Super-n-stain® FITC Antibody Labeling Kits(FITC抗体标记试剂盒) 货号: S601102S/S601102M/S601102L 规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit

Super-n-stain® FITC Antibody Labeling Kits(FITC抗体标记试剂盒)

产品货号: S601102S/S601102M/S601102L

产品规格: 5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit

目录价(元):950/1050/1150

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产品概述:

产品内容

组分

S6011S (5-20 μg)

S6011M (20-50 μg)

S6011L (50-100 μg)

A: Dye vial

1 vial

1 vial

1 vial

B: Super-n-stain® reaction buffer, 10 ×

1 vial of 15 μL

1 vial of 15 μL

1 vial of 30 μL

C: Super-n-stain® antibody storage buffer

1 vial of 60 μL

1 vial of 150 μL

1 vial of 300 μL

D: Ultrafiltration vial (MWCO=10K)

1 each

1 each

1 each

染料信息

Super-n-stain® Antibody Labeling Kit

货号

Label Dye

Ex (nm)

Em (nm)

1 × (5-20 μg)

1 × (20-50 μg)

1 × (50-100 μg)

Biotin

N/A

N/A

S601101S

S601101M

S601101L

FITC

494

518

S601102S

S601102M

S601102L

YF®350 SE

347

448

S601103S

S601103M

S601103L

YF®405S SE

404

431

S601104S

S601104M

S601104L

LS405 SE

408

452

S601105S

S601105M

S601105L

YF®488(6)-2 SE

490

515

S601106S

S601106M

S601106L

YF®532 SE

527

558

S601107S

S601107M

S601107L

YF®555 SE

555

565

S601121S

S601121M

S601121L

YF®568 SE

562

583

S601108S

S601108M

S601108L

YF®594 SE

590

617

S601109S

S601109M

S601109L

YF®640 SE

642

662

S601112S

S601112M

S601112L

YF®647A SE

650

665

S601113S

S601113M

S601113L

YF®660 SE

663

682

S601114S

S601114M

S601114L

YF®750 SE

750

777

S601120S

S601120M

S601120L


储存条件

-20保存,有效期见外包装。

品应用
Super-n-stain® 抗体标记试剂盒包含您需要的利用本公司YF 染料或生物素(Biotin)迅速标记抗体的所有组分。标记过程只需将抗体和染料简单混合于试剂盒内提供的反应缓冲溶液中,进行短时间的孵育即可。Super-n-stain® 染料在标记结束时不再反应,因此无需进一步纯化步骤。标记后,约4-6分子染料与1分子抗体共价结合。Super-n-stain®是共价标记,所以用它标记的抗体可以用于多色荧光染色,而不会发生抗体间的染料转移现象。
Super-n-stain® 标记可以兼容NaN3、低浓度的甘油、Tris和甘氨酸。试剂盒里提供的微型超滤离心管可以在标记前快速去除不兼容的小分子抗体稳定剂。标准Super-n-stain® 标记步骤可以用于多于IgG (μg) 4倍的BSA或明胶样品。根据您希望标记的IgG量来选择试剂盒大小。优化标记步骤适用于稳定蛋白质过剩或腹水的IgG样品。在这种情况下,根据需要标记抗体样本的蛋白质总量(IgG + 稳定剂,或腹水中总蛋白量)来选择试剂盒大小。优化步骤也可用于标记IgG量低于最低范围的样品,通过添加稳定剂蛋白使总蛋白量达到试剂盒的标记范围。优化步骤不建议用于标记天然抗血清或杂交瘤细胞株培养上清,因为这些样本的抗体含量相对于总蛋白非常低。
当用荧光标记抗体直接进行免疫荧光时,您可能需要使用更高浓度的抗体来实现类似间接免疫荧光法检测(一抗加标记二抗)染色的强度。在我们的内部测试中发现,间接免疫荧光染色结果是直接免疫荧光染色信号的三倍左右。
标记二抗仍可以连接到使用Super-n-stain® 试剂盒标记的一抗上,因此如果多个来自同一物种的抗体用于多色免疫荧光染色法,二抗无法区分同一物种来源的未标记的一抗和使用Super-n-stain® 试剂盒标记的一抗。Super-n-stain®标记抗体可以用作传统间接免疫荧光法检测后的三级染色。UElandy 还提供生物素Super-n-stain® 标记试剂盒、二次检测使用的YF 染料标记的链霉亲和素或YF染料标记的单克隆生物素抗体。
我们还提供酶标记和荧光蛋白标记的 Super-n-stain®试剂盒,以及小配体标记试剂盒(请访问www.uelandy.com)。更多信息,请参见常见问题。


说明书:

Super-n-stain® FITC Antibody Labeling Kits(FITC抗体标记试剂盒) 货号:               S601102S/S601102M/S601102L  规格:               5-20 μg/kit / 20-50 μg/kit / 50-100 μg/kit UE-S601102S/S601102M/S601102L    
MSDS:

MSDS S601102 Super-n-stain® FITC Antibody Labeling Kits
常见问题解答:

实验过程中没有纯化步骤,我如何将未标记上的荧光染料除去?
该问题描述了我们研发的关键因素,我们独特的染料、缓冲液组分以及完善的标记策略已经完美地解决了这个问题,具体机制涉及专利保护,不便透露。

Super-n-stain® 试剂盒可用于多色免疫标记吗,不同抗体间是否会发生染料转移?
Super-n-stain® 试剂盒抗体与染料是共价结合方式,不存在染料扩散和转移现象。详细信息请参照上面产品说明部分。

Super-n-stain® 试剂盒可用于标记抗体以外的蛋白吗?
该试剂盒是针对 IgG 抗体标记优化设计的,不推荐用于标记其它蛋白。Super-n-stain® 标记条件可能会导致 IgM 变性。

Super-n-stain® 试剂盒标记一抗和二抗的灵敏性是否一样?
直接免疫荧光检测信号会弱于间接检测,详细信息请参照上面产品说明部分。

用标记二抗的间接标记相比,直接标记复合物有哪些优势?
直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步骤,容许来自同一物种的多个抗体同时使用进行多色检测,可以使用来自同一物种的抗体进行动物组织染色,从而避免了二抗的交叉反应。

Super-n-stain® 试剂盒与 Invitrogen’s Zenon 抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?
主要优势:
1. YF 染料与抗体共价结合避免了多重染色时染料转移和扩散现象;
2. Super-n-stain® 复合物在储液中可稳定保存几个月之久,而 Zenon 标记物必须在 30min 内使用;
3. Super-n-stain® 复合物体积更小些,因为染料直接与抗体结合,而 Zenon 复合物与抗体片段配合使用;
4. 无需进行 YF 染料与标记蛋白的比例优化,直接混合、染色即可;
5. 无需进行后染固定;
6.没有种属特异性

Super-n-stain® 试剂盒与 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?

Super-n-stain® 试剂盒使用荧光更亮、光稳定性更好的 YF 染料,试剂盒规格更灵活,可提供至单个抗体标记反应。


什么是 YF 染料?

YF 染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。

我应如何选择 Super-n-stain® 试剂盒?

每种 YF 染料,我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒,分别是:5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记,根据抗体规格,选择其中一种即可,含有稳定剂的抗体标记,请参考产品描述中的表 1。

若待标记抗体总量适用于两种 Super-n-stain® 试剂盒,我应如何选择?

例如:标记 50 μg 抗体,我应购买 50-100 μg 抗体标记试剂盒还是 20-50μg 的试剂盒?

遇到这种情况,两种规格都可以得到较好的结果,使用较小规格的效果更好。

如何选择染料与蛋白的比例获得较好的标记效果?

如果待标记的抗体量在试剂盒范围内,无需改变染料量或反应时间,因为 Super-n-stain® 试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。

我可以拆分试剂盒组分,以便多次使用吗?
不行,因为 Super-n-stain® 试剂盒已经优化至一个标记单位,我们不建议拆分试剂盒以标记多个抗体或多次使用。

抗体浓度是否影响标记效率?
Super-n-stain® 试剂盒较好的标记抗体浓度为 0.5-1 mg/mL,您可通过浓缩或稀释使待标记抗体达到上述浓度范围,小于或超过该浓度范围,会导致标记效率过低或过多。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号?
与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号怎么办?

与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。在直接标记前,应确定用于间接标记的一抗的敏感性和特异性。为了得到与间接标记相同的信号强度,直接标记时需要使用更高浓度的一抗,更多信息请参考产品应用部分。共价标记可能会影响某些抗体的反应活性。可以通过实验确定是否是这一因素的原因,即使用 Super-n-stain® 标记的一抗和荧光标记的二抗进行间接免疫染色,以确定 Super-n-stain® 标记后的一抗是否仍具有反应活性。如果有兼容 YF 染料的激发/发射波长的荧光读胶仪或扫描仪,可以通过 SDS-PAGE 电泳确定抗体是否标记上染料,取 0.1-0.5 μg 标记抗体进行变性 SDS-PAGE电泳,然后进行凝胶拍照,你应该可以观察到 IgG 的 55 kDa 的重链和 25 kDa 的轻链对应的两条荧光条带。

实验过程中没有纯化步骤,我如何将未标记上的荧光染料除去?
该问题描述了我们研发的关键因素,我们独特的染料、缓冲液组分以及完善的标记策略已经完美地解决了这个问题,具体机制涉及专利保护,不便透露。

Super-n-stain® 试剂盒可用于多色免疫标记吗,不同抗体间是否会发生染料转移?
Super-n-stain® 试剂盒抗体与染料是共价结合方式,不存在染料扩散和转移现象。详细信息请参照上面产品说明部分。

Super-n-stain® 试剂盒可用于标记抗体以外的蛋白吗?
该试剂盒是针对 IgG 抗体标记优化设计的,不推荐用于标记其它蛋白。Super-n-stain® 标记条件可能会导致 IgM 变性。

Super-n-stain® 试剂盒标记一抗和二抗的灵敏性是否一样?
直接免疫荧光检测信号会弱于间接检测,详细信息请参照上面产品说明部分。

用标记二抗的间接标记相比,直接标记复合物有哪些优势?
直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步骤,容许来自同一物种的多个抗体同时使用进行多色检测,可以使用来自同一物种的抗体进行动物组织染色,从而避免了二抗的交叉反应。

Super-n-stain® 试剂盒与 Invitrogen’s Zenon 抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?
主要优势:
1. YF 染料与抗体共价结合避免了多重染色时染料转移和扩散现象;
2. Super-n-stain® 复合物在储液中可稳定保存几个月之久,而 Zenon 标记物必须在 30min 内使用;
3. Super-n-stain® 复合物体积更小些,因为染料直接与抗体结合,而 Zenon 复合物与抗体片段配合使用;
4. 无需进行 YF 染料与标记蛋白的比例优化,直接混合、染色即可;
5. 无需进行后染固定;
6.没有种属特异性

Super-n-stain® 试剂盒与 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗体标记试剂盒相比,有哪些优势?

Super-n-stain® 试剂盒使用荧光更亮、光稳定性更好的 YF 染料,试剂盒规格更灵活,可提供至单个抗体标记反应。


什么是 YF 染料?

YF 染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。

我应如何选择 Super-n-stain® 试剂盒?

每种 YF 染料,我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒,分别是:5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记,根据抗体规格,选择其中一种即可,含有稳定剂的抗体标记,请参考产品描述中的表 1。

若待标记抗体总量适用于两种 Super-n-stain® 试剂盒,我应如何选择?

例如:标记 50 μg 抗体,我应购买 50-100 μg 抗体标记试剂盒还是 20-50μg 的试剂盒?

遇到这种情况,两种规格都可以得到较好的结果,使用较小规格的效果更好。

如何选择染料与蛋白的比例获得较好的标记效果?

如果待标记的抗体量在试剂盒范围内,无需改变染料量或反应时间,因为 Super-n-stain® 试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。

我可以拆分试剂盒组分,以便多次使用吗?
不行,因为 Super-n-stain® 试剂盒已经优化至一个标记单位,我们不建议拆分试剂盒以标记多个抗体或多次使用。

抗体浓度是否影响标记效率?
Super-n-stain® 试剂盒较好的标记抗体浓度为 0.5-1 mg/mL,您可通过浓缩或稀释使待标记抗体达到上述浓度范围,小于或超过该浓度范围,会导致标记效率过低或过多。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号?
与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。

使用标记后的抗体进行免疫荧光染色未观察到荧光信号怎么办?

与供应商联系,确保抗体组分、浓度在容许范围内。在直接标记前,应确定用于间接标记的一抗的敏感性和特异性。为了得到与间接标记相同的信号强度,直接标记时需要使用更高浓度的一抗,更多信息请参考产品应用部分。共价标记可能会影响某些抗体的反应活性。可以通过实验确定是否是这一因素的原因,即使用 Super-n-stain® 标记的一抗和荧光标记的二抗进行间接免疫染色,以确定 Super-n-stain® 标记后的一抗是否仍具有反应活性。如果有兼容 YF 染料的激发/发射波长的荧光读胶仪或扫描仪,可以通过 SDS-PAGE 电泳确定抗体是否标记上染料,取 0.1-0.5 μg 标记抗体进行变性 SDS-PAGE电泳,然后进行凝胶拍照,你应该可以观察到 IgG 的 55 kDa 的重链和 25 kDa 的轻链对应的两条荧光条带。


使用本产品的文献:

参考文献
1.Paraoxonase 2 decreases renal reactive oxygen species production, lowers blood pressure, and mediates dopamine D2 receptor-induced inhibition of NADPH oxidase
应用方向:polyclonal rabbit anti-PON2 antibody/  polyclonal rabbit anti-D2R antibody 

2.The Q loops of the human multidrug resistance transporter ABCB1 are necessary to couple drug binding to the ATP catalytic cycle
应用方向:Primary antibody 4E3

3.Increased Metabolite Levels of Glycolysis and Pentose Phosphate Pathway in Rabbit Atherosclerotic Arteries and Hypoxic Macrophage
应用方向:anti-Ki-67 antibody/anti-macrophage antibody / anti-SMC antibody

4.Mucosal immunoglobulins at respiratory surfaces mark an ancient association that predates the emergence of tetrapods
应用方向:rabbit anti-trout IgT / mouse anti-trout IgM / rabbit anti-Ich

5.Data ofrationalprocessoptimization for the production of a full IgG and its Fab fragment from hybridoma cells
应用方向:IgG

6.Adenoviral L4 33K forms ring-like oligomers and stimulates ATPase activity of IVa2: implications in viral genome packaging
应用方向:polyclonal anti-IVa2 and anti-33K antibodies

7.Principal cell activity induces spine relocation of adult-born interneurons in the olfactory bulb
应用方向:Anti-synaptophysin antibody

8.Enhancing proteasome-inhibitory activity and specificity of bortezomib by CD38 targeted nanoparticles in multiple myeloma
应用方向:anti-CD38 chitosan NPs

AnnexinV-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂

AnnexinV-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂

货号:BL110A

规格:50T

品牌:Jinpan

Annexin V-FITC/PI Apoptosis Assay Kit

Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒

产品简介:

磷脂酰丝氨酸(PS)是一种带负电荷的磷脂,正常细胞中,PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的PS由脂膜内侧翻向细胞膜外侧,使PS暴露在细胞膜外表面。而Annexin V是一种分子量为35~36kDCa2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。

本产品将Annexin V进行绿色荧光素(FITC)标记,以标记了的Annexin V作为探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此采用Annexin VPI双染的方法,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。

产品组成:

    

组分

规格

Annexin V-FITC

250μl

Propidium Iodide, PI

500μl

Binding Buffer ( 4× )

10ml

 

 

使用方法:

1.细胞样品的准备:

A.悬浮细胞:

1)收集细胞至离心管中1000-2000rpm离心5min,小心去除上清。

2)用1ml 4℃预冷PBS轻轻重悬细胞并计数,1000-2000rpm离心5min,小心吸除上清。

3)再加入1ml 4℃预冷的PBS重悬细胞,1000-2000rpm离心5min,小心吸除上清。

B.贴壁细胞:

1)吸出细胞培养液至离心管中,PBS洗涤贴壁细胞一次,加入适量不含EDTA的胰酶细胞消化液消化细胞。

2)室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶细胞消化液。需避免胰酶的过度消化。

3)加入以上步骤中收集的细胞培养液,稍混匀,转移到离心管内,1000-2000rpm离心5min,小心吸除上清。

注:加入的细胞培养液一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞,另一方面细胞培养液中的血清可以有效抑制或中和残留的胰酶;残留的胰酶会消化并降解后续加入的Annexin V-FITC导致染色失败。

4)用1ml 4℃预冷PBS轻轻重悬细胞并计数,1000-2000rpm离心5min,小心吸除上清。

5)再加入1ml 4℃预冷的PBS重悬细胞,1000-2000rpm离心5min,小心吸除上清。

2.用去离子水按14稀释Binding Buffer4ml Binding Buffer+12ml去离子水);

3.250μl稀释过的Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为1×106/ml

4.100μl的细胞悬液于5 ml流式管中,加入5μl Annexin V-FITC,轻轻混匀;

5.室温(20-25℃)避光孵育10min

6.上机前5min加入10μl碘化丙啶溶液,轻轻混匀;

7.上机前在反应管中补加400μl PBS重悬细胞, 避光保存,随即进行流式细胞仪(FACS)检测, Annexin V-FITC为绿色荧光,PI为红色荧光。

 

保存条件:

4℃避光保存,有效期一年。

货号 BL110A
规格 50T
品牌 Jinpan
说明书下载 点击下载

FITC 异硫氰酸荧光素

FITC 异硫氰酸荧光素

货号:
IF0081

品牌:
Jinpan

FITC 异硫氰酸荧光素

暂无详情
产品简介
EC EINECS 248-207-7
MDL MFCD00005063
别名 荧光胺异硫腈酸盐
CAS 3326-32-7
分子式 C21H11NO5S
分子量 389.38
纯度 HPLC≥90%
单位
生物活性 FITC是荧光素的衍生物,用于标记胺[1-3]。
In Vitro Annexin V-FITC/PI用于检测软骨细胞凋亡[1]。 PEI修饰的CD与异硫氰酸荧光素(FITC)缀合以制备CDs-FITC复合物[2]。
SMILES O=C1OC2(C3=C(OC4=C2C=CC(O)=C4)C=C(O)C=C3)C5=C1C=C(N=C=S)C=C5
细胞实验 用膜联蛋白V-荧光素异硫氰酸酯(FITC)和碘化丙啶通过流式细胞术测量软骨细胞凋亡的频率。从每组中收集总共1×104个处理的软骨细胞,在冷PBS中洗涤并在室温下与膜联蛋白V-FITC和PI在黑暗中在冰上孵育15分钟。然后使用荧光激活细胞分选仪分析这些样品。 Cell Quest软件用于分析细胞凋亡的百分比。所有测试重复三次。
数据来源文献 [1]. Gao SG, et al. Phosphorylation of osteopontin has proapoptotic and proinflammatory effects on human knee osteoarthritis chondrocytes. Exp Ther Med. 2016 Nov;12(5):3488-3494. Epub 2016 Oct 5.
[2]. Zhu X, et al. Ratiometric, visual, dual-signal fluorescent sensing and imaging of pH/copper ions in real samples based on carbon dots-fluorescein isothiocyanate composites. Talanta. 2017 Jan 1;162:65-71
规格 100mg 500mg

FITC是荧光素的衍生物,用于标记胺。

SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kit

SABC(小鼠/兔IgG)-FITC kit

货号:
SA0043

品牌:
Jinpan

产品简介
英文名称 SABC(Mouse/Rabbit IgG)-FITC Kit
储存条件 -20℃,避光,有效期1年
规格 100T-200T
产品内容:

封闭液(5% BSA) 10ml
Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液 100ul
SABC-FITC浓缩液 100ul
稀释液 30ml
抗荧光衰减封片剂 10ml
保存: 如果长时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,稀释液和抗荧光衰减封片剂存放于2-8℃以方便使用。
产品简介:    本试剂盒适合于一抗为小鼠或者兔IgG来源的免疫组化实验.,FITC荧光检测。    SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。
操作步骤:(微量试剂请离心后使用)
以石蜡切片热修复为例1. 切片常规脱蜡至水。2. 可选步聚:
a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步,直接进入下一步。3. 滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。4. 用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37℃ 孵育1小时左右或20℃ 2小时左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。5. 根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗小鼠/兔IgG浓缩液,混匀即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠/兔IgG工作液,20-37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2分钟。6. 根据使用量,用稀释液将SABC-FITC浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液,20-37℃孵育30分钟(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5分钟。7. 滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。    对于细胞爬片,固定后,PBS漂洗两次,再用0.5% Trxiton X-100室温孵育20分钟, PBS漂洗两次,接上述第3步。    对于冰冻切片,固定后,PBS漂洗两次,再接上述第2步。
注意事项:    如果背景过高,在SABC反应之后,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。

Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒

Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒货号: JP50001

产品描述
描述

在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡最早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DNA片断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。Annexin V是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料, 它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

产品组分
25 Tests 50 Tests 100 Tests
AnnexinV-FITC 125μl 250μl 500μl
10×Binding Buffer 1.5ml 2.5ml 6.5ml
Propidium Iodide 125μl 250μl 500μl
操作步骤
贴壁细胞需用 0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加 2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用 1×PBS或 1×binding buffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1) 用去离子水将 10×Binding Buffer 稀释成 1×Binding Buffer;
(2) 细胞收集:悬浮细胞收集:离心 5 分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后( 注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC 的结合),在室温中,2000rpm 离心 5~10 分钟,收集细胞;
(3) 细胞洗涤:用预冷 1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm 离心 5~10分钟,弃上清洗涤细胞;
(4) 加入 300μL 的 1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5) Annexin V-FITC 标记:加入 5μL 的 Annexin V-FITC 混匀后,避光,室温孵育 15 分钟;
(6) PI 标记:上机前 5 分钟再加入 5μL 的 PI 染色。
(7) 上机前,补加 200μL 的 1×Binding Buffer。
注意:每个反应体系建议细胞数为1×104至1×106
操作说明
(1) 使用前低速离心,以免液体积存管盖和管壁;
(2) 本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(3) PI(propidium iodide,溴化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(4) Annexin V-FITC 和 PI 是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(5) 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在 4℃下操作,以免影响细胞状态。
(6) 在细胞洗涤的最后一步,请尽量将上清弃净,以免 PBS 残留,有可能会影响实验结果。
(7) 为防止荧光衰变,宜在 1 小时内进行流式检测。
(8) PI 染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC 染色,最短可在上机前 5 分钟再加入 PI 染色。
基本信息
别名
Annexin V-FITC apoptosis assay kit
储存/保存方法
4℃保存6个月;避免反复冻融。

FITC Mouse anti-Human CD45 Antibody(9.4)

FITC Mouse anti-Human CD45 Antibody(9.4)描述宿主反应种属应用形式浓度类型克隆号同种型储存/保存方法存储溶液标记

概述
描述
对照抗体推荐:#JP20150
宿主
Mouse
反应种属
Human
应用
Flow cytometry
性能
形式
liquid
浓度
10 ul/T
类型
Monoclonal Antibody
克隆号
9.4
同种型
Mouse IgG2a
储存/保存方法
Store at 4°C. Do not freeze. Light sensitive material.
存储溶液
Phosphate-buffered solution, pH 7.4, containing 0.09% sodium azide and 0.2% (w/v) BSA
标记
FITC

FITC Rat anti-Mouse CD71 Antibody(RI7217)

FITC Rat anti-Mouse CD71 Antibody(RI7217)宿主反应种属应用形式浓度类型克隆号同种型储存/保存方法存储溶液标记使用方法

概述
宿主
Rat
反应种属
Mouse
应用
FC
性能
形式
Liquid
浓度
5μl/test
类型
Monoclonal Antibody
克隆号
RI7217
同种型
Rat IgG2a
储存/保存方法
Store at 4°C.Do not freeze. Light sensitive material.
存储溶液
Phosphate-buffered solution, pH 7.2-7.4, containing 0.05% Proclin 300 and 1% FBS
标记
FITC
使用方法
Excitation Laser:Blue Laser (488 nm)
Ex/Em Max:494nm/520nm

异硫氰酸荧光素 FITC

异硫氰酸荧光素 FITC

货号:BS096-50mg

规格:50mg

品牌:Biosharp

产品简介:
异硫氰酸荧光素(FITC),一种蛋白荧光标记试剂,广泛用于通过胺基将荧光标记附
着到蛋白质上。异硫氰酸酯基团可与蛋白质中的氨基末端和伯胺进行反应。它已被用于标
记蛋白质,包括抗体和凝集素。
别名:荧光素 5-异硫氰酸酯,Fluorescein isothiocyanate isomer I,异硫氰酸荧光红
CAS:3326-32-7
分子式:C21H11NO5S
分子量:389.38
纯度:≥90%
外观(性状):浅黄色粉末
溶解度: 溶于 DMSO,建议浓度 5mg/ml
储存条件:2-8℃避光保存
单位:瓶
有效期:2 年
应用:主要用作荧光抗体技术中的荧光染料,能和各种抗体蛋白结合,结合后的抗体不丧
失与一定抗原结合的特异性,并在碱性溶液中具有强烈的绿色荧光;可对由地细菌病毒和
寄生虫等所致疾病进行快速诊断
使用方法:
根据实际需要参阅相关文献配制和使用.
注意事项:
1、本产品使用以及存放的过程中注意避光。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
货号 BS096-50mg
规格 50mg
品牌 Biosharp
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FITC标记山羊抗小鼠IgG

FITC标记山羊抗小鼠IgG

货号:BL031A

规格:0.1ml

品牌:Biosharp

山羊抗小鼠IgG FITC说明书

Goat Anti-Mouse IgG, FITC Conjugated, H+L 

名称:FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L )

规格:原装进口为2.0mg       进口分装为0.1ml (另加0.1ml甘油)

浓度:1.5mg/ml

稀释范围:1:50 – 1:200 for most applications

缓冲液:0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, pH 7.6

防腐剂:0.05% Sodium Azide

纯化方式:亲和纯化

分装及储存:

1、在进口原装抗体分装时,加入50%灭菌的甘油,能延长试剂的保存期。但应注意的是,此时抗体的浓度及稀释比例应降低一倍。

2、初次使用参考推荐的稀释比例,实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节二抗的稀释比例。但应注意,需现用现配,因为稀释后抗体的有效活性会很快降低。

3-20保存,避免反复冻融。

保存条件:-20保存一年

货号 BL031A
规格 0.1ml
品牌 Biosharp
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FITC标记山羊抗大鼠IgG

FITC标记山羊抗大鼠IgG

货号:BL032A

规格:0.1ml

品牌:Biosharp

山羊抗大鼠IgG FITC说明书

Goat Anti-Rat IgG, FITC Conjugated, H+L 

名称:FITC标记山羊抗大鼠IgG(H+L )

规格:原装进口为2.0mg       进口分装为0.1ml (另加0.1ml甘油)

浓度:1.5mg/ml

稀释范围:1:50 – 1:200 for most applications

缓冲液:0.01M Sodium Phosphate, 0.25M NaCl, pH 7.6

防腐剂:0.05% Sodium Azide

纯化方式:亲和纯化

分装及储存:

1、在进口原装抗体分装时,加入50%灭菌的甘油,能延长试剂的保存期。但应注意的是,此时抗体的浓度及稀释比例应降低一倍。

2、初次使用参考推荐的稀释比例,实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节二抗的稀释比例。但应注意,需现用现配,因为稀释后抗体的有效活性会很快降低。

3-20保存,避免反复冻融。

保存条件:-20保存一年

货号 BL032A
规格 0.1ml
品牌 Biosharp
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