小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)酶试剂盒Takara Clontech

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小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634352 SMART-Seq® Mouse BCR (with UMIs) 24 Rxns ¥19,351 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634353 SMART-Seq® Mouse BCR (with UMIs) 96 Rxns ¥63,718 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634351 SMART-Seq® Mouse BCR (with UMIs) 4 x 96 Rxns ¥239,105 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634756 Unique Dual Index Kit (1–24) 24 Rxns ¥2,737 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634752 Unique Dual Index Kit (1–96) 96 Rxns ¥7,370 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634753 Unique Dual Index Kit (97–192) 96 Rxns ¥7,370 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634754 Unique Dual Index Kit (193–288) 96 Rxns ¥7,370 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
Clontech 634755 Unique Dual Index Kit (289–384) 96 Rxns ¥7,370 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs) 小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
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SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
· 完整的BCR分析:支持分析重链(IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) 和轻链 (IgK, IgL)
· 灵活的样本起始条件:支持10 ng – 1 μg 小鼠脾脏、骨髓、淋巴结、全血以及PBMC来源的高质量RNA起始(RIN>7)
· 简化的操作流程:组分中的重、轻免疫球蛋白链引物以及酶均是预混形式
· 更可靠测序数据:SMARTer Oligo上引入UMI,用于校正测序错误和PCR偏差
· 灵活的测序平台选择:可自由选择V(D)J全长分析,或只分析CDR3
 
■ 产品说明
SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)是一款小鼠BCR NGS文库构建试剂盒。该试剂盒整合SMART(Switching Mechanism at 5′ end of RNA Template)全长cDNA合成技术与5’RACE技术,可捕获重链(IgA/D/E/G/M) 和轻链 (IgK/L)基因完整的V(D)J可变区,用于后续NGS分析。
该试剂盒支持不同起始量的RNA(RIN>7)起始,均可获得高品质的测序文库。比如小鼠脾脏、骨髓或者外周血单核细胞(PBMC)纯化的10 ng-1 μg的总RNA,也支持从小鼠血液或者淋巴结中提取的RNA样本。
该试剂盒中的重、轻免疫球蛋白链引物以及酶均是预混形式,减少了试剂组分数量和操作步骤。另外该试剂盒还包括特别的分子条形码(UMI),可以消除PCR错误或duplication以及测序偏向,从而确保获得更准确和可靠的结果。此外,搭配使用的双端特殊index(UDI,Unique Dual Index),可以提供完整的从样品到文库构建的实验体验。
该试剂盒所建文库支持更多样的测序平台。既支持Miseq平台(分析V(D)J全长信息),也支持其它Illumina平台(分析CDR3区),节约成本。
 
■ 应用
· 用于分析组织和循环系统中的B细胞的克隆组织和多样性,了解它们如何影响B细胞的分化途径和功能。
· 发现具有高亲和力的BCR,以便更好地为疫苗接种或传染病治疗提供指导。
· 追踪抗原特异性B细胞在HIV以及其他疾病的小鼠模型中过继转移后的变化和迁移。
· 检查BCR序列,以研究针对新表位的自体抗体随时间的变化,以及这些变化如何与严重的自身免疫疾病相关联,如狼疮。
 
■ 建库原理
小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
 
■ 不同起始量的克隆型检测数据
小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
为了评价SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)的性能,以10 ng,100 ng和1,000 ng小鼠脾脏来源RNA起始制备文库,生成150万个测序reads。
Panel A. 检测所有重链(IgA/D/G/M,除了IgE,因为它在正常小鼠样本中的表达量非常低)和轻链 (IgK/L)。结果显示,随着起始量的增加,检测到的克隆型数量也随之增加。
Panel B. 结果显示,重链和轻链的克隆型数量随着起始量的增加也随之增加。
 
 
产品详情请点击:小鼠BCR分析SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)
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单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP & SMART-Seq mRNA Single Cell酶试剂盒Takara Clontech

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单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP & SMART-Seq mRNA Single Cell
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634786 SMART-Seq mRNA Single Cell LP 24 Rxns ¥18,634 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
Clontech 634787 SMART-Seq mRNA Single Cell LP 96 Rxns ¥63,356 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
Clontech 634788 SMART-Seq mRNA Single Cell LP 4×96 Rxns ¥228,082 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
Clontech 634789 SMART-Seq mRNA Single Cell 24 Rxns ¥15,791 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
Clontech 634790 SMART-Seq mRNA Single Cell 96 Rxns ¥53,691 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
Clontech 634785 SMART-Seq mRNA Single Cell 4×96 Rxns ¥193,290 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
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SMART-Seq mRNA Single Cell LP & SMART-Seq mRNA Single Cell
◆ 操作简便,基于Plate的工作流程 – 可直接以FACS或其他方法分选的单细胞起始
◆ 单管操作流程 – SMART-Seq mRNA Single Cell LP包含完整的cDNA合成和文库构建流程,分别在单管中进行,减少样品损失与混淆,降低手动操作误差
◆ 灵敏度高且一致性好 – 非常适用于单细胞(尤其是RNA含量非常低的细胞和细胞核)RNA-Seq的研究,可检测更多基因
◆ 可靠的全长cDNA分析 – 性能优于许多现有的单细胞全长cDNA合成方法,例如Smart-seq2
◆ 测序性能 – SMART-Seq mRNA Single Cell LP搭配Unique Dual Index kits(单独购买),即便多个文库pool后用高通量型Illumina测序仪(如Novaseq)分析,也能得到正确结果
◆ 更高的文库产量 – 更便于使用高通量型Illumina测序仪分析(如Novaseq),或保存剩余的文库用于多次测序
◆ 高度灵活的工作流程 – 可与自动化设备兼容
    ◇ SPT Labtech mosquito HV user guide
    ◇ Formulatrix MANTIS Microfluidic Liquid Handler user guides
        · Full-volume
        · Quarter-volume

 

■ 产品说明:
SMART-Seq mRNA Single Cell Kit (SSmRNA Single Cell) 和SMART-Seq mRNA Single Cell LP Kit (SSmRNA Single Cell LP) 是两款具有高灵敏度和高可再现性、适用于单细胞和单个细胞核的RNA-Seq分析试剂盒。试剂盒采用oligo(dT)引物,可从一些RNA含量非常低的单细胞(如PBMC、T细胞、B细胞)直接起始,合成高品质的全长cDNA。使用SSmRNA Single Cell LP kit搭配 Unique Dual Index kits (单独购买),最多可以制备384 Illumina测序文库。SSmRNA Single Cell LP kit提供完整的单细胞RNA-Seq分析流程,包含从样本制备cDNA、文库构建以及搭配使用的生物信息学分析软件进行数据分析的流程。
SSmRNA Single Cell是基于SMART技术(Switching Mechanism at 5′ End of RNA Template),提供全长转录本信息,支持分析转录本异构体、融合基因、点突变等,具有更高的再现性和均一的gene body覆盖度,而且高GC含量转录本也能得到正确的分析。同时,Takara科学家对这一技术进行优化改良,使得这个试剂盒更适合单细胞分析,能得到更多有效reads、更高的基因检测数,对珍贵样本的分析更加深入!
SSmRNA Single Cell LP在包含核心的cDNA合成试剂基础上,同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术(U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823)及单次使用的双端特殊index(UDI),提供完整的单细胞cDNA合成到文库构建的实验体验。建库试剂中包含片段化酶,以实现对合成cDNA的片段化,利用特别的茎环形接头构建高品质Illumina文库。在建库阶段,单管两步操作、过程中无需纯化、2 h即可建成文库!
如果是以高品质的少量细胞(<1,000)或者微量Total RNA起始时,推荐使用SMART-Seq mRNA LP Kit或SMART-Seq mRNA LP (with UMIs) Kit。
如果是以随机引物起始,对少量细胞或者降解的Total RNA样本进行RNA-Seq分析时,推荐使用SMART-Seq Stranded Kit。
 
■ 实验流程概要:
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
图1. SMART-Seq mRNA Single Cell & SMART-Seq mRNA Single Cell LP的cDNA合成流程
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
图2. SMART-Seq mRNA Single Cell LP的文库制备工作流程
 
■ 数据展示:
注:以下展示来源于SMART-Seq Single Cell Kit (SSsc) 和 SMART-Seq Single Cell PLUS (SSsc PLUS)的数据。因为两者分别是SMART-Seq mRNA Single Cell 和SMART-Seq mRNA Single Cell LP等效替换品。
 
灵敏度更高的单细胞全长转录组分析
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
图3. 与Smart-seq2法的比较
 
Takara科学家以淋巴母细胞系GM12878单细胞为样本制备文库,分别采用SMART-Seq Single Cell Kit(SSsc,18个重复)和Smart-seq2法(Smart-seq2,20个重复)合成cDNA(均进行19个PCR循环扩增),所有样本都均一化至1.75M paired-end reads,然后制备RNA-Seq文库并进行测序分析。
Panel A 根据cDNA的制备方法不同,结果也不同。相比而言,Smart-seq2结果中比对到线粒体基因组的比率较高,而检测到基因鉴别的reads数相对较少。
Panel B SMART-Seq Single Cell Kit能检测到比Smart-seq2更多的基因。
 
SMART-Seq mRNA Single Cell LP提供完整的单细胞RNA-Seq建库体验!
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
图4. 与其他同类产品比较数据
 
Panel A. 以10 pg小鼠脑total RNA起始,采用SMART-Seq Single Cell Kit完成cDNA合成。随后分别采用SSsc Plus Kit中的SMART-Seq Library Prep Kit模块与市面上较常用的A公司试剂盒构建文库,并比较性能差异。
Panel B. 从测试数据中可以看出,SSsc PLUS Kit所建文库的产量是A公司Kit产量的5倍,而更高的文库产量更适于高通量型Illumina测序仪,如Novaseq。
Panel C. 两种方法所建文库随后用Nextseq 500完成测序,并对TPM(Transcripts per million)≥0.1的基因数进行统计。相较于A公司文库,SSsc PLUS文库能检出更多的基因,从同样的cDNA起始能“捕获”更全的信息!
 
 
产品详情请点击:单细胞mRNA全长分析SMART-Seq mRNA Single Cell LP &  SMART-Seq mRNA Single Cell
 
 

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EnGen® Seq1 Cas9 核酸酶 #M0668T 500 pmol-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 基因编辑 – 应用于CRISPR工作流程中的NEB特色产品

EnGen® Seq1 Cas9 核酸酶                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
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#M0668T
500 pmol
1,899.00

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产品特点:

PAM 序列(5´- NAGA- 3´)允许靶向额外的基因组区域
是直接导入 Cas9/sgRNA 复合物进行基因编辑的理想选择
与 EnGen 突变检测试剂盒(NEB #E3321S)兼容
体外应用时,在 20°C至 45°C范围内具有活性
 

概述:

 该酶克隆自马链球菌(Streptococcus equinus),是一种由 RNA 引导的核酸内切酶,可在靶向位点特异切割双链 DNA。靶向切割需要由 Cas9 和 116 nt sgRNA 组成的核糖核蛋白复合物。sgRNA 编码一个 20 核苷酸序列,与非靶链上 5´–NAGA–3´ 原间隔区相邻序列(PAM)上游的 DNA 靶向互补。EnGen Seq1 Cas9 在 PAM 上游的第 3 个碱基外进行 DNA 双链切割。EnGen Seq1 Cas9 在其蛋白质的 N 端和 C 端带有 SV40(Simian virus 40)T 抗原核定位序列(NLS)。

 
sgRNA 引导 S. equinus Cas9 核酸酶切割靶标 DNA 示意图
 
EnGen® Seq1 Cas9 核酸酶                               #M0668T 500 pmol
 
上图中,S. equinus Cas9(Seq1 Cas9)蛋白以米色显示,sgRNA 以蓝色显示,DNA 以灰色、绿色和红色显示。DNA 靶标以及前间隔序列以绿色显示,图中 R-loop 区域展示了靶标序列与向导 RNA 互补配对。Cas9 与 DNA 结合所需的 PAM 序列(protospacer adjacent motif)以红色显示,黑色三角标注 DNA 的切割位置。
 

NEBNext ChIP-Seq 文库制备试剂盒(停产) #E6200L 60 次反应-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 用于二代测序的 NEBNext® 试剂 – 适用于 Illumina 测序平台/Ultra II DNA & RNA

NEBNext ChIP-Seq 文库制备试剂盒(停产)                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存
武汉库存

#E6200L
60 次反应
19,689.00

#E6200S
12 次反应
4,929.00

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概述

该产品已停产,推荐替代产品为  NEBNext ChIP-Seq  文库制备预混液试剂盒(NEB#6240) 或  NEBNext Ultra II DNA 文库制备试剂盒(NEB#7645)

 

请联系我们。 NEBNextSelector.neb.com 可以使用在线产品选择工具进行产品选择。

高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit酶试剂盒Takara Clontech

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高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635040 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 96 Rxns ¥50,508 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
Clontech 635041 SMART-Seq v4 3’ DE Kit 192 Rxns ¥93,693 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit 高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
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SMART-Seq v4 3’DE Kit—简便的高性能单细胞差异表达分析
· 升级的SMART技术—带有LNA修饰的SMART-Seq v4 oligo 加升级的配方带来更好的性能
   (灵敏度高,更好重复性,更多的GC-rich基因)
· 末端捕获流程—大部分reads集中于3’端,同时维持出色的灵敏度,缩减了差异表达分析需要
   的reads数
· 高达12个样品pool—内嵌的indexes作为细胞barcode,可以实现在每个测序lane中高达12个样品
   的pool,进一步缩短时间,降低成本
 
单细胞转录组研究对于研究细胞群内不同单细胞表达情况非常重要。Takara Clontech 研发了单细胞mRNA转录本末端捕获技术,该技术侧重于3’端的末端捕获,使您可以用更少的测序reads获得高品质测序数据。本试剂同样采用了领先的SMART-Seq v4 技术,结合了SMART (Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template) 技术和LNA (Locked Nucleic Acid) 技术。
本试剂除了侧重于mRNA转录本3’端外,还包含了内嵌的indexes作为Read2的细胞barcode,可以实现在每个测序lane中高达12个样品的pool,进一步缩减了时间和研究成本。本试剂可以1–10.5 μl体系起始,依赖于Illumina Nextera® XT DNA Library Preparation Kit。本试剂设计并经验证可以用于以下测序平台的cDNA文库和测序文库制备:HiSeq®,NextSeq®,MiSeq®和MiniSeq®
 
高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
图1. 末端捕获方法简介
 
高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
表1. K562单细胞pool文库主要测序数据
 
高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
图2. 从K562单细胞中检测到的基因数
 
Technote:
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高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
 
产品详情请点击:高性能单细胞差异表达分析SMART-Seq v4 3’DE Kit
 
 

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甲基化DNA-Seq酶试剂盒Takara Clontech

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甲基化DNA-Seq
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635023 EpiXplore Meth-Seq DNA Enrichment Kit 12 Rxns ¥15,242 甲基化DNA-Seq 甲基化DNA-Seq 甲基化DNA-Seq
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EpiXplore Meth-Seq DNA Enrichment Kit—甲基化DNA下一代测序
· 快速,用户友好的分离甲基化和非甲基化DNA片段操作流程
· 无需接头连接即可构建测序文库
· 25 ng-1 μg的剪切基因组DNA起始
· 约4 h即可以富集的DNA构建Illumina-ready测序文库
 
EpiXplore Meth-Seq DNA Enrichment Kit 是可以从剪切的基因组DNA中分离甲基化和非甲基化片段,并以富集的DNA片段构建Illumina测序文库的完整系统。富集过程采用目前EpiXplore Methylated DNA Enrichment Kit采用的his-tagged MBD2蛋白质和Capturem Nanoprep Columns进行,约2 h即可分离甲基化、非甲基化片段。接下来,采DNA SMART技术,可以甲基化(或非甲基化,若需要)DNA片段构建Illumina测序文库。
文库构建过程中,DNA SMART技术可以不通过接头连接的方法在DNA片段末端添加Illumina测序接头。这种高灵敏度的技术可以微量DNA样品构建高效测序文库,并且操作时间短,只需4 h。
 
甲基化DNA-Seq
图1. DNA SMART技术流程
 
甲基化DNA-Seq
图2. 甲基化、非甲基化DNA片段分离流程
 
Technote:
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甲基化DNA-Seq
 
产品详情请点击:甲基化DNA-Seq
 
 

页面更新:2019-11-06 10:36:41

自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)酶试剂盒Takara Clontech

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自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 640257 SMART-Seq Pro Application Kit 2 Chips 询价 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
Clontech 640192 ICELL8® 384-Well Source Plate and Seal Each 询价 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
Clontech 640018 MSND 384-Well Source Plate and Seal 20/Pack 询价 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
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自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 延伸 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro) 自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
 
  自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
 
SMART-Seq技术助力ICELL8 cx系统单细胞全长转录组分析方案
 
全长序列覆盖可以实现对整个转录的差异表达分析,并且可以对基因融合、剪接体这类生物标志物进行检测。高灵敏度的SMART-Seq Pro可以胜任以上分析需求。
SMART-Seq Pro Application Kit将SMART-Seq试剂与ICELL8 cx Single-Cell System(Cat No. 640188)相结合,并整合了生物信息学工具,提供一套端到端的单细胞全长转录组分析流程,一次实验可以对1,200~1,500个分离的单细胞进行高效的全长转录组分析。
通过ICELL8 cx系统将细胞分注到ICELL8 350v Chip(Cat No. 640019)空白微孔芯片中。使用ICELL8 cx CellSelect Software鉴定出含单个细胞的微孔,文库构建试剂只被分注到这些选中的微孔中。经过一系列分注和扩增步骤后,获得无偏倚的全长cDNA,并通过Illumina Bead-Linked Transposome(BLT)完成酶切片段化。在这一扩展性的工作流程中,cDNA扩增阶段引入了Illumina特异性接头序列,生成的文库已连接index接头,可直接用于Illumina测序平台。测序过程结束后,获得的测序数据可直接导入Cogent NGS软件工具进行生物信息学分析,解释测序结果。
 
NOTE:旧版本SMART-Seq Application Kit(Cat No. 640222)依然可以购买。
 
更多孔板测序应用,请参见 单细胞RNA-Seq / DNA-Seq
 
■ 概述
· 端到端的解决方案:从文库制备到测序数据分析工具
· 覆盖全长mRNA:捕获转录组中“深藏”的关键生物标志物,如基因融合、剪接异构体
· 高通量单细胞分析:可以平行地从>1,000个单细胞中生成测序数据
· 样品配置灵活:一次实验最多可对八种细胞样品进行分析
· 减少样品操作:减小数据波动,构建测序文库前自动鉴定并分选出感兴趣的细胞,仅对这些细胞进行试剂分注
· Illumina平台测序文库:制备的测序文库适用于Illumina全系平台
 
■应用
用于Illumina平台上高通量全长单细胞转录组测序文库制备
自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)
图1. SMART-Seq Pro和Smart-seq2在PBMCs中基因检测结果比较
 
 
自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)Technote:
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自动化高通量的单细胞全长转录组分析(SMART-Seq Pro)点击下载SMART-Seq Pro海报
 
 

页面更新:2023-02-09 11:55:02

单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech R400750 SMART-Seq® Single Cell PLUS Kit 48 Rxns ¥49,741 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
Clontech R400744 Unique Dual Index Kit – 48U 48 Rxns ¥5,542 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
Clontech 634470 SMART-Seq Single Cell Kit 12 Rxns ¥13,875 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
Clontech 634471 SMART-Seq Single Cell Kit 48 Rxns ¥39,269 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
Clontech 634472 SMART-Seq Single Cell Kit 96 Rxns ¥68,325 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
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单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 延伸     单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit 单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
         
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
 
SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell Plus Kit:更胜一筹的单细胞mRNA全长分析
· 简便,基于Plate的工作流程 - 可直接以FACS或其他方法分选的单细胞起始
· 单管操作流程 - SMART-Seq Single Cell PLUS Kit包含完整的cDNA合成和文库构建流程,分别在单管中进行,减少样品损失与混淆,降低手动操作误差
· 灵敏度高和一致性好 - 非常适用于单细胞(尤其是RNA含量非常低的细胞和细胞核)RNA-Seq的研究,可检测更多基因
· 可靠的全长cDNA分析 - 性能优于许多现有的单细胞全长cDNA合成方法,例如Smart-seq2
· 增强的测序性能 - SMART-Seq Single Cell PLUS Kit整合双端特殊index(UDI),即便多个文库pool后用高通量型Illumina测序仪(如Novaseq)分析,也能得到正确结果
· 高度灵活的工作流程 - 可与自动化设备兼容
· 更高的文库产量 - 更便于使用高通量型Illumina测序仪分析(如Novaseq),或保存剩余的文库用于多次测序
 
产品说明
SMART-Seq Single Cell Kit (SSsc) 和SMART-Seq Single Cell PLUS Kit (SSsc PLUS) 是Takara科学家专门研发推出的两款具有高灵敏度和高可再现性的试剂盒,适用于单细胞和单个细胞核的RNA-Seq分析。试剂盒采用oligo(dT)引物,可从一些RNA含量非常低的单细胞(如PBMC, T细胞,B细胞)直接起始,并完成全长cDNA的捕获。
 
SMART-Seq Single Cell Kit是基于经典的SMART技术优化改良而来的单细胞cDNA合成试剂盒,可以提供全长转录本的信息,支持分析转录本异构体、融合基因、点突变等广受科研人员关注的研究内容,具有更高的灵敏度和再现性。此外,该试剂盒还能提供均一的gene body覆盖度,高GC含量转录本也能得到正确分析。这些改进使得SSsc更适合单细胞分析,能得到更多有效reads、更高的基因检测数,对珍贵样本的理解更透彻!这些特点使SSsc远远超过许多现有的单细胞全长cDNA合成方法,例如SMART-Seq2!
 
SMART-Seq Single Cell PLUS Kit在包含核心的cDNA合成试剂基础上,同时整合了Takara Bio Group专利性的文库构建技术(U.S. Patents 7,803,550, 8,399,199, 8,728,737, 9,598,727, 10,196,686, 10,208,337, and 11,072,823)及单次使用的双端特殊index(UDI),提供完整的单细胞cDNA合成到文库构建的实验体验。建库试剂中包含片段化酶,以实现对合成cDNA的片段化,接着利用特别的茎环形接头构建高品质Illumina文库。在建库阶段,单管两步操作、过程中无需纯化、2 h即可建成文库!
 
 
SSsc:更胜一筹的单细胞全长转录组分析!
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
The SMART-Seq Single Cell Kit outperforms Smart-seq2
图1. 与Smart-seq2法的比较
 
Takara科学家以淋巴母细胞系GM12878单细胞为样本制备文库,分别采用SMART-Seq Single Cell Kit(SSsc,18个重复)和Smart-seq2法(Smart-seq2,20个重复)合成cDNA(均进行19个PCR循环扩增),所有样本都均一化至1.75M paired-end reads,然后制备RNA-Seq文库并进行测序分析。
 
Panel A 根据cDNA的制备方法不同,结果也不同。相比而言,Smart-seq2结果中比对到线粒体基因组的比率较高,而检测到基因鉴别的reads数相对较少。
Panel B SMART-Seq Single Cell Kit能检测到比Smart-seq2更多的基因。
 
SSsc PLUS Kit:不只是一个Kit,更是完整且更胜一筹的单细胞RNA-Seq建库体验!
 
为了使单细胞cDNA合成、文库构建实验“一步”到位,我们全新推出了SSsc PLUS Kit,从此您无需再单独购买建库模块,也不用“忍受”不同厂家不同步的供货周期。
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
从高灵敏度、高重复性的cDNA合成出发,构建更高品质Illumina文库
 
Takara科学家以10 pg小鼠脑total RNA起始,采用SMART-Seq Single Cell Kit完成cDNA合成。随后分别采用SSsc Plus Kit中的SMART-Seq Library Prep Kit模块与市面上较常用的A公司试剂盒构建文库,并比较性能差异。
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
从测试数据中可以看出,SSsc PLUS Kit所建文库的产量是A公司Kit产量的5倍,而更高的文库产量更适于高通量型Illumina测序仪,如Novaseq。
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
两种方法所建文库随后用Nextseq 500完成测序,并对TPM(Transcripts per million)≥0.1的基因数进行统计。相较于A公司文库,SSsc PLUS文库能检出更多的基因,从同样的cDNA起始能“捕获”更全的信息!
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
比较数据来源于Takara Bio USA, Inc.
 
单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS KitSSsc点击图片下载
 
 
产品详情请点击:单细胞mRNA全长分析SMART-Seq Single Cell Kit & SMART-Seq Single Cell PLUS Kit
 
更多实验数据:
SSsc Kit
SSsc PLUS Kit
 
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单细胞NGS解决方案
 
 
 

页面更新:2024-02-01 08:20:39

单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634442 SMART-Seq® Stranded Kit 12 Rxns ¥13,136 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
Clontech 634443 SMART-Seq® Stranded Kit 48 Rxns ¥43,617 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
Clontech 634444 SMART-Seq® Stranded Kit 96 Rxns ¥57,771 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit 单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
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SMART-Seq® Stranded Kit
SMART-Seq® Stranded Kit:以单细胞起始,构建高质量的链特异性RNA-seq文库
· 操作简便:以1–1,000个细胞 或10 pg-10 ng的总RNA起始,仅需7h即可完成文库制备;
· 高灵敏度:可以单细胞起始,保留链特异性,最终获得全长总RNA序列信息;
· 高再现性:准确检测包含编码和非编码RNA在内的全部转录组;
· 用途广泛:适用于降解的样本;
· 适用对象:人、小鼠、大鼠。
 
SMART-Seq® Stranded Kit能够直接从1-1,000个完整细胞(或10 pg-10 ng总RNA)起始,制备链特异性Illumina测序文库。本试剂采用随机引物法可以制备完整的转录组文库,并适用于部分降解及低品质的RNA。此外,本试剂采用专有的ZapR技术,在文库制备过程中去除核糖体cDNA。
 
如果是以oligo-dT引物起始对微量高品质的RNA进行cDNA合成时,推荐使用 SMART-Seq v4 Ultra Low Input RNA Kit for Sequencing 或SMART-Seq HT Kit试剂盒。
 
单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
图1. SMART-Seq Stranded Kit的技术流程
 
单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
图2. 使用SMART-Seq Stranded Kit制备文库的结构特征
 
接头序列包含:通过PCR 1反应添加的可以与Illumina流动池结合生成簇的P7、P5序列(P7以淡蓝色表示,P5以红色表示),用于区分单个lane上多个样本的Index序列(Index 1 [i 7] 序列连接在P7端,Index 2 [i 5]连接在P5端)。并且还包括识别测序引物区域的Read 2(紫色)和 Read 1(绿色)。通过Read 1起始得到的原始RNA的反义链序列,Read 2起始获得的是原始RNA的正义链序列。其中,通过Read 2起始时,前3个碱基(XXX)是SMART-Seq Stranded Adapter衍生的序列。因此在双端测序时,需要在mapping前去掉这3个碱基。
 
单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
表1.不同样本起始量的分析结果
 
以人脑总RNA 10 pg至10 ng不同量起始,使用SMART-Seq Stranded Kit制备RNA-Seq文库。该表中所显示的数据是三次重复的平均值,且重复之间相关性系数非常高(Pearson/Spearman表示)。即使起始量为10 pg时,也具有非常高的重现性。
 
单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
图3. 在低起始量时,SMART-Seq Stranded Kit和Pico v2的比较
 
Panel A.以人脑总RNA (50 pg-10 ng)起始,分别使用SMART- Seq Stranded Kit和SMARTer Stranded Total RNA-Seq Kit v2 -Pico Input Mammalian (Pico v2)制备RNA-Seq文库(均做三次重复)。从测序数据随机抽取250万paired-end reads进行生物学信息分析。
 
Panel B.比较这两个试剂盒在总RNA以 50 pg起始制备文库的转录表达水平 (见Panel A), SMART-Seq Stranded Kit (Pearson =0.97)的再现性高于Pico v2 (pearson =0.92)。
 
单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
 
单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
图4. 不同起始量样本的高重现性
 
利用FACS分离出A375细胞,分别以1-1,000个细胞起始使用SMART-Seq Stranded Kit制备测序文库。其中,以5-1,000个细胞起始时,均做两个重复;以单个细胞起始时,做12个重复。为了作比较,同时使用从两种1,000个细胞中纯化的总RNA制备文库。
 
Panel A.:1-1,000个细胞起始的分析结果;
 
Panel B.:通过聚类热图展示了Panel A.中所示的所有样本的Euclidea距离,以及Pearson相关系数(范围为0.85至0.99)。其中单细胞样本标记为Cell1-Cell12,其他样本分别标记为a-b。
 
Technote单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
 
产品详情请点击:单细胞链特异RNA-Seq分析SMART-Seq Stranded Kit
 
 

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原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed)酶试剂盒Takara Clontech

上海金畔生物科技有限公司代理Takara酶试剂盒全线产品,欢迎访问官网了解更多产品信息和订购。

原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 634936 SMARTer® Ultra® Low RNA Kit for Illumina® Sequencing(库存销售完毕即终卖) 100 Rxns ¥108,452 原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed) 原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed) 原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed)
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原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed)
我们提供多代单细胞转录组分析试剂盒。这些试剂盒的核心技术-SMART技术(Switching Mechanism at 5’ End of RNA Template)提供了全长转录信息,使分析剪切异构体、基因融合、点突变等成为可能。
 
产品详情请点击:原始的单细胞RNA-Seq (dT Primed)
 
 

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