Hoechst 33258，也称为bisBenzimide H 33258（双苯酰亚胺H33258），是一种通过荧光显微镜和流式细胞仪进行DNA检测的蓝色荧光探针。Hoechst 33258可用于活细胞或固定细胞，也适用于流式细胞术对细胞周期的分析和DNA浓缩的监测。虽然Hoechst 33258比其他衍生物（如Hoechst 33342）的细胞膜渗透性差些，但其能通过绘制发射光强度与DNA含量的标准曲线（a standard emission-to-content curve）来定量测量DNA含量。Hoechst 33258的最大激发波长是346nm，最大发射波长为460nm；与双链DNA结合后的最大激发波长为352nm，最大发射波长为461nm。
        本品以粉末形式提供，溶于水，溶解度可达10mg/ml。用于细胞核染色，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

≥98%

储存液配制：
用双蒸水溶解，溶解度高达10mg/ml，根据实际情况配制所需浓度的储存液如5mg/ml。储存液2-8ºC避光保存，至少1个月有效。
【注意】：本品用磷酸盐缓冲液溶解会出现沉淀。
使用方法：
1、工作液配制
用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作浓度（0.5-10μg/ml）。
2、固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33258染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行Hoechst 33258染色。
（1）对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5min。
（2）吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5min。
（3）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。
3、活的细胞或组织染色
（1）细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板，一个孔通常需加入1ml染色液；对于96孔板，一个孔通常需加入100μl染色液。
（2）在37℃培养细胞10～20min。
（3）用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
（4）直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=352/461nm。

-20℃，避光干燥保存，有效期3年。

Ex/Em：346/460 nm；352/461 nm（Hoechst 33258-DNA）

Hoechst 33258细胞核探针；双苯并咪唑 H 33258; Bisbenzimide H 33258

黄色至深黄色粉末

溶于水（10 mg/ml）