2,2- 联喹啉- 4,4- 二甲酸二钠 BCA
有效期 | 1年 |
英文名称 | BCA |
CAS | 979-88-4 |
分子式 | C20H10N2Na2O4· xH2O |
分子量 | 388.28 |
储存条件 | 2-8℃ |
纯度 | Purity≥98% |
外观(性状) | 白色至淡黄色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 1g 5g |
蛋白定量
2,2- 联喹啉- 4,4- 二甲酸二钠 BCA
有效期 | 1年 |
英文名称 | BCA |
CAS | 979-88-4 |
分子式 | C20H10N2Na2O4· xH2O |
分子量 | 388.28 |
储存条件 | 2-8℃ |
纯度 | Purity≥98% |
外观(性状) | 白色至淡黄色粉末 |
单位 | 瓶 |
规格 | 1g 5g |
蛋白定量
BCA 2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠 BCA
MDL | MFCD10567219 |
EC | EINECS 629-761-2 |
别名 | 二喹啉羧酸二钠水合物 |
CAS | 979-88-4 |
分子式 | C20H10N2Na2O4 |
分子量 | 388.28 |
纯度 | ≥98% |
单位 | 瓶 |
SMILES | O=C(O[Na])C1=CC(C2=NC3=C(C=CC=C3)C(C(O[Na])=O)=C2)=NC4=C1C=CC=C4 |
靶点 | Others |
规格 | 10mM*1mL in Water 500mg 1g |
BCA是2,2-Biquinoline-4,4-dicarboxylic acid二钠盐,可用于Cu和蛋白的分析测定。
碱性条件下,蛋白将Cu2+还原为Cu+, Cu+与BCA形成紫蓝色的络合物,测定其在562nm处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。
上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
蛋白质定量试剂盒TaKaRa BCA Protein Assay Kit | ||||||
品牌 | Code No. | 产品名称 | 包装量 | 价格(元) | 说明书 | 数量 |
Takara | T9300A | TaKaRa BCA Protein Assay Kit | 500 Assays | ¥1,031 ¥825 |
*红字为促销价格,促销时间: 2024年3月1日-2024年4月30日
■ 制品内容 | ||||||||
1 ml标准反应体系可进行500次反应,使用微孔板的200 μl微量反应体系可进行2,500次反应。 | ||||||||
|
||||||||
*:BSA Standard Solution (牛血清白蛋白标准品溶液) 保存在0.9% NaCl和0.05% NaN3溶液中。 | ||||||||
■ 制品说明 | ||||||||
|
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■ 使用注意 | ||||||||
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前请一定认真阅读。 |
||||||||
1. BSA Standard Solution使用前室温放置,恢复至室温或在20~50℃的水浴中复温。轻弹混匀,轻微离心后使用。 2. 稀释检测样品和标准品时,可使用去离子水、0.9% NaCl或PBS。 3. BCA Reagent A和BCA Reagent B在低温下可能会产生沉淀物。使用前于20~37℃保温,轻轻振荡混合,使沉淀物完全溶解后再使用。 4. 如果没有配备562 nm滤光片,可选择540~570 nm的滤光片进行测定,不会对蛋白定量产生影响。 5. 高浓度样品测定之后,用水充分冲洗比色皿后再使用。色素残留在比色皿上会影响低浓度样品的测定。 |
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■ 关联资料 | ||||||||
Western Blotting实验操作指南: 点击图片下载 |
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页面更新:2023-12-01 16:08:11
蛋白质检测BCA试剂盒蛋白研究-Wako富士胶片和光
供货周期 | 一个月以上 | 应用领域 | 生物产业 |
---|
蛋白质检测BCA试剂盒
Protein Assay BCA Kit
本产品是使用BCA对溶液中蛋白质浓度进行测定的试剂盒。在碱性条件下蛋白质会和Cu2+作用生成Cu+。然后Cu+会和BCA发生螯合作用形成复合物,溶液会变成紫红色。在562 nm下测定其吸光度从而测出蛋白质浓度。
蛋白质检测BCA试剂盒
Protein Assay BCA Kit
本产品是使用BCA对溶液中蛋白质浓度进行测定的试剂盒。在碱性条件下蛋白质会和Cu2+作用生成Cu+。然后Cu+会和BCA发生螯合作用形成复合物,溶液会变成紫红色。在562 nm下测定其吸光度从而测出蛋白质浓度。
◆试剂盒构成
试剂A:BCA溶液 500毫升一支
试剂B:硫酸铜II溶液 25毫升一支
※本试剂盒中不含白蛋白标准液
◆测定方法
反应条件 |
定量范围 |
|
标准法 |
37℃,30分钟 |
20~2000 μg/mL |
室温法 |
室温,2小时 |
20~2000 μg/mL |
高感度法 |
60℃,30分钟 |
5~250 μg/mL |
◆测定例子
试剂A盒试剂B按照50:1混合后,在试管中与各浓度的BSA溶液按照20:1混合。然后用高感度法测定其吸光度。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
297-73101 |
蛋白测定试剂盒(二喹啉甲酸) |
250次用 |
164-25935 | Protein Assay BCA Reagent A | 500 mL |
167-25942 | Protein Assay BCA Reagent B | 25 mL |
蛋白质检测BCA试剂盒蛋白研究-wako富士胶片和光
供货周期 | 一个月以上 | 应用领域 | 生物产业 |
---|
蛋白质检测BCA试剂盒
Protein Assay BCA Kit
本产品是使用BCA对溶液中蛋白质浓度进行测定的试剂盒。在碱性条件下蛋白质会和Cu2+作用生成Cu+。然后Cu+会和BCA发生螯合作用形成复合物,溶液会变成紫红色。在562 nm下测定其吸光度从而测出蛋白质浓度。
蛋白质检测BCA试剂盒
Protein Assay BCA Kit
本产品是使用BCA对溶液中蛋白质浓度进行测定的试剂盒。在碱性条件下蛋白质会和Cu2+作用生成Cu+。然后Cu+会和BCA发生螯合作用形成复合物,溶液会变成紫红色。在562 nm下测定其吸光度从而测出蛋白质浓度。
◆试剂盒构成
试剂A:BCA溶液 500毫升一支
试剂B:硫酸铜II溶液 25毫升一支
※本试剂盒中不含白蛋白标准液
◆测定方法
反应条件 |
定量范围 |
|
标准法 |
37℃,30分钟 |
20~2000 μg/mL |
室温法 |
室温,2小时 |
20~2000 μg/mL |
高感度法 |
60℃,30分钟 |
5~250 μg/mL |
◆测定例子
试剂A盒试剂B按照50:1混合后,在试管中与各浓度的BSA溶液按照20:1混合。然后用高感度法测定其吸光度。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
297-73101 |
蛋白测定试剂盒(二喹啉甲酸) |
250次用 |
164-25935 | Protein Assay BCA Reagent A | 500 mL |
167-25942 | Protein Assay BCA Reagent B | 25 mL |
Human CXCL13/BCA-1/BLC (趋化因子CXCL13) ELISA KIT
货号:BSEH-211-96T
规格:96T
品牌:Biosharp
ELISA KIT又称为ELISA试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒,是一种灵敏度高,特异性强,重复性好的实验方法,且因其试剂稳定、易保存,操作简便、结果判断客观等已广泛应用在免疫学检验的各领域中,得到全世界科研工作者的认可和应用。
ELISA的基本原理是双抗体夹心法,将样本加入预包被了抗原或抗体的酶标板里,然后再加入酶标记的抗原或抗体,从而固相载体上的抗原或抗体与样品中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与样本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
Biosharp ELISA KIT覆盖人、小鼠、大鼠、猪、通用等多种物种,产品达1000多种。每一个产品均经过严格的质检,结果稳定,重复性和线性范围好,特异性和灵敏度高,应用广泛,涉及免疫学、神经学、微生物学、细胞生物学、表观遗传学等多个科学领域。
货号 | BSEH-211-96T |
规格 | 96T |
品牌 | Biosharp |
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BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号:BL521A
规格:500T
品牌:Biosharp
BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品简介:
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。
使用说明:
BCA工作液配制:
将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合,配成BCA工作液。如,取50ml 试剂A与1ml试剂B混合,配成51 ml BCA工作液。两者混合时会有沉淀形成,彻底混匀后沉淀消失。
微孔板测定程序:(工作范围50-2000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取20µl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液用PBS溶液稀释至100µl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2、配制BSA标准测定溶液 。
3、将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 µl
4、向微孔板中加入200 μl BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5、测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6、以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
试管测定程序:(工作范围50-1000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取150µl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入600μl PBS溶液稀释至750µl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2、配制BSA标准测定溶液。
3、将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到100 µl;
4、向试管中加入2ml BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
5、6步骤同上。
产品特点:
1、灵敏度高,检测浓度下限达到25µg/ml(在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。
2、BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
试剂A和试剂B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。
本试剂盒有效期1年。
货号 | BL521A |
规格 | 500T |
品牌 | Biosharp |
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BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号:BL521B
规格:2500T
品牌:Jinpan
商品详情:
产品简介:
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。BCA 蛋⽩浓度测定法实现了蛋⽩质浓度测定的简便、灵敏、快速和稳定性。试剂盒中提供的蛋⽩标准品为⽤户制作标准曲线提供了便利。该 BCA 蛋⽩浓度测定试剂盒可用于比色皿法检测,也可⽤于微孔板法检测。
产品特点:
1、灵敏度高,检测浓度下限达到25µg/ml(在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。
2、速度快,显色所用时间短,比传统的Lowry法检测速度约快4倍。
3、BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
产品组份:
产品编号 |
产品名称 |
BL521S |
BL521A |
BL521B |
BL521C |
1 |
BCA试剂A |
40 ml |
100 ml |
500 ml |
2×500 ml |
2 |
BCA试剂B |
1.2 ml |
3 ml |
15 ml |
2×15 ml |
3 |
牛血清白蛋白(BSA)标准液(5 mg/ml) |
1 ml |
2x1 ml |
10x1 ml |
20x1 ml |
4 |
PBS溶液 |
4 ml |
10 ml |
50 ml |
100 ml |
使用说明:
一、BCA工作液配制:
将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合,配成BCA工作液。如,取50ml 试剂A与1ml试剂B混合,配成51 ml BCA工作液。两者混合时会有沉淀形成,彻底混匀后沉淀消失。
微孔板测定程序:(工作范围50-2000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解BSA蛋白标准液,取20µl 5mg/ml BSA蛋白标准液用PBS溶液稀释至100µl,使其终浓度为1 mg/ml。
2、按照下表配制BSA标准测定溶液:
编号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
5 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
||||||||
BSA标准溶液 µl |
0 |
0.5 |
2.5 |
5.0 |
10 |
15 |
20 |
6 |
8 |
PBS 溶液 μl |
20 |
19.5 |
17.5 |
15 |
10 |
5 |
0 |
14 |
12 |
BSA终浓度 μg/ml |
0 |
25 |
125 |
250 |
500 |
750 |
1000 |
1500 |
2000 |
总体积 µl |
20 µl |
3、将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 µl
4、向微孔板中加入200 μl BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5、测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6、以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
试管测定程序:(工作范围50-1000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取150µl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入600μl PBS溶液稀释至750µl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2、按照下表配制BSA标准测定溶液:
编号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
5 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
||||||||
BSA标准溶液 µl |
0 |
2.5 |
12.5 |
25 |
50 |
75 |
100 |
30 |
40 |
PBS 溶液 μl |
100 |
97.5 |
87.5 |
75 |
50 |
25 |
0 |
70 |
60 |
BSA终浓度 μg/ml |
0 |
25 |
125 |
250 |
500 |
750 |
1000 |
1500 |
2000 |
总体积 µl |
100 µl |
3、将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到100 µl;
4、向试管中加入2ml BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
5、6、步骤同上。
注意事项:
1、BCA 蛋⽩测定法测定时颜色会随着时间的延⻓不断加深,显色反应的速度和温度有关,需注意保持定时和定温,以确保精确定量。
2、⻓期保存,若发现 BCA 试剂 A 或者试剂 B 有沉淀,请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染,则应丢弃。
3、每次测定都需做相应的标准曲线,因为显⾊反应与温度和时间的变化有关,精准蛋⽩定量宜每次都做标准曲线。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
试剂A和试剂B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。
本试剂盒有效期1年。
货号 | BL521B |
规格 | 2500T |
品牌 | Jinpan |
说明书下载 | 点击下载 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号:BL521C
规格:5000T
品牌:Jinpan
商品详情:
产品简介:
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。BCA 蛋⽩浓度测定法实现了蛋⽩质浓度测定的简便、灵敏、快速和稳定性。试剂盒中提供的蛋⽩标准品为⽤户制作标准曲线提供了便利。该 BCA 蛋⽩浓度测定试剂盒可用于比色皿法检测,也可⽤于微孔板法检测。
产品特点:
1、灵敏度高,检测浓度下限达到25µg/ml(在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。
2、速度快,显色所用时间短,比传统的Lowry法检测速度约快4倍。
3、BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
产品组份:
产品编号 |
产品名称 |
BL521S |
BL521A |
BL521B |
BL521C |
1 |
BCA试剂A |
40 ml |
100 ml |
500 ml |
2×500 ml |
2 |
BCA试剂B |
1.2 ml |
3 ml |
15 ml |
2×15 ml |
3 |
牛血清白蛋白(BSA)标准液(5 mg/ml) |
1 ml |
2x1 ml |
10x1 ml |
20x1 ml |
4 |
PBS溶液 |
4 ml |
10 ml |
50 ml |
100 ml |
使用说明:
一、BCA工作液配制:
将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合,配成BCA工作液。如,取50ml 试剂A与1ml试剂B混合,配成51 ml BCA工作液。两者混合时会有沉淀形成,彻底混匀后沉淀消失。
微孔板测定程序:(工作范围50-2000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解BSA蛋白标准液,取20µl 5mg/ml BSA蛋白标准液用PBS溶液稀释至100µl,使其终浓度为1 mg/ml。
2、按照下表配制BSA标准测定溶液:
编号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
5 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
||||||||
BSA标准溶液 µl |
0 |
0.5 |
2.5 |
5.0 |
10 |
15 |
20 |
6 |
8 |
PBS 溶液 μl |
20 |
19.5 |
17.5 |
15 |
10 |
5 |
0 |
14 |
12 |
BSA终浓度 μg/ml |
0 |
25 |
125 |
250 |
500 |
750 |
1000 |
1500 |
2000 |
总体积 µl |
20 µl |
3、将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 µl
4、向微孔板中加入200 μl BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5、测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6、以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
试管测定程序:(工作范围50-1000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取150µl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入600μl PBS溶液稀释至750µl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2、按照下表配制BSA标准测定溶液:
编号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
5 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
||||||||
BSA标准溶液 µl |
0 |
2.5 |
12.5 |
25 |
50 |
75 |
100 |
30 |
40 |
PBS 溶液 μl |
100 |
97.5 |
87.5 |
75 |
50 |
25 |
0 |
70 |
60 |
BSA终浓度 μg/ml |
0 |
25 |
125 |
250 |
500 |
750 |
1000 |
1500 |
2000 |
总体积 µl |
100 µl |
3、将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到100 µl;
4、向试管中加入2ml BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
5、6、步骤同上。
注意事项:
1、BCA 蛋⽩测定法测定时颜色会随着时间的延⻓不断加深,显色反应的速度和温度有关,需注意保持定时和定温,以确保精确定量。
2、⻓期保存,若发现 BCA 试剂 A 或者试剂 B 有沉淀,请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染,则应丢弃。
3、每次测定都需做相应的标准曲线,因为显⾊反应与温度和时间的变化有关,精准蛋⽩定量宜每次都做标准曲线。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
试剂A和试剂B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。
本试剂盒有效期1年。
货号 | BL521C |
规格 | 5000T |
品牌 | Jinpan |
说明书下载 | 点击下载 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号:BL521S
规格:200T
品牌:Jinpan
商品详情:
产品简介:
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。BCA 蛋⽩浓度测定法实现了蛋⽩质浓度测定的简便、灵敏、快速和稳定性。试剂盒中提供的蛋⽩标准品为⽤户制作标准曲线提供了便利。该 BCA 蛋⽩浓度测定试剂盒可用于比色皿法检测,也可⽤于微孔板法检测。
产品特点:
1、灵敏度高,检测浓度下限达到25µg/ml(在50-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.5μg,待测样品体积为1-20μl。
2、速度快,显色所用时间短,比传统的Lowry法检测速度约快4倍。
3、BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
产品组份:
产品编号 |
产品名称 |
BL521S |
BL521A |
BL521B |
BL521C |
1 |
BCA试剂A |
40 ml |
100 ml |
500 ml |
2×500 ml |
2 |
BCA试剂B |
1.2 ml |
3 ml |
15 ml |
2×15 ml |
3 |
牛血清白蛋白(BSA)标准液(5 mg/ml) |
1 ml |
2x1 ml |
10x1 ml |
20x1 ml |
4 |
PBS溶液 |
4 ml |
10 ml |
50 ml |
100 ml |
使用说明:
一、BCA工作液配制:
将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合,配成BCA工作液。如,取50ml 试剂A与1ml试剂B混合,配成51 ml BCA工作液。两者混合时会有沉淀形成,彻底混匀后沉淀消失。
微孔板测定程序:(工作范围50-2000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解BSA蛋白标准液,取20µl 5mg/ml BSA蛋白标准液用PBS溶液稀释至100µl,使其终浓度为1 mg/ml。
2、按照下表配制BSA标准测定溶液:
编号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
5 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
||||||||
BSA标准溶液 µl |
0 |
0.5 |
2.5 |
5.0 |
10 |
15 |
20 |
6 |
8 |
PBS 溶液 μl |
20 |
19.5 |
17.5 |
15 |
10 |
5 |
0 |
14 |
12 |
BSA终浓度 μg/ml |
0 |
25 |
125 |
250 |
500 |
750 |
1000 |
1500 |
2000 |
总体积 µl |
20 µl |
3、将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 µl
4、向微孔板中加入200 μl BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5、测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6、以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
试管测定程序:(工作范围50-1000 μg/ml)
1、蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取150µl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入600μl PBS溶液稀释至750µl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2、按照下表配制BSA标准测定溶液:
编号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
5 mg/ml BSA 标准溶液 μl |
||||||||
BSA标准溶液 µl |
0 |
2.5 |
12.5 |
25 |
50 |
75 |
100 |
30 |
40 |
PBS 溶液 μl |
100 |
97.5 |
87.5 |
75 |
50 |
25 |
0 |
70 |
60 |
BSA终浓度 μg/ml |
0 |
25 |
125 |
250 |
500 |
750 |
1000 |
1500 |
2000 |
总体积 µl |
100 µl |
3、将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到100 µl;
4、向试管中加入2ml BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
5、6、步骤同上。
注意事项:
1、BCA 蛋⽩测定法测定时颜色会随着时间的延⻓不断加深,显色反应的速度和温度有关,需注意保持定时和定温,以确保精确定量。
2、⻓期保存,若发现 BCA 试剂 A 或者试剂 B 有沉淀,请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染,则应丢弃。
3、每次测定都需做相应的标准曲线,因为显⾊反应与温度和时间的变化有关,精准蛋⽩定量宜每次都做标准曲线。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
试剂A和试剂B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。
本试剂盒有效期1年。
货号 | BL521S |
规格 | 200T |
品牌 | Jinpan |
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