml

浓缩胶缓冲液

40ml

改良型促凝剂

1ml×3

浓缩胶染料(红色)

250μl

 

使用方法:

.分离胶制备:

按下表配制所需分离胶,可根据需要酌情增减,但不要改变分离胶溶液和分离胶缓冲液加入比例。

 

6%分离胶配制

4ml

8ml

15ml

20ml

25ml

6%分离胶溶液

2ml

4ml

7.5ml

10ml

12.5ml

6%分离胶缓冲液

2ml

4ml

7.5ml

10ml

12.5ml

改良型促凝剂

40μl

80μl

150μl

200μl

250μl

注:配制时,待分离胶溶液和分离胶缓冲液充分混匀后,再加入改良型促凝剂,促凝剂加入后尽量迅速混合并倒胶,倒胶后,加入适量水或异丙醇覆盖于分离胶之上。

.浓缩胶制备:

待分离胶凝固后,按下表配制所需分离胶,可根据需要酌情增减,但不要改变浓缩胶溶液和浓缩胶缓冲液加入比例。

 

浓缩胶配制

2ml

3ml

5ml

8ml

10ml

浓缩胶溶液

1ml

1.5ml

2.5ml

4ml

5ml

浓缩胶缓冲液

1ml

1.5ml

2.5ml

4ml

5ml

改良型促凝剂

20μl

30μl

50μl

80μl

100μl

红色染料

2.5μl

4μl

6.5μl

10μl

13μl

注:配制时,待浓缩胶溶液和浓缩胶缓冲液充分混匀后,加入改良型促凝剂混匀,然后再加入红色染料混匀即可,混匀后尽量迅速倒胶,灌胶后,插入梳齿。(由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀,用量可适当增加以提高效果)

等浓缩胶凝固后,把梳子拔去即可用于后续加样电泳。

 

注意事项

1、改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整。

2、本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加速凝胶,临配胶前可按需补充适量TEMED   

3、配胶溶液中含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

4、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:  

改良型促凝剂需-20℃保存,其他成分可保存于4℃,有效期一年。

 

保存条件:

-20℃保存,有效期一年。

货号 BL563A
规格 30-50块
品牌 Jinpan
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彩色PAGE快速凝胶试剂盒(8%)

彩色PAGE快速凝胶试剂盒(8%)

产品简介
本产品采用上层胶和下层胶的预混配方,无需传统配胶方式中计算多组分加液量的过程,只需等体积混匀,并加入试剂盒中的改良型促凝剂即可凝胶,简便快捷。 所配的上层胶带有颜色(红色或绿色),加样孔清晰易辨,方便点样。 本产品配套提供的改良型促凝剂,具有更好的稳定性和催化效能,配胶过程中无需额外添加TEMED,避免难闻气味。同时促凝剂保存方便,只需4℃保存即可,开盖后可保持三月以上有效性。

产品组分

试剂盒组分名称 规格
彩色—上层胶缓冲液 80 ml
上层胶溶液 80 ml
下层胶缓冲液 250 ml
下层胶溶液 250 ml
改良型促凝剂 10 ml

以0.75mm凝胶为例,本试剂大约可制备125块胶。

产品特点
1. 彩色上层胶:可制备红色或绿色上层胶,加样孔清晰易辨,方便上样及区分不同凝胶。
2. 配胶过程短:可快速配置一块或多块彩色PAGE凝胶,无需复杂计算及配置,只需将等体积凝胶溶液及缓冲液混合,并加入少许促凝剂即可,操作简便。
3. 稳定且环保:促凝剂无TEMED成分,避免难闻臭味,并且更加稳定,4度即可稳定保存。凝胶均匀,弹性好,不易碎,电泳蛋白带型美观。
4. 条带清晰:小分子蛋白条带更清晰。

制胶流程(以一块 0.75/1.0/1.5 mm 的mini胶为例) 
1. 取等体积 下层胶溶液 和 下层胶缓冲液,各 2.0/2.7/4.0 mL,混匀;
2. 向步骤1的混合溶液中加入 40/60/80 μL的 改良型促凝剂,混匀;(注意,室温高于20℃时,改良型促凝剂添加量可减半,防止凝胶过快凝结)
3. 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可(注意:此溶液为过量, 请勿全部注入, 可留少许于配胶杯中,以判断胶凝固状况),加入适量水或醇(如异丙醇、正丁醇等)覆盖于下层胶之上; 
4. 待下层胶凝固后(约5~10 min),倒去上层水或醇并用滤纸条吸干残余水或醇;注意:当水(醇)和胶之间有一条折射线时, 说明胶已凝固。
5. 取等体积 上层胶溶液 和 彩色上层胶缓冲液,各 0.5/0.75/1.0 mL,混匀;注意: 由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀
6. 向步骤5的混合溶液中加入 10/15/20 μL 的 改良型促凝剂,混匀;(注意,室温高于20℃时,改良型促凝剂添加量可减半,防止凝胶过快凝结)
7. 将步骤6的混合溶液注入制胶玻璃板中,插入梳齿;
8. 待上层胶凝固后(约10~15 min),拔去梳齿即可用于电泳。 注意:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液 

保存条件
本产品常温运输; 保存于 4℃(改良型促凝剂保存于-20℃),一年;(改良型促凝剂4℃保存可保存3个月)