PI3-K 激酶活性检测试剂盒
| 英文名称 | PI3-Kinase Activity AlphaScreen? Assay |
| 货期 | 3-5Weeks |
| 规格 | 1ea |
| I 型 PI3-Kinase 活性检测试剂盒，384 孔板，可用于抑制剂筛选 |
磷脂酰肌醇 (phosphotidylinositol,PI) 是构成细胞膜的重要组分之一，同时在细胞内外环境信号的传递上也起着非常重要的作用。
美国Echelon提供各类磷脂酰肌醇（PIPn）及检测工具 。助力细胞膜以及细胞信号通路上的研究！
乙酸激酶（ACK）活性检测试剂盒 微量法,货号：BC3175-100管/96样
| 市场价： | ￥3200.0 | |
| 价格： |
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| 品牌： | solarbio | |
| 规格： | 100管/96样 |
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产品详情
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参考文献
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GNE-7915
| 别名 | gne7915 |
| CAS | 1351761-44-8 |
| 分子式 | C19H21F4N5O3 |
| 分子量 | 443.4 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | GNE-7915是高效选择性，可渗透大脑的LRRK2抑制剂，IC50值为9 nM。[1-2] |
| In Vitro | 维持C-2’/ C-5’的甲氧基/氟代排列和不同的氨基烷基R1取代导致GNE-7915和化合物19的单位数纳摩尔LRRK2细胞活性。扩增的Invitrogen激酶分析（187种激酶），0.1μM GNE-7915（比LRRK2 Ki高100倍）和19（比LRRK2 Ki高250倍）仅在TTK中产生显示大于50％的抑制。使用DiscoverX KinomeScan55竞争性结合测定组（包括392种独特激酶）的选择性分析也以0.1μM对GNE-7915进行。对于10种激酶检测> 50％探针置换的结合，对于仅LRRK2，TTK和ALK检测> 65％的结合，进一步支持对GNE-7915的优异LRRK2选择性。 Cerep受体分析，包括扩大的脑组，提示GNE-7915和19仅抑制5-HT2B，在10μM时抑制> 70％。 GNE-7915和19被证实是中等强效的5-HT2B拮抗剂体外功能测定[2]。 |
| SMILES | CCNC1=NC(NC2=C(OC)C=C(C(N3CCOCC3)=O)C(F)=C2)=NC=C1C(F)(F)F |
| 靶点 | LRRK2 |
| 数据来源文献 | [1]. Kavanagh ME, et al. The development of CNS-active LRRK2 inhibitors using property-directed optimisation. Bioorg Med Chem Lett. 2013 Jul 1;23(13):3690-6.
[2]. Estrada AA, et al. Discovery of highly potent, selective, and brain-penetrable leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) small molecule inhibitors. J Med Chem. 2012 Nov 26;55(22):9416-33 |
| 规格 | 5mg 10mg 25mg |
是高效选择性的LRRK2抑制剂。
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）检测试剂盒 微量法,PEPCK Assay Kit,货号：BC3315- 100管/96样
| 市场价： | ￥2880.0 | |
| 价格： |
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| 品牌： | solarbio | |
| 规格： | 100管/96样 |
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产品详情
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参考文献
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AZD-2932
| 有效期 | 2年 |
| 描述 | 是有效的多靶点激酶抑制剂。 |
| 别名 | 2-(4-(6,7-dimethoxyquinazolin-4-yloxy)phenyl)-N-(1-isopropyl-1H-pyrazol-4-yl)acetamide |
| CAS | 883986-34-3 |
| 分子式 | C24H25N5O4 |
| 分子量 | 447.49 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 纯度 | ≥98% |
| 外观（性状） | White to off-white Solid |
| 单位 | 瓶 |
| 生物活性 | AZD2932是有效的多靶点激酶抑制剂，细胞试验中的抑制VEGFR2，PDGFβ，PDGFβ 和 PDGFβ 的 IC50 值分别为8，4，7，9 nM。[1] |
| IC50 | VEGFR2:8 nM; PDGFRβ:4 nM; FLT3:7 nM; c-Kit:9 nM[1] |
| In Vitro | AZD2932具有针对PDGFβ，VEGFR-2，Flt-3和c-Kit的有效且平衡的特征。它不抑制各种细胞色素P450同种型，最差的IC50与2C9（8.0μM）相比。 AZD2932对hERG没有活性（IC50 =137μM）[1]。 |
| In Vivo | 每天两次口服给药（bid）AZD2932 10小时导致对照动物终止当天50和12.5mg / kg剂量的显著肿瘤生长抑制为64％。携带非PDGFβ表达肿瘤细胞的异种移植物也对AZD2932治疗敏感：Calu-6肿瘤的生长在50和12.5mg / kg bid下被抑制81％和72％，并且LoVo肿瘤在50mg / kg bid下被抑制67％。是由于AZFR2932对VEGFR2的有效活性以及由于PDGFR a和b抑制对周细胞和肿瘤相关成纤维细胞的潜在影响。 AZD2932以3-50mg / kg bid间隔10小时，以1：1的比例对p-VEGFR2和p-PDGFβ进行60-80％的抑制[1]。 |
| SMILES | O=C(NC1=CN(C(C)C)N=C1)CC2=CC=C(OC3=C4C=C(OC)C(OC)=CC4=NC=N3)C=C2 |
| 靶点 | PDGFR |
| 动物实验 | 小鼠：为了证实AZD2932对PDGFβ和VEGFR-2磷酸化具有相似的效力，携带C6肿瘤的雌性裸鼠在剔除前5分钟和最后一剂AZD2932和肺部后6小时静脉注射VEGF-A和PDGFBB。之后立即切除。通过蛋白质印迹分析肺裂解物的总和磷酸化VEGFR-2和PDGFβ[1]。 |
| 数据来源文献 | [1]. Plé PA, et al. Discovery of AZD2932, a new Quinazoline Ether Inhibitor with high affinity for VEGFR-2 and PDGFR tyrosine kinases. Bioorg Med Chem Lett. 2012 Jan 1;22(1):262-6. |
| 规格 | 2mg 5mg |
上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
重组 E. coli 菌株，克隆有经修饰的 T4 多聚核苷酸激酶基因。
热失活：65℃ 加热 20 分钟。
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
一般来说，进行激酶反应之后是连接反应。在这种情况下，T4 多聚核苷酸激酶反应在连接酶反应缓冲液中 37℃ 温育 30 分钟即可。反应后的产物可直接进行连接，无需改变缓冲液和进行热失活。如果连接时需要保持其它 DNA 片段的去磷酸化状态，则需要在连接反应前热失活 T4 多聚核苷酸激酶。
T4 多聚核苷酸激酶和 T4 多聚核苷酸激酶（3´ 磷酸酶活性缺失）经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请联系我们。
10,000 units/ml。
关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。
纳豆激酶疾病研究-Wako富士胶片和光
| 供货周期 | 一个月以上 | 应用领域 | 生物产业 |
|---|
纳豆激酶
纳豆是日本传统发酵食品，由发酵大豆制造而成，深受日本民众喜爱。
纳豆激酶是从发酵所用到的纳豆菌（Bacillus subtilis var natto）中纯化得到的高品质纤维溶解蛋白酶。
本品为氨基酸序列确定的高纯度激酶，分子量约为31 kDa（SDS-PAGE），等电位为8.5~8.9。可作为溶栓剂，口服安全，且在热、酸碱条件下较为稳定。
纳豆激酶
Nattokinase
纳豆是日本传统发酵食品，由发酵大豆制造而成，深受日本民众喜爱。
纳豆激酶是从发酵所用到的纳豆菌（Bacillus subtilis var natto）中纯化得到的高品质纤维溶解蛋白酶。
本品为氨基酸序列确定的高纯度激酶，分子量约为31 kDa（SDS-PAGE），等电位为8.5~8.9。可作为溶栓剂，口服安全，且在热、酸碱条件下较为稳定。
（1）由于可以用纳豆菌大量生产，口服也能保持高纤溶活性；
（2）已知有多重检测纳豆激酶活性的方法；其中使用纤维蛋白作底物的检测法，会引起其他蛋白酶（例：枯草杆菌
和胰蛋白酶）的降解，因为难以得到准确活性值。本产品使用合成酰胺作为纳豆激酶的特异性降解底物
（S-2222），可以准确检测活性值；
（3）可用于药理领域的研究。
◆产品概况
来源：Bacillus subtilis var. natto
EC号：EC 3.4.21.62
外观：白色或淡褐色、结晶粉末或呈粉末状
活性：在瓶外标签显示实测值（例：390 IU/g）
.佳pH：7.8
.佳温度：37℃
分子量：约27 kDa
◆氨基酸序列
◆活性单位定义
使用合成酰胺底物 Bz-lle-Glu（OR）-Gly-Arg-pNA（S-2222：积水medical公司产品），
在37℃下1分钟内降解1mol p-硝基苯胺所需酶数量为1单位（IU）
◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| 147-08801 |
Nattokinase 纳豆激酶 |
5 g |
| 145-08802 | 25 g |
◆相关产品
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
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205-15201 |
Tissue Plasminogen Activator, from Human Melanoma Cell 组织纤维酶原，来自人类黑色素瘤细胞 |
生物化学用 |
100 μg |
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路
PI的肌醇环上有5个可被磷酸化的位点，多种激酶可磷酸化PI肌醇环上的第4及第5位点，因而通常在这两个位点之一或两位点发生磷酸化修饰，尤其发生在质膜内侧。通常，PI-4,5-二磷酸（PIP2）在磷脂酶C的作用下，产生二酰甘油（DAG）和肌醇-1,4,5-三磷酸。PI3K转移一个磷酸基团至位点3，形成的产物对细胞的功能具有重要的影响。譬如，单磷酸化的PI-3-磷酸，能刺激细胞迁移（cell trafficking)，而未磷酸化的则不能。PI-3,4-二磷酸则可促进细胞的增殖（生长）和增强对凋亡的抗性，而其前体分子PI-4-磷酸则不然。PIP2转换为PI-3,4,5-三磷酸，可调节细胞的黏附、生长和存活。
Figure 1. Receptor signaling to PI3K
PI3K的活化
PI3K可分为3类，其结构与功能各异。其中研究最广泛的为I类PI3K, 此类PI3K为异源二聚体，由一个调节亚基和一个催化亚基组成。调节亚基含有SH2和SH3结构域，与含有相应结合位点的靶蛋白相作用。该亚基通常称为p85, 参考于第一个被发现的亚型（isotype）,然而目前已知的6种调节亚基，大小从50至110kDa不等。催化亚基有4种，即p110α, β,δ,γ，而δ仅限于白细胞，其余则广泛分布各种细胞中。
PI3K的活化很大程度上参与到靠近其质膜内侧的底物。多种生长因子和信号传导复合物，包括成纤维细胞生长因子（FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、人生长因子（HGF）、血管位蛋白I(Ang1)和胰岛素都能启始PI3K的激活过程。这些因子激活受体酪氨酸激酶（RTK），从而引起自磷酸化。受体上磷酸化的残基为异源二聚化的PI3Kp85亚基提供了一个停泊位点（docking site）。然而在某些情况下，受体磷酸化则会介导募集一个接头蛋白（adaptor protein）。比如，当胰岛素激活其受体后，则必须募集一个胰岛素受体底物蛋白（IRS)，来促进PI3K的结合。相似的，当整连蛋白integrin(非RTK)被激活后，粘着斑激酶（FAK) 则作为接头蛋白，将PI3K通过其p85停泊。但在以上各情形下，p85亚基的SH2和SH3结构域均在一个磷酸化位点与接头蛋白结合。PI3K募集到活化的受体后，起始多种PI中间体的磷酸化。与癌肿尤其相关的PI3K转化PIP2为PIP3。
PIP3作为锚定物（anchor）和激活物（activator）
许多蛋白含有一个Pleckstrin Homology（PH）结构域，因而可使其与PI-3,4-P2或PI-3,4,5-P3相结合。这种相互作用可以控制蛋白与膜结合的时间与定位，通过这种方式来调节蛋白的活性。蛋白与脂质间的这种相互作用亦可能引起蛋白构像的变化而改变蛋白的功能。PI3K激活的结果是在质膜上产生第二信使PIP3, PIP3与细胞内含有PH结构域的信号蛋白AKT和PDK1(phosphoinositide dependent kinase-1)结合, 促使PDK1磷酸化AKT蛋白的Ser308导致AKT活化。其他PDK1的底物还包括PKC（蛋白激酶C）、S6K(p70S6)和SGK(serum/
glucocorticoid regulated kinases) 。AKT, 亦称为蛋白激酶B(PKB)，是PI3K下游主要的效应物。AKT可分为3种亚型（AKT1、AKT2、AKT3或PKBα, PKBβ,PKBγ），3种亚型的功能各异，但也有重叠。
AKT的作用
活化的AKT通过磷酸化多种酶、激酶和转录因子等下游因子，进而调节细胞的功能。譬如，AKT刺激葡萄糖的代谢：AKT激活AS160(AKT底物，160kDa)，进而促进GLUT4转座和肌细胞对葡萄糖的吸收。AKT也磷酸化GSK3β而抑制其活性，从而促进葡萄糖的代谢和调节细胞的周期。AKT磷酸化TSC1/2(tuberous sclerosis complex)，可阻止其对小G蛋白Rheb(Ras homology enriched in brain)的负调控，进而使得Rheb富集以及对纳巴霉素(rapamycin)敏感的mTOR复合体(mTORC1)的活化。这些作用可激活蛋白的翻译，增强细胞的生长。
AKT通过下游多种途径对靶蛋白进行磷酸化而发挥抗凋亡作用。ATK激活IkB激酶（IKKα）,导致NF-κB的抑制剂IκB的降解, 从而使NF-κB从细胞质中释放出来进行核转位, 激活其靶基因而促进细胞的存活。AKT磷酸化Bcl-2家族成员BAD，使其与14-3-3结合而阻止其与Bcl-XL结合起始凋亡。此外，AKT能抑制蛋白水解酶caspase-9的活性而阻止凋亡级联反应的激活。肿瘤抑制因子p53为一转录因子，调控凋亡、DNA修复和细胞周期的停滞。Akt能通过磷酸化P53结合蛋白MDM2影响P53的活性, 磷酸化的MDM2转位到细胞核与P53结合, 通过增加P53蛋白的降解而影响细胞存活。Forkhead转录因子FOXO1( 或FKHR)调节涉及多种细胞功能基因的表达，包括凋亡、DNA修复和细胞周期的停滞和葡萄糖代谢等，AKT磷酸化FOXO1，抑制其核转位而阻止其转录激活作用。
参考文献
PI3K研究相关产品
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| Cayman |
10505
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Kinase Screening Library (96-Well) |
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BioVision
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K706-400
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PhosphoSeek™ P I3-Kinase Fluorometric Assay Kit
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AXXORA
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GYR-GK004B
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Phosphatidylinositol 3 Kinase (PI3K) ActivityAssayBase Kit
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AXXORA
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GYR-GK004
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Phosphatidylinositol 3 Kinase (PI3K) Activity Assay Kit
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Millipore
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17-493
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PI3 Kinase Activity/Inhibitor ELISA
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| 抑制剂 | ||
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Cayman
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10010177
|
PI3-Kinase α Inhibitor 2
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Cayman
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15279
|
CAL-101
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|
Cayman
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70920
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LY294002
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|
Cayman
|
11589
|
IC-87114
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Cayman
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11600
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GDC 0941
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|
Cayman
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10009052
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AS-252424
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Cayman
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9000980
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AS-605240 (potassium salt)
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Cayman
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10010591
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Wortmannin
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Cayman
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13242
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3-Methyladenine
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ENZO
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BML-P311
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PI3K SH3 domain binding peptide
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ENZO
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BML-ST425
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PI3K-SH2-OMT
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ENZO
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BML-AP502
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3-Methyladenine
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ENZO
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ALX-151-026
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N-Acetyl-Asp-Tyr(2-malonyl)-Val-Pro-Met-Leu-NH2
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ENZO
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ALX-151-027
|
N-Acetyl-Asp-Tyr(PO3H2)-Val-Pro-Met-Leu-NH2
|
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ENZO
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BML-EI390
|
AS-041164
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ENZO
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ALX-270-465
|
AS-252424R
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ENZO
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ALX-270-461
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AS-604850
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ENZO
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ALX-270-455
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Compound 15e
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ENZO
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BML-ST420
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LY 294002
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|
ENZO
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BML-P305
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SOS-1 (human) (1149-1158)
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ENZO
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ALX-270-464
|
TGX-221
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|
ENZO
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BML-ST415
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Wortmannin
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BioVision
|
K856-5
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DiscoveryPak™ PI 3-Kinase Inhibitor Set
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BioVision
|
K857-11
|
PathwayReady™ PI3-K/Akt/mTOR Signaling Inhibitor Panel
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AXXORA
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BML-P311-0001
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PI3K SH3 domain binding peptide
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| 抗体 | ||
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ENZO
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ADI-KAM-PI200
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PI3 kinase, mAb (AB6)
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ENZO
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ALX-210-747
|
Phosphoinositide 3-kinase p110δ(human),pAb
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GeneTex
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GTX50858
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PI3K P85 (phospho Tyr467) antibody
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GeneTex
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GTX59597
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PI3K beta antibody, C-term
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GeneTex
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GTX59596
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PI3K beta antibody, N-term
|
|
GeneTex
|
GTX111173
|
PI3 kinase p110 beta antibody [N3C2],Internal
|
|
GeneTex
|
GTX300032
|
PI3K-AKT pathway Antibody Panel
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|
GeneTex
|
GTX100462
|
PI3 kinase p110 alpha antibody
|
|
GeneTex
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GTX104639
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PI3 kinase p110 gamma antibody [C3], C-term
|
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GeneTex
|
GTX60565
|
PIK3CA antibody [4F3]
|
|
GeneTex
|
GTX61208
|
PI3-kinase p110 subunit delta antibody [Y387]
|
|
GeneTex
|
GTX89900
|
PIK3CG antibody, C-term
|
|
GeneTex
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GTX81224
|
PIK3R1 antibody, Y580
|
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GeneTex
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GTX20253
|
PI3 Kinase p55 gamma antibody [V2]
|
|
BioVision
|
3146-100
|
PI3Kβ Antibody
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BioVision
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3152-100
|
PI3Kβ Antibody
|
|
AXXORA
|
ASB-ARP32117 |
PIK3CB antibody – C-terminal region
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| (重组)蛋白 | ||
|
ENZO
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LX-201-119 | Phosphoinositide 3-kinase p110α/p85(bovine (recombinant) |
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ENZO
|
ALX-201-055
|
Phosphoinositide 3-kinase p110γ (human), (recombinant)
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|
ENZO
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BML-SE436
|
PI3 kinase p110α/p85α (human),(recombinant)
|
|
BioVision
|
7766-5
|
PI3K (p85⍺) Protein
|
|
BioVision
|
3959BP-50
|
PI3K Blocking Peptide
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AXXORA
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BV-7766
|
PI3K (p85 alpha) Protein
|
|
AXXORA
|
ALX-201-119-C005
|
Phosphoinositide 3-kinase p110α/p85(bovine) (recombinant)
|
上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs（NEB）酶试剂全线产品，欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。
T4 多聚核苷酸激酶能够催化 ATP 的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链（双链或单链 DNA 或 RNA）的 5´ -羟基末端以及 3´ -单磷酸核苷上。T4 多聚核苷酸激酶（NEB #M0201）还具有 3´ 磷酸酶活性，将 3´ -磷酸基团从寡核苷酸的 3´ 磷酸末端、脱氧 3´ -单磷酸核苷和脱氧 3´ -二磷酸核苷上水解掉。经修饰后的酶（NEB #M0236）具有所有激酶的活性，但是缺失了 3´ 磷酸酶活性。
重组 E. coli 菌株，克隆有 T4 多聚核苷酸激酶基因。
达到最佳酶活力，需要新鲜缓冲液（在旧缓冲液中，由于氧化造成的 DTT 含量减少会降低酶活力）。
放射性标记反应：50 μl 反应体系中，用 1X T4 多聚核苷酸激酶反应缓冲液、50 pmol 的 γ-[32P] ATP 和 20 单位的酶 37℃ 温育 30 分钟可催化 1-50 pmol 的 5´ 末端磷酸化。[33P] ATP 可代替 [32P] ATP 作标记反应。
CTP、GTP、TTP、UTP、dATP 及 dTTP 均可替代 ATP 作为磷酸供体。
DNA 或 RNA 磷酸化反应（放射性和非放射性）操作流程请联系我们。
要提高平齐末端或 5´ 凹陷末端的磷酸化效率，可在加入 T4 多聚核苷酸激酶前，先将 DNA 溶液于 70℃ 加热 5 分钟，然后冰上冷却，并加入 5%（w/v）的 PEG-8,000。
T4 多聚核苷酸激酶需要 ATP 才能发挥活性，但是为了适用于高活力的放射性标记反应，在随酶提供的反应缓冲液中不含 ATP。
T4 多聚核苷酸激酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请联系我们。
1 单位即 1 个 Richardson 单位，指 37℃条件下，30 分钟内催化 1 nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量（1）。单位活性检测条件请联系我们。
10,000 units/ml。
关于该酶性质和产品应用的参考文献，请联系我们。
渥曼青霉素
| 有效期 | 2年 |
| EC | EINECS 214-538-0 |
| MDL | MFCD00133927 |
| 别名 | 奥特曼宁 |
| 英文名称 | Wortmannin |
| CAS | 19545-26-7 |
| 分子式 | C23H24O8 |
| 分子量 | 428.43 |
| 储存条件 | 2-8℃ |
| 纯度 | HPLC≥98% |
| 外观（性状） | White Solid |
| 单位 | 瓶 |
| In Vitro | Wortmannin不可逆地抑制磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-激酶）活性，与110-kDa蛋白结合（IC50为3 nM），对RBL-2H3细胞中的PI4-激酶没有影响。 Wortmannin还抑制FcεRI介导的组胺分泌和白三烯释放，对酪氨酸激酶Lyn的激活没有影响[1]。在完整的A549肺腺癌细胞中，渥曼青霉素在与放射增敏所需的浓度密切相关的浓度下抑制DNA-PK和ATM。此外，用渥曼青霉素预处理A549细胞导致抗辐射DNA合成，这是ATM缺陷细胞的特征性异常[2]。渥曼青霉素对MLCK的抑制不受钙调蛋白或肽底物的影响，而高浓度的ATP则会降低。渥曼青霉素直接与MLCK的催化结构域相互作用，并导致酶活性的不可逆损失。 Wortmannin对cAMP依赖性蛋白激酶，cGMP依赖性蛋白激酶和钙调蛋白依赖性蛋白激酶II无抑制作用，对蛋白激酶C活性影响不大[3]。 Wortmannin也是Polo样激酶3（Plk3）的有效抑制剂。 Wortmannin有效抑制纯化的Plk3的活性，IC50为48 nM。渥曼青霉素是Plk1和AX7503的有效抑制剂，四甲基罗丹明 – 渥曼青霉素缀合物是用于标记Plk1的活性依赖性探针。渥曼青霉素抑制Plk1-AX7503反应性，IC50为5.8nM。渥曼青霉素以剂量依赖性方式抑制Plk3与AX7503反应。用于抑制AX7503标记Plk3的渥曼青霉素的IC 50值确定为49nM。 Wortmannin通过靶向其ATP结合位点中的保守赖氨酸残基共价标记Plk1和Plk3。渥曼青霉素抑制Plk1和Plk3的效力与其对PI3K的抑制相似。 Wortmannin也抑制Plk2和Plk4 [6]。 |
| In Vivo | Wortmannin在小鼠的正常组织（肺，心脏和脑匀浆）和肿瘤组织中抑制磷脂酰肌醇3-激酶 – 蛋白激酶B（PKB）/ Akt磷酸化，没有死亡率或0.7mg / kg的急性毒性。结合LY188011，渥曼青霉素可显著增加细胞凋亡，抑制原位肿瘤的肿瘤生长，而单药治疗均不能[4]。渥曼青霉素（1 mg / kg）抑制小鼠SW1990的腹膜转移，没有任何体重减轻[5]。 |
| 激酶实验 | 用肽底物（KKRPQRATSNVFS-NH2）或肌球蛋白轻链测定MLCK活性。肽底物（24μM）在含有25mM Tris-HCl（pH 7.5），0.5mg / mL牛血清白蛋白，4mM MgCl 2,0.5mM CaCl 2,2.6nM钙调蛋白，1.5nM MLCK和400的反应混合物中磷酸化。 μMATP，终体积为0.25 mL。在没有ATP的28℃下预孵育10分钟后，通过在28℃下加入ATP开始反应，并在30分钟后通过加入0.1mL 10％（v / v）乙酸终止反应。通过高效液相色谱分析混合物：柱，Unisil Pack 5C18 4.6×150mm;溶剂，18％（v / v）乙腈，0.1％（v / v）三氟乙酸水溶液;流速，1.0 mL / min;温度，40°C;检测，220nm处的吸光度。由磷酸化形式的峰面积与未磷酸化形式的峰面积之比计算反应百分比。在上述条件下测量的比活性为0.81μmol/ min / mg。肌球蛋白轻链（108μg/ mL）在含有25mM Tris-HCl（pH 7.5），0.5mg / mL牛血清白蛋白，4mM MgCl 2,0.5mM CaCl 2,4.2nM钙调蛋白，0.92nM酶的反应混合物中磷酸化，和10μM[γ-32P] ATP（100-900cpm / pmol），终体积为0.25mL。在没有ATP的30℃下预孵育3分钟后，通过在30℃下加入[γ-32P] ATP开始反应，并在5分钟后通过加入0.125mL三氯乙酸终止反应。将酸可沉淀的材料收集在硝酸纤维素膜过滤器上，并用4mL 1mL等分试样的5％（v / v）三氯乙酸洗涤。使用Packard Tri-Carb液体闪烁光谱仪4530型在甲苯闪烁液中测量过滤器上的放射性。在该条件下测量的比活性为1.23μmol/ min / mg。 |
| SMILES | O=C1C([C@@](CC2)([H])[C@@]3(C)C2=O)=C([C@H](OC(C)=O)C3)[C@]4(C)C5=C1OC=C5C(O[C@@H]4COC)=O |
| 靶点 | PI3K；Polo-like Kinase (PLK)； DNA-PK；Autophagy |
| 动物实验 | 将无特定病原体的无病毒BALB / c雄性小鼠（5周）保持在无菌条件下，在具有过滤盖的笼子中的层流室中，并喂食灭菌的小鼠饮食和水。为了诱导腹膜转移，通过吸入给予七氟醚麻醉小鼠，并且在没有FBS的情况下孵育后，使用23号针将SW1990细胞（1×10 6细胞/小鼠）在100μLPBS中注射到腹膜腔中。 24小时灭活Akt。为了检查PI3K抑制剂的作用，在接种癌细胞后立即用1.0,0.5或0.25mg / kg /天的渥曼青霉素或载体（PBS +二甲基亚砜）腹膜内处理小鼠。治疗持续连续20天。二十天后，处死小鼠并检查腹膜转移性肿瘤的体重，腹水，数量和总重量。超过相同年龄（数周）的正常裸鼠的肠系膜和更大网膜的平均重量的重量被认为是转移性肿瘤的净重，以便最小化血液或组织的混合。 |
| 数据来源文献 | [1]. Yano H, et al. Inhibition of histamine secretion by wortmannin through the blockade of phosphatidylinositol 3-kinase in RBL-2H3 cells. J Biol Chem, 1993, 268(34), 25846-25856.
[2]. Sarkaria JN, et al. Inhibition of phosphoinositide 3-kinase related kinases by the radiosensitizing agent wortmannin. Cancer Res, 1998, 58(19), 4375-4382. [3]. Nakanishi S, et al. Wortmannin, a microbial product inhibitor of myosin light chain kinase. J Biol Chem, 1992, 267(4), 2157-2163. [4]. Ng SS, et al. Wortmannin inhibits pkb/akt phosphorylation and promotes gemcitabine antitumor activity in orthotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice. Clin Cancer Res, 2001, 7(10), 3269-3275. [5]. Teranishi F, et al. Phosphoinositide 3-kinase inhibitor (wortmannin) inhibits pancreatic cancer cell motility and migration induced by hyaluronan in vitro and peritoneal metastasis in vivo. Cancer Sci. 2009 Apr;100(4):770-7. [6]. Liu Y, et al. Polo-like kinases inhibited by Wortmannin. Labeling site and downstream effects. J Biol Chem. 2007 Jan 26;282(4):2505-11 |
| 规格 | 1mg 5mg |
是一种有效的，不可逆的，选择性PI3K 抑制剂。还可以抑制自噬体的形成，并有效抑制DNA-PK/ATM和Polo-like kinase 1 (PlK1)。