LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

炎症作为机体免疫应答的重要机制之一,一直是生命科学研究的热点方向,LPS(脂多糖)由于易于控制,模型重现性好,影响易于识别和测量等优势,成为建立急性炎症模型的金标准试剂。


LPS由一个多糖区域组成,该区域由被称为脂质A的特定糖脂部分锚定在细菌外膜上。脂质A是一种与羟基脂肪酸相连的葡萄糖胺双糖,羟基脂肪酸进一步被非羟基脂肪酸取代。脂肪酸的数量是内毒素免疫原性的主要决定因素。最活跃的脂质A含有6个脂肪酰基,存在于大肠杆菌和沙门氏菌等致病菌中。含有4或5种脂肪酸的低酰化脂质A,诱导宿主防御反应明显减少,并能以剂量依赖的方式抑制六酰化脂多糖引发的强烈内毒素反应。

LPS作用机制原理图

LPS在不同模型的应用和诱导不同疾病模型的protocol

-Cohen J. The immunopathogenesis of sepsis. Nature. 2002 Dec 19-26;420(6917):885-91. PMID: 12490963.



现总结LPS在不同模型的应用和

诱导不同疾病模型的protocol供研究者参考:



LPS诱导疾病模型

模型
产品
给药方式
PMID
小鼠急性肺损伤模型
LPS-EB (Standard)
气管内给药10 μg
35544597
应用:Reg1-MO抑制LPS诱导的急性肺部炎症。
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200μg/kg BW
24007300
应用:NLRP3炎症小体是LPS/机械通气急性肺损伤低氧血症发生发展所必需的
LPS-EB Ultrapure
气管内给药200 μg/kg BW
32117318
应用:自噬通过下调LPS和机械通气诱导的急性肺损伤中的炎症小体活性和IL-1β来防止肺通透性增加和低氧血症。
小鼠炎症小体激活
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射20 mg/kg BW
33017103
注:引自“Current Protocols in Immunology”,为非经典NLPR3炎症小体激活提供了详细的实验方案
小鼠脓毒症模型
LPS-EB  (Standard)
腹腔注射18mg/kg BW
31779628
应用:Poldip2 介导 LPS 诱导的脓毒症相关性脑病模型中的血脑屏障破坏。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射6mg/kg BW
30808756
LPS-EB VacciGradeTM
腹腔注射50mg/kg BW
应用:西方饮食调节小鼠免疫状态和对LPS引发的脓毒症的反应。
LPS-EB Ultrapure
腹腔注射5mg/kg BW
36586274
应用:潜在生物标志物TIFA通过调节细胞焦亡影响脓毒症诱导的急性肾损伤。
大鼠脓毒症模型
LPS-EP (Standard)
静脉给药2.5 μg/kg BW
26149990
应用:人参皂苷Rg1和Re通过与TLR4结合来对LPS诱导的脓毒症起预防作用。
大鼠牙周炎模型
LPS-PG (Standard)
牙龈内注射10 μg
30665148
应用: LPS-PG诱导的牙周炎模型的血清中Aβ肽水平升高。
小鼠牙周炎模型
LPS-PG  (Standard)
牙龈内注射0.5mg/kg BW
34342041
应用:Th17/Treg失衡调节牙周炎所致的认知功能障碍
小鼠脑炎模型
LPS-PG (Standard)
腹腔注射5mg/kg BW
36240654
应用:丙咪嗪可以抑制LPS-PG诱导的小胶质神经毒性。


备注:

LPS-EB Ultrapure (Cat. Code: tlrl-3pelps)  LPS-EB VacciGradeTM  (Cat. Code: vac-3pelps)(表中红色标记)是InvivoGen提供的产品。

不同疾病模型的protocol





*LPS诱导急性肺损伤(ALI)模型 PMID: 35544597  LPS-EB (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 每只小鼠气管给药LPS(standard)10μg。

2. 在LPS处理前24h,给小鼠施用MO(包括Reg1-MOs组和control MO组)。

3.  LPS处理6h后,麻醉小鼠并采集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

评价Reg1-MOs对LPS诱导的ARDS的体内治疗效果。


*“Two-hit” 模型(LPS和MV诱导的ALI模型) PMID: 24007300  LPS-EB Ultrapure

✍ 小鼠模型的建立:

1LPS-EB Ultrapure经气管给药,浓度为100 μg/ml,剂量为2 μl/g BW。

2. LPS处理90min后,将小鼠麻醉进行机械通气(MV)。小鼠经气管插管并通气共4小时。

3. MV结束后,对小鼠实施安乐死以收集样本。

✍ 小鼠模型的应用:

验证LPS和MV可导致IL-1β分泌和ALI发展的假设,该过程依赖于NLRP3炎性小体的激活。





*LPS诱导败血症模型 PMID: 30808756 LPS-EB Ultrapure  LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的建立:

1. 脓毒症模型:腹腔注射LPS-EB Ultrapure 6 mg/kg BW。

2. 无菌(GF) 小鼠脓毒症模型:腹腔注射50 mg/kg BW的LPS-EB VacciGradeTM

✍ 小鼠模型的应用:

1. 脓毒症模型:探讨西方饮食(western diet ,WD)对脓毒症的影响。

2. GF小鼠脓毒症模型:测定WD依赖性脓毒症对菌群的依赖性。





*LPS诱导牙周炎模型 PMID: 30665148 LPS-PG (Standard)

✍ 小鼠模型的建立:

1. 双侧上颌第一、第二磨牙间的腭侧牙龈注射10 μl浓度为1mg /ml的 LPS-PG (Standard)

2. 注射后,每隔48小时再注射两次。

3. 诱导过程持续14 d,每侧共注射 LPS-PG (Standard)6次。

✍ 小鼠模型的应用:

测定牙周炎动物模型中β淀粉样蛋白(Aβ)肽的循环水平。




备注:

标记为红色的产品均来自InvivoGen。这些数据是基于InvivoGen品牌的高品质 LPS生成的,由于已知的TLR2交叉污染的影响或批次间内毒素水平的不准确评估,这些数据可能不适用于来自其他供应商的低质量LPS。


产品信息

产品

货号

规格

LPS-EB (Standard)

tlrl-eblps

5 mg

LPS-EB Ultrapure

tlrl-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-EB VacciGradeTM

vac-3pelps

5 x 10e6 EU

LPS-PG (Standard)

tlrl-pglps

1mg


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链脲佐菌素—诱导动物糖尿病模型

链脲佐菌素—诱导动物糖尿病模型

 糖尿病是一种慢性病,当胰腺产生不了足够的胰岛素或者人体无法有效地利用所产生的胰岛素时,就会出现糖尿病。全世界有3.47亿人患有糖尿病。2004年,估计有340万人死于空腹高血糖带来的后果。2010年的估计死亡数字与之相似。世卫组织预测,2030年糖尿病将成为第七位主要死因。目前我国的糖尿病的发病率呈升高趋势,但发病机理尚未完全阐明,在预防和治疗方面仍不完善,建立理想的动物模型对进一步研究糖尿病具有重要的意义。


迄今为止,已建立了多种建立糖尿病动物模型的方法,主要有:(1) 手术切除胰腺;(2) 化学药物诱导;(3) 自发性DM;(4) 转基因动物等。其中化合药物诱导法中采用链脲佐菌素注射造模因其对组织毒性较小,动物存活率高,所以是目前国内外使用较多的一种制备糖尿病动物模型的方法。

链脲佐菌素(英语:Streptozotocin或Streptozocin,简称STZ,又名链佐星、链脲霉素)是一种由链球菌产生的,对哺乳动物胰脏中产生胰岛素的胰岛B细胞有着特异毒性的天然化合物。它能破坏胰岛B细胞,大剂量可诱导I型糖尿病,小剂量反复注射可致II型糖尿病。

Enzo Lifesciences目前可提供以下三种规格链脲佐菌素供广大研究者选用。
 

 品牌
 产品编号
 产品名称
 规格
 ENZO
 ALX-380-010-G001
 Streptozotocin
 1 x 1 g
 ENZO
 ALX-380-010-5100
 Streptozotocin
 5 x 100 mg
 ENZO
 ALX-380-010-M100
 Streptozotocin
 1 x 100 mg

 

产品文献引用
1. Streptozotocin induces G2 arrest in skeletal muscle myoblasts and impairs muscle growth in vivo: A.P. Johnston, et al.; Am. J. Physiol. Cell Physiol. 292, C1033 (2007).
2. Genotoxicity of streptozotocin: A.D. Bolzan & M.S. Bianchi; Mutat. Res. 512, 121 (2002), (Review).
3. The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B cells of the rat pancreas: T. Szkudelski; Physiol. Res. 50, 537 (2001), (Review).
4. N-monomethyl-arginine and nicotinamide prevent streptozotocin-induced double strand DNA break formation in pancreatic rat islets: F.J. Bedoya, et al.; Experientia 52, 344 (1996).
5. Nitric oxide generation during cellular metabolization of the diabetogenic N-methyl-N-nitroso-urea streptozotozin contributes to islet cell DNA damage: K.-D. Kroncke, et al.; Biol. Chem. Hoppe Seyler 376, 179 (1995).
6. Nitric oxide generation from streptozotocin: N.S. Kwon, et al.; FASEB J. 8, 529 (1994).
7. Biochemical evidence for nitric oxide formation from streptozotocin in isolated pancreatic islets: J. Turk, et al.; BBRC 197, 1458 (1993).
8. NO- and NO2-carrying molecules potentiate photorelaxation in rat trachea and aorta: K.C. Chang, et al.; BBRC 191, 509 (1993).
9. Streptozotocin: a nitric oxide carrying molecule and its effect on vasodilation: G. Thomas & P. Ramwell; Eur. J. Pharmacol. 161, 279 (1989).
10. Mouse models of insulin dependent diabetes: low-dose streptozocin-induced diabetes and nonobese diabetic (NOD) mice: H. Kolb; Diabetes Metab. Rev. 3, 751 (1987).
11. Alkylation of DNA in rat tissues following administration of streptozotocin: R.A. Bennett & A.E. Pegg; Cancer Res. 41, 2786 (1981).
12. The structure of streptozotocin: R.R. Herr, et al.; JACS 89, 4808 (1967).
13. Studies on the diabetogenic action of streptozotocin: N. Rakieten, et al.; Cancer Chemother. Rep. 29, 91 (1963).

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