T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0酶试剂盒Takara Clontech

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T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0
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Takara 2541A T7 RNA Polymerase ver.2.0 20,000 U ¥2,678 T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0 T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0 T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0
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■ 制品内容(Code No. 2541A)
T7 RNA Polymerase ver.2.0 (200 U/μl) 20,000 U
10X T7 RNA Polymerase Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本制品以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTPs为底物,转录启动子下游区域,合成与模板互补的单链RNA。与附带的buffer一起用于体外转录 (IVT) 反应时,可以大量制备高质量的RNA。
本制品是T7 RNA Polymerase(Code No. 2540A/B)的升级产品,每个反应(20 μl体系)的RNA合成量提高约7倍(图1),性能更强!
T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0
图 1. 本制品与旧产品合成 FLuc RNA(约 1.9 kb)时的产量比较(20 μl 体系)
 
* 典型的 T7 启动子序列和转录起点
为 IVT 反应制备模板 DNA 的典型 T7 启动子序列如下所示。将转录起始点(+1 位置)的碱基设置为“G”对于高效的 RNA 合成很重要,但需要根据要合成的RNA序列和用于5′-cap修饰的Cap类似物的特点来设计模板,所以要根据目的准备模板DNA。
T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0
 
■ 保存
-20℃
 
■ 起源
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase.
 
■ 性质
1. 分子量:约99 kDa
2. 辅因子:Mg2+
 
■ 活性定义
在 37℃,1 小时内使 1 nmol [3H] GMP 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 使用 Cap 类似物合成带帽的 mRNA
2. 长链非编码 RNA 的合成
3. guide RNA 的合成
4. siRNA前体的合成
5. 用于 RT-qPCR 的 RNA 标准模板的合成
6. 高标记RNA 探针的合成
 
■ 使用注意
1. 酶不要剧烈搅拌。
2. 当 dsDNA 模板、试剂、试管或微量移液器吸头被 RNase 污染时,合成的 RNA 的产量会降低或者出现片段化。在实验过程中应采取预防措施以避免 RNase 污染,例如戴一次性手套和使用专门用于 RNA 实验的试管和微量移液器吸头。
3. 为了合成长度一致的RNA,通常使用线性dsDNA(例如线性化质粒和 PCR 产物)用于体外转录。有报道称,模板DNA末端应为5’-突出或平端,以避免出现非特异性产物。
4. 缓冲液中的亚精胺会与核酸形成复合物并可能产生沉淀,因此模板 DNA 应在加酶之前即倒数第二步再加入反应体系中。

 
■ 使用例
T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase ver.2.0
 
37℃孵育 1-2 小时。
 
 

页面更新:2024-01-31 16:04:57

HQ级别T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase, HQ酶试剂盒Takara Clontech

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HQ级别T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase, HQ
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Takara 2542A T7 RNA Polymerase, HQ 200,000U 询价 HQ级别T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase, HQ HQ级别T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase, HQ HQ级别T7 RNA聚合酶T7 RNA Polymerase, HQ
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■ 制品内容(Code No. 2542A)
T7 RNA Polymerase, HQ (200 U/μl) 200,000 U
10×IVT Reaction Buffer, HQ 10 ml
 
■ 制品说明
T7 RNA Polymerase, HQ (high quality)是一种可用于基础研究的产品,用于制备非临床试验的医药品原药、开发符合GMP指南的医药品制造工艺以及开发RNA药物等。本产品的终反应液中,不含人或动物源性成分以及β内酰胺类化合物。
本酶具有与T7 RNA Polymerase ver.2.0(Code No. 2541A)同等的性能,且能够以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为基质,通过转录启动子下游区域,在体外合成单链RNA。与附带的反应缓冲液(10X IVT Reaction Buffer, HQ)配合使用时,可大量制备高质量的RNA,适用于RNA医药领域的研发。
 
■ HQ级别品质
本产品的终反应液中,不含人或动物源性成分以及β内酰胺类化合物。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying a plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase
 
■ 性质
1. 分子量:约99.8 kDa
2. 辅因子:Mg2+
 
■ 活性定义
在37℃条件下,1小时内生成0.5μg的1.9kb FLuc RNA所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
 
■ 用途
1. 合成RNA,用于酶的带帽结构
2.合成基于Cap analog带帽结构的mRNA
3.长链非编码RNA(Long non-coding RNA)的合成
4.向导RNA(guide RNA)的合成
5.siRNA前体的合成
6.用于RT-qPCR的RNA标准模板的合成
7.高特异性RNA探针的合成
 
■ 使用注意
1. 请勿剧烈搅拌本酶。
2. 当dsDNA模板、试剂、试管或微量移液器枪头被RNase污染时,合成的RNA产量会降低或者出现片段化。在实验过程中应采取预防措施以避免RNase污染,例如戴一次性手套和使用专门用于RNA实验的试管和微量移液器枪头。
3. 为合成长度均等的RNA,可将含有T7启动子的线性化质粒或PCR产物等作为DNA模板来使用。理想的线性化模板末端应为5’-突出或平端。
4. 高质量10×IVT Reaction Buffer含有亚精胺。亚精胺与核酸形成复合体,在某些情况下可能产生沉淀,因此模板DNA应在加酶之前即倒数第二步再加入反应体系中。
 
 

页面更新:2024-01-31 16:34:42

Poly(A) 聚合酶-Poly(A) Polymerase酶试剂盒Takara Clontech

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Poly(A) 聚合酶-Poly(A) Polymerase
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Takara 2181 Poly(A) Polymerase 20 U ¥1,062 Poly(A) 聚合酶-Poly(A) Polymerase Poly(A) 聚合酶-Poly(A) Polymerase Poly(A) 聚合酶-Poly(A) Polymerase
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■ 制品内容
Poly (A) Polymerase (2 U/μl) 20 U
10X Poly (A) Polymerase Buffer 1 ml
10 mM DTT 1 ml
25 mM MnCl2 1 ml
0.1% BSA* 500 μl
100 mM ATP 8 μl
   
* BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
本酶催化在各种多聚核糖核酸的3′末端聚合A碱基的反应。反应中使酶达到高活性所需的盐浓度为300-400 mM NaCl。能以多种单链RNA作引物,双链RNA以及合成的多聚核苷酸、短的寡聚核苷酸等不宜作引物;DNA也不能作引物。本酶因聚合AMP碱基,故只能用ATP作底物,ADP、dATP均不能作为底物。另外,UTP、CTP的掺入不足ATP的5%,而GTP也不能作为底物进行聚合。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ ATP的掺入个数和时间的关系
以1 mM ATP作底物,15 U的Poly(A) Polymerase作用于84 μg RNA所得到的结果如下:
反应时间(分钟) 0 5 10 30 60
Poly(A)碱基数 0 10 20 40 75
 
■ 起源
Escherichia coli B
 
■ 活性定义
以ATP为底物,在37℃、pH7.9的条件下,10分钟内把1 nmol的AMP聚合到引物上所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
 
■ 用途
1. 在RNA上加上Poly (A) 尾。
2. RNA的3′末端标记。
 
 

页面更新:2024-01-25 16:25:27

Bsu DNA 聚合酶,大片段 #M0330L 1,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理(DNA 标记、末端平齐化等)

Bsu DNA 聚合酶,大片段                              收藏

Bsu DNA 聚合酶,大片段                                    #M0330L 1,000 units Bsu DNA 聚合酶,大片段                                    #M0330L 1,000 units Bsu DNA 聚合酶,大片段                                    #M0330L 1,000 units Bsu DNA 聚合酶,大片段                                    #M0330L 1,000 units Bsu DNA 聚合酶,大片段                                    #M0330L 1,000 units

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特性

·随机引物法标记
·cDNA 第二条链的合成
·单个 dA 的加尾
·链置换的 DNA 合成 

概述

Bsu DNA 聚合酶,大片段保留了嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus subtilis) DNA 聚合酶 I 的 5´→3´ 聚合酶活性,但是缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域,该大片段自身缺失 3´→5´ 核酸外切酶活性。 

来源

重组的 E. coli 菌株,携带有嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DNA 聚合酶 I 基因(起始于第 297 个密码子,因而缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域)。 

浓度

5,000 units/ml。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

注意事项

由于缺乏3 ´ → 5 ´ 核酸外切酶活性,Bsu DNA 聚合酶,大片段不能切除 3´ 未配对的突出末端,因而不适用于生成平齐末端。
25℃ 时 Bsu DNA 聚合酶,大片段 保留 50% 的活性,是同温度下 Klenow 片段(3´→5´ exo)的两倍。 

参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请联系我们。 www.jinpanbio.cn,www.jinpanbio.com。 

T4 DNA 聚合酶 #M0203L 750 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – DNA 处理(DNA 标记、末端平齐化等)

T4 DNA 聚合酶                              收藏

T4 DNA 聚合酶                                   #M0203L 750 units T4 DNA 聚合酶                                   #M0203L 750 units T4 DNA 聚合酶                                   #M0203L 750 units T4 DNA 聚合酶                                   #M0203L 750 units

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相关产品

快速末端平齐化™ 试剂盒

特性

·缺口填充(无链置换活性)
·切除 3´ 突出末端或补平 5´ 突出端,形成平末端
·通过置换合成法标记探针
·单链删除后亚克隆 

概述

在模板及引物存在的条件下,T4 DNA 聚合酶催化沿 5´→3´ 方向合成 DNA。此酶还具有 3´→5´ 外切核酸酶的活性,该活性比 DNA 聚合酶 I 强。与 DNA 聚合酶 I 不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5´→3´ 核酸外切酶活性。 

来源

从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶基因的 E.coli 中提纯制备的。 

浓度

从一种携带有高表达 T4 DNA 聚合酶基因的 E.coli 中提纯制备的。 

热失活

75℃ 20 分钟。 

注意事项

由于该酶具有 3´→5´ 核酸外切酶的活性,提高反应温度、增加酶量、没有加入 dNTP 或反应时间过长都可能造成 DNA 末端碱基被切除形成凹陷。

 

参考文献

 

Bst DNA 聚合酶,大片段 #M0275L 8,000 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

Bst DNA 聚合酶,大片段                              收藏

Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units

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(高浓度15X)8,000 units
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特性

 DNA 等温扩增
 富含 GC 区域的 DNA 测序
 纳克级含量 DNA 模板的快速测序

 可用于要求嗜温链置换的实验 

Bst DNA 聚合酶,大片段                                    #M0275L 8,000 units

概述

Bst DNA 聚合酶,大片段是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分,具有 5´→3´ DNA 聚合酶活性,但
缺失 5´→3´ 核酸外切酶活性。

来源

来源于 E.coli 菌株,此菌株含有来自 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的基因,该基因缺失了 5´→3´ 核酸外切酶结构域。应用基因重组技术,将麦芽糖结合蛋白(MBP)基因与该基因融合表达,融合蛋白经纯化后再在体外切除掉 MBP,纯化后的聚合酶不含 MBP。

浓度

8,000 和 120,000 units/ml。

热失活

80℃ 20 分钟。 

使用注意

建议反应温度不要超过 70℃。Bst DNA 聚合酶,大片段不能用于热循环测序或 PCR。

参考文献

 

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶 #M0535L 500 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 高保真PCR

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                              收藏

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units

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Phusion 聚合酶信息

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units

概述

由于 DNA 序列需要在扩增后进行校正,所以拥有高保真度的 DNA 聚合酶对于 PCR 应用至关重要。由 NEB 生产、质量控制的 Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA 聚合酶兼备高保真度和稳定扩增的性能,适用于所有 PCR 应用。其独特的结构包括一个类似 Pyrococcus 的酶和一个掺入率增强结构域,二者融合在一起。这种组合提升了聚合反应的保真性和速度。可供选择的试剂包括单酶、预混液和试剂盒。Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶有单酶和预混液剂型可供选择。Phusion DNA 聚合酶可用于长片段的扩增,是克隆实验的理想
选择。

其它剂型

Phusion 和 Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择,Phusion 预混液有含 HF 或 GC 缓冲液两种形式。
Phusion PCR 试剂盒包含 Phusion 聚合酶、Phusion HF 和 GC 缓冲液、dNTPs、MgCl2、DMSO 和 DNA
Marker。

浓度

2,000 units/ml。

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units
Phusion 超保真 DNA 聚合酶扩增片段的产量更高,延伸时间更短。使用不同的聚合酶扩增一段 1.2 kb 长
度的 C. elegans 基因组片段。所有扩增反应按照厂家推荐条件重复进行(30 个循环、30 秒或 2 分钟的延伸时间)并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units
Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶具有超强扩增能力。
除了 1.3 kb C. elegans 扩增片段,其它扩增片
段模板均为 human Jurkat。扩增长度如上胶图所示。所有扩增反应按照厂家推荐条件(30 个热循
环)重复进行并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

* Phusion DNA Polymerase was developed by Finnzymes Oy, now a part of Thermo Fisher Scientific.
This product is manufactured by New England Biolabs, Inc. under agreement with, and under the performance specifications of Thermo Fisher Scientific. Phusion® is a registered trademark and property of Thermo Fisher Scientific.

许可/专利/免责:参见 390-391 页。

Phusion® 热启动 Flex DNA 聚合酶                                     #M0535L 500 units

Poly(U) 聚合酶 #M0337S 60 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

Poly(U) 聚合酶                              收藏

Poly(U) 聚合酶                                  #M0337S 60 units Poly(U) 聚合酶                                  #M0337S 60 units Poly(U) 聚合酶                                  #M0337S 60 units

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小鼠 RNase 抑制剂
rNTP 套装

特性

 用 UTP 标记 RNA
 为 RNA 添加 poly(U) 尾,用于克隆
 研究 RNA 转染至真核细胞的稳定性和翻译效率
 2´ O-甲基的 3´ 修饰末端添加 poly(A) 尾 

概述

Poly(U) 聚合酶催化 UTP 或 ATP 转化的 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端,该反应不依赖模板的存在。 

来源

重组 E. coli ,携带有 Schizosaccharomyces pombe Cid1 的 Poly(U) 聚合酶基因。 

反应条件

1X NEBuffer 2
[50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ],加入 1 mM UTP(不随酶提供),37℃ 温育。
热失活:65℃ 20 分钟。 

质保声明

无 DNase、RNase 和磷酸酶污染。 

单位定义

1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,10 分钟催化 1 nmol 的 UMP 掺入 RNA 所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn。 

浓度

2,000 units/ml。

注意事项

在 NEBuffer 2 中 Poly(U) 聚合酶将催化 UTP 或 ATP 转化成 UMP 或 AMP 添加到 RNA 3´ 端。Poly(U) 加尾长度随 UTP 和引物浓度而变化。低引物浓度下(< 100 pmol) Poly(U) 聚合酶的掺入率十分高。 

参考文献

 

E. coli RNA 聚合酶,核心酶 #M0550S 100 units-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – RNA 试剂 – RNA 合成

E. coli RNA 聚合酶,核心酶                              收藏

E. coli RNA 聚合酶,核心酶                                #M0550S 100 units

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相关产品

E. coli RNA 聚合酶, 核心酶

E. coli RNA 聚合酶, 全酶

特性

 E. coli 启动子启动的 RNA 合成
 转录起始研究
 PURExpress 体外转录 

概述

E. coli RNA 聚合酶,核心酶由 5 种亚基组成,分别为 α、α、β´ 、β、和 ω。此酶无 σ 因子,因此不会对细菌和噬菌体 DNA 启动子特异性启动转录。本酶保留了从非特异性启动序列转录 RNA 的功能。添加 σ 因子后,本酶可从特定细菌和噬菌体的特异启动子启动合成 RNA。核心酶分子量约 400 kDa。
E. coli RNA 聚合酶,全酶由核心酶和 σ 因子 70 组成,能从 σ 因子 70 特定的细菌和噬菌体启动子处起始合成RNA。 

来源

大肠杆菌 RNA 聚合酶,核心酶是由大肠杆菌 BL21 分离而得。σ 因子 70 是由携带 σ 因子 70 克隆基因的大肠杆菌纯化而来。 

反应条件

40 mM Tris-HCl,pH 7.5,150 mM KCl,10 mM MgCl2,0.01% Triton-X-100,1 mM DTT,每种 rNTP 各 0.5 mM 和 DNA 模板。37℃ 温育。 

质保声明

无 DNA 内、外切酶和 RNase 污染。 

单位定义

1 单位是指在 37℃ 条件下,10 分钟内可将 1 nmol NTP 掺入 RNA 所需的酶量,单位活性检测条件请联系我们。 www.jinpanbio.com 或 www.jinpanbio.cn 。 

浓度

1,000 units/ml。 

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶 #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系)-NEB酶试剂 New England Biolabs

上海金畔生物科技有限公司代理New England Biolabs(NEB)酶试剂全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

产品资料 – 表观遗传学 – 表观遗传学

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                              收藏

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系) EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系)

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#M0490L
500 次反应(50 μl 反应体系)
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100 次反应(50 μl 反应体系)
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EpiMark 聚合酶信息

EpiMark® 热启动 Taq DNA 聚合酶                                       #M0490L 500 次反应(50 μl 反应体系)

概述

EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶是重亚硫酸盐处理的 DNA 扩增操作的绝佳选择。该酶是 Taq DNA 聚合酶和一种对温度敏感的适配体抑制剂的混合物。该抑制剂能够与聚合酶可逆结合,在 45℃ 以下抑制聚合酶活性,而在 PCR 热循环条件下又可以释放聚合酶,所以该酶可以在室温下操作却不需要额外高温步骤来激活聚合酶。

来源

来源于 E. coli 菌株,该菌株携带有来自 Thermus aquaticus YT-1 的 Taq DNA 聚合酶基因。

浓度

5,000 units/ml。