Glass gel 预制胶 Tris-Gly是一款安全、快捷、高性能的预制聚丙烯酰胺凝胶，常用于PAGE和Western blot检测。
1. 采用自动化的灌胶生产技术，确保了产品质量的高稳定性和重复性。
2. 采用玻璃胶板，有效减少蛋白非特异性吸附，使蛋白条带更为敏锐，清晰。
3. 胶夹打开极为轻松，只需用刀片在胶夹一侧轻轻划一下即可打开。
4. 凝胶中不含SDS, 可用于变性和非变性电泳。
5. 兼容市场上主流的mini电泳槽，如Bio-Rad, Invitrogen, 天能和君意东方等。
基本信息：
胶板尺寸：宽×高×厚度为98×84×4.1mm；
凝胶尺寸：宽×高×厚度为81×74×1.5mm；
Acr-Bis：29：1；
浓缩胶：4%，1.5cm；
凝胶厚度：1.5mm；
孔数：15孔；
最大上样量：30uL;
分离范围：20-200kDa;
建议电压：180V

4-15%

10片/盒

Glass gel 迷你预制胶兼容的电泳槽:

Glass gel系列预制胶可以兼容大部分的mini SDS-PAGE 电泳槽，包括

a. Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System)；

b. Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280)；

c. 北京六一 DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF；

d. 君意东方 JY-SCZ2+；

e. 天能 VE180；

或其它胶板宽度在10厘米的电泳槽。

在 Bio-Rad 电泳槽中的应用：

Bio-Rad Mini-PROTEAN系列电泳槽的U型密封条顶部有凸起结构，而Glass gel系列预制胶的短玻板是凹形结构，因此该部位是平的，电泳前需将具有凸起结构的密封条取出后反过来安装，是平滑面朝外，从而防止漏液（如下图所示）。另有厚度约为0.5mm的塑料垫片，请根据您电泳槽的实际宽度进行相应的增加。
a. 将Bio-Rad电泳槽中的U型密封条（如图绿色部分） 拉出，注意这时的密封条两端是有凸起的，凸起的这面为正面，无凸起的为反面。
b. 将密封条旋转180度(正面朝里，反面朝外)，重新装回电泳槽中，注意把密封圈周边压实，防止发生漏液。
c. 放置好预制胶进行正常的电泳操作即可。

PAGE、Western blot

预制胶本身都不含SDS，可根据电泳缓冲液的不同用于变性电泳和非变性电泳（电泳缓冲液需自备）

非变性胶（Native-PAGE）

1. 非变性胶的蛋白迁移率受到蛋白分子量、蛋白空间结构等多种因素影响。

2. 将Glass gel 预制胶 Tris-Gly 从包装袋中取出。

3. 将预制胶固定在电泳槽中。

4. 准备非变性电泳缓冲液 (#JP9360) ：取 500mL 1× Tris-Glycine非变性电泳缓冲液。

5. 内槽加满电泳液，外槽的电泳液最低须加到1/3液面处，最高不可漫过胶板，再缓慢地将梳子拔出。

6. 上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔，去除加样孔内残余的胶液。

7. 上样：将非变性蛋白样品与 5× 非变性 Loading buffer 进行 4：1 混合均匀。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8. 电泳条件：180 V, 60 min，当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

9. 电泳结束，取出凝胶。用刀在侧边胶处，沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料，即可打开玻璃板，取胶时，需在凝胶和玻璃条之间，沿着玻璃条划一刀，防止取胶时，发生粘连使胶破碎。（使用美工刀时请注意安全）

10. 酸性蛋白（等电点pI<7）正常上样电泳即可。反之，碱性蛋白（等电点pI>7）带正电荷，需将电极插反（红插黑，黑插红），这时上样孔成为正极，样品向下电泳。

 

变性胶（SDS-PAGE）

1. 请参考下面的分离图谱选择合适浓度的预制胶，以帮助您进行更好的蛋白电泳条带分离。

2. 将Glass gel 预制胶 Tris-Gly从包装袋中取出。

3. 将预制胶固定在电泳槽中。

4. 准备变性电泳缓冲液 (#JP9359) ：取 500mL 1× Tris-Glycine变性电泳缓冲液。

5. 内槽加满电泳液，外槽的电泳液最低须加到1/3液面处，最高不可漫过胶板，再缓慢地将梳子拔出。

6. 上样前请使用移液器吸取电泳缓冲液轻轻吹打加样孔，去除加样孔内残余的胶液。

7. 上样：将蛋白样品与 5× 变性Loading buffer 进行4：1混合均匀，加热处理。注意枪头不要戳破凝胶，不要过度插入梳孔使胶板变形造成漏液。

8. 电泳条件：180 V, 60 min，当溴酚蓝指示带电泳至胶板底部，或实验预定位置时，即可结束电泳。

9. 电泳结束，取出凝胶。用刀在侧边胶处，沿着两片玻璃的缝隙切开封胶材料，即可打开玻璃板，取胶时，需在凝胶和玻璃条之间，沿着玻璃条划一刀，防止取胶时，发生粘连使胶破碎。（使用美工刀时请注意安全）

1. Tris-Gly 预制胶使用的是中性的Tris-Gly缓冲系统。

2. 如果需要蛋白条带更加清晰、平直，可降低电压至150V, 适当延长电泳时间。

3. 电压为180V电泳时，1块胶的初始电流在75mA左右，2块胶的初始电流在150mA左右，随时间增加电流逐步降低。

4. 电泳缓冲液不建议重复使用。因为经过电泳之后，缓冲液中的离子强度、缓冲能力都发生了变化，不能确保电泳效果。

5. 湿转时120V恒压转膜60-90min。为达到更好的转膜效果，可以根据预制胶上残留的预染marker及膜上的预染marker确定转膜效率，并对转膜条件进行适当调整。目的蛋白的分子量，凝胶浓度及转膜液中的甲醇浓度都会影响转膜效率。 大蛋白尽量选择低浓度的胶。

蛋白分子量	100kDa以上	10-100kDa	10kDa以下
建议甲醇浓度	5%	10%	20%-30%

6. 仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 常温运输，常温保存时应放置于阴凉处，避免温度剧烈变化和阳光直射。

2. 4-8℃保存，可以存放12个月。

3. 请勿置于0℃以下，凝胶在0℃以下会冻凝，产生气泡和裂纹，凝胶报废。