S-羧甲基-L-半胱氨酸 标准品
| 英文名称 | S-Carboxymethyl-L-Cysteine |
| CAS | 638-23-3 |
| 分子式 | C5H9NO4S |
| 分子量 | 179.19 |
| 储存条件 | RT |
| 规格 | 100mg |
【简单介绍】
【详细说明】
SuperSep Phos-tag™ 预制胶蛋白研究-Wako富士胶片和光
| 供货周期 | 一个月以上 | 应用领域 | 生物产业 |
|---|
SuperSep Phos-tag™ 预制胶
Phos-tag™ 是一种预制胶，预先加入了50 μmol/L的Phostag™ Acrylamide，打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子，在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好，得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
SuperSep Phos-tag™ 预制胶
SuperSep Phos-tag™ 是研究蛋白磷酸化的方法，无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记。
◆SuperSep Phos-tag™
Phos-tag™ 是一种预制胶，预先加入了50 μmol/L的Phostag™ Acrylamide，打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子，在中心凝胶缓冲液中保存稳定性很好，得到的带条结果也很整齐。
磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白作为不同条带分离。
分离后，胶可用于考马斯亮蓝染色，免疫印迹和质谱实验。
◆Phos-tag™ SDS-PAGE的原理
◆在HighWire Search 上搜索到的论文数
◆运用
利用p35的丙氨酸突变体确定Cdk5 激活p35的磷酸化位点
p35常见的磷酸化位点是Ser8和Thr138。但是Ser8和Thr138位点往往会发生丙氨酸突变，产生3种突变体（Ser8突变体：S8A，Thr138突变体：T138A，Ser8和Thr138双突变体：2A）。这3种突变体、野生型p35、Cdk5和没有激酶活性的Cdk5都来源于COS-7细胞。这些细胞裂解液用Phos-tag™ SDS-PAGE和Western blotting 进行检测（检测抗体：p35抗体）。
100 μM Phos-tag ™ 丙烯酰胺, 7.5% 聚丙烯酰胺凝胶
可明确磷酸化位点和条带迁移率的关系！
– 泳道1（条带L2和L4）和泳道5（条带M1）：p35在Cdk5的作用下发生了磷酸化；
– 泳道1（条带L2和L4）和泳道3（条带L2和L4）：在无激酶活性Cdk5的作用下，大约有一半p35蛋白在Thr138位点
发生磷酸化，同样在138位发生突变的p35蛋白亦是如此。
– 泳道5 （条带M1）和泳道6（条带L3和L4）：Ser8和Thr138是主要的磷酸化位点；
– 泳道5（条带M1）、泳道7（条带L1和L2）和泳道8（条带M2）：条带M1是Ser8和Thr138都发生磷酸化的条带；
条带M2是只有Ser8磷酸化的条带；条带L1和L2是只有Thr138磷酸化的条带。
※ 条带L1和L3中的X 是不确定哪个位点发生磷酸化的条带；
※ 条带L4是非磷酸化的p35。
【结果提供】
理化学研究所 脑科学综合研究中心 回路功能研究核心 记忆功能研究团队 细川智永（Dr. T. Hosokawa）
首都大学东京 理工学研究科 生命科学专业 神经分子功能研究室 久永真市（Dr. S. Hisanaga）
检测含有Dnmt1磷酸化激酶的片段
我们可以确定在片段中含有目的激酶！
① 采用亲和色谱法从鼠脑提取液中纯化GST-Dnmt1（1-290）结合蛋白
② 使用0.3 M 和1 M NaCl 的DNA 纤维素柱洗脱得到目的蛋白
③ GST-Dnmt1（1-290）作为体外激酶实验的反应底物
④ Phos-tag ™ SDS-PAGE 用于Western blotting，确定迁移条带中每个片段的激酶活性
【结果提供】
高知大学 综合研究中心 生命、功能物质部门 实验实习机器设施 杉山康宪（Dr. Y. Sugiyama）
香川大学 农学部 应用生物科学科 动物功能生化学研究室 龟下勇（Dr. I. Kameshita）
二维电泳中的应用：分析hnRNP K磷酸化异构体
小鼠巨噬细胞J774.1 经LPS 刺激后，裂解细胞，经过免疫沉淀法分离得到hnRNP K。在二维电泳中，一维是IPG 胶，二维是Phos-tag ™ SDS-PAGE，可分离hnRNP K 的异构体。利用质谱仪，可以确认不同的点代表不同的亚型或修饰蛋白。
同一个等电点的位置上，不同位点发生磷酸化都可以被区分开来
（例: spots 6 vs. 8 and spots 4 vs. 7）
【结果提供】
横滨市立大学 生命纳米系统科学研究科 生物体超分子系统科学专业 木村弥生（Dr. Y. Kimura）、平野久（Dr. H. Hirano）
理化学研究所RCAI 小原收
◆备注
样品制备：
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感，尤其是螯合剂，钒酸，无机盐，表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。
转膜前处理：
另一个必须的步骤是在转膜前，用EDTA去除凝胶中的金属离子（Mn2+ 或者Zn2+）；
该步骤可提高蛋白的转膜效率。
● 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
● 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer，至少20分钟，温和摇晃。更换新缓冲液，重复3次。
● 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer，10分钟，温和摇晃。
● 转膜操作*。
* 建议用湿法转膜，以提高转膜效率。
◆质量控制
每一批SuperSep Phos-tag™，出厂前均根据其产品规格进行测试，以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白，以及他们的分离成都在正常参数内。
◆保存温度
2-10℃
◆产品信息
用于Bio-Rad伯乐电泳仪
|
产品编号 |
产品名称 |
电泳仪 |
规格 |
|
198-17981 |
Phos-tag™ 预制胶50μmol/l，7.5%，17孔，BioRad型 |
Mini-PROTEAN® Tetra Cell (Bio-Rad Laboratories, Inc.) |
5 块 |
|
195-17991 |
Phos-tag™ 预制胶50μmol/l，12.5%，17孔，BioRad型 |
5 块 |
用于Life Technologies电泳仪
|
产品编号 |
产品名称 |
电泳仪 |
规格 |
|
192-18001 |
Phos-tag™ 预制胶50μmol/l，7.5%，17孔，Life Technologies型 |
XCell SureLock® Mini-Cell (Life Technologies, Inc.)
|
5 块 |
|
199-18011 |
Phos-tag™ 预制胶50μmol/l，12.5%，17孔，Life Technologies型 |
5 块 |
用于Wako EasySeperator电泳仪
| 产品编号 | 产品名称 | 凝胶浓度 | 孔数 | 包装 |
| 192-17401 | Phos-tag™ 预制胶50 μmol/L | 6.0% | 13孔 | 5块 |
| 199-17391 | 6.0% | 17孔 | 5块 | |
| 195-17371 | 7.5% | 13孔 | 5块 | |
| 192-17381 | 7.5% | 17孔 | 5块 | |
| 193-16711 | 10.0% | 13孔 | 5块 | |
| 190-16721 | 10.0% | 17孔 | 5块 | |
| 195-16391 | 12.5% | 13孔 | 5块 | |
| 193-16571 | 12.5% | 17孔 | 5块 | |
| 193-16691 | 15.0% | 13孔 | 5块 | |
| 196-16701 | 15.0% | 17孔 | 5块 | |
| 197-16851 | 17.5% | 13孔 | 5块 | |
| 194-16861 | 17.5% | 17孔 | 5块 |
◆相关产品
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 |
| 058-07681 | Phos-tag预制凝胶的配套电泳槽 | 1 set |
SuperSep Phos-tag™ 预制胶
80μm AxySeal封板膜，用于组织培养、短期储存和运输，未灭菌
| 单位 | 盒 |
| 英文名称 | 80μmAxySealSealingFilmforTissueCulture,Short-TermStorageandTransportation,Nonsterile |
| 规格 | 100张/盒，5盒/箱 |
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产品名称：
|
nalgene放水口大瓶 |
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产品型号：
|
2319-0020C |
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产品特点 |
| ● 聚丙烯瓶体，聚丙烯放水口和螺旋盖，TPE 垫圈● 用于存储和分配溶液、培养基等，是保存无菌水的理想选择● 可在重新填注前进行高温高压灭菌，以防止藻类或细菌的生长● 极好的化学耐受性● 盖尺寸为 83B● 带有 1 加仑或 5 升的刻度标记● 放水口部位与瓶子为整体模制而成● 结构坚固，防漏性好● 注意：高温高压前，请卸下放水口 |
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产品详细信息： |
|
nalgene放水口大瓶 |
【简单介绍】
【详细说明】
麦角甾醇 标准品
| EC | EINECS 200-352-7 |
| MDL | MFCD00003623 |
| 别名 | 红霉素C; |
| 英文名称 | Ergosterol |
| CAS | 57-87-4 |
| 分子式 | C28H44O |
| 分子量 | 396.65 |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 纯度 | HPLC≥98% |
| 外观（性状） | Off-white Powder |
| SMILES | C[C@H](C(C)C)/C=C/[C@@H](C)[C@H]1CC[C@@]2([H])C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@]3([H])CC[C@]12C |
| 规格 | 100mg |
3,4-Dimethoxychalcone 3,4-二甲氧基查耳酮 标准品
| CAS | 5416-71-7 |
| 分子式 | C17H16O3 |
| 分子量 | 268.320007 |
| 储存条件 | Store in dry and dark place. |
| 纯度 | HPLC ≥95% |
| 单位 | 瓶 |
| 货期 | 4周 |
| 规格 | 100mg |
【简单介绍】
【详细说明】
盐酸洛美沙星
| 有效期 | 2年 |
| 描述 | 是氟喹诺酮类抗生素。 |
| EC | EINECS 627-337-1 |
| MDL | MFCD00214312 |
| 别名 | 盐酸氟罗沙星；SC-47111 |
| 英文名称 | Lomefloxacin Hydrochloride |
| CAS | 98079-52-8 |
| 分子式 | C17H19F2N3O3·HCl |
| 分子量 | 387.81 |
| 储存条件 | -20°C |
| 纯度 | ≥98% |
| 外观（性状） | Solid |
| 单位 | 瓶 |
| SMILES | CCN1C=C(C(=O)C2=CC(=C(C(=C21)F)N3CCNC(C3)C)F)C(=O)O.Cl |
| 靶点 | Bacterial;Antibiotic |
| 规格 | 100mg 250mg 500mg |
